课件 002 兽医微生物学教学课件 1
兽
医
微
生
物
学
兽医微生物学
(多媒体教学课件 )
天津农学院动科系动物预防医学教研室制作
2003/02/28
课件 002 兽医微生物学教学课件 3
绪言 共六部分，介绍微生物与微生物学的概念，微生物学发展简史，微生
物学理论与技术成就及应用，兽医微生物学的地位、任务与贡献。
细菌总论 共七章，介绍细菌的形态、构造、生理，消毒与灭菌，细菌生态、
致病机理、遗传变异，细菌分类与命名等。
免疫基础 共七章，介绍抗原抗体，免疫系统，抗感染免疫，变态反应，免
疫调节，免疫技术及应用等。
细菌各论 共十二章，介绍各属重要病原细菌的形态、生化特性、致病性、
微生物学诊断和免疫防治等。
真菌 共二章，介绍真菌的分类、形态、生化及致病特性，真菌病的诊断与
防治等。
病毒 共十四章，介绍病毒的形态、构造、繁殖、遗传、培养，病毒的致病
性。各科属重要病毒形态、生化及致病特性，微生物学诊断和防治等。
实验 共十多个，显微镜油镜的使用，细菌形态及构造观察，细菌抹片制备
及染色，培养基的制备，细菌的分离培养、生长表现观察、生化试验、药
敏试验，沉淀反应和凝集反应，重要病原菌的认识，真菌与病毒培养测定
等 。
内
容
简
介
课件 002 兽医微生物学教学课件 4
第十五章 革兰氏阳性球菌
第十六章 肠杆菌科
第十七章 弧菌科
第十八章 巴氏杆菌科及相关属
第十九章 革兰氏阴性需氧杆菌
第二十章 革兰氏阴性无芽孢微需氧和厌氧菌
第二十一章 革兰氏阳性无芽孢杆菌
第二十二章 革兰氏阳性产芽孢杆菌
第二十三章 分支杆菌及相似属
第二十四章 螺旋体
第二十五章 霉形体
第二十六章 立克次体及衣原体
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第二十四章 螺旋体
第一节 概述
第二节 疏螺旋体属
第三节 蛇形螺旋体属
第四节 密螺旋体属
第五节 细螺旋体属
课件 002 兽医微生物学教学课件 6
第一节 概述
螺旋体 是一类细长, 柔软, 弯曲呈螺旋状, 能活
泼运动的原核单细胞微生物 。 它的基本结构与细菌
类似, 细胞壁中有脂多糖和壁酸, 胞浆内含核质,
以二分裂繁殖 。 依靠位于胞壁和胞膜间的 轴丝 的屈
曲和旋转使其运动, 这与原虫类似 。 所以螺旋体是
介于细菌和原虫之间的一类微生物 。
螺旋体广泛存在于水生环境, 也有许多分布在人
和动物体内 。 大部分营自由的腐生生活或共生, 无
致病性, 只有一小部分可引起人和动物的疾病 。
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1,形态与结构 螺旋体细胞呈螺旋状圆柱形, 具有多
个完整的螺旋 。 其大小极为悬殊, 长可为 5-250um，
宽可为 0.1-3um。 某些可通过细菌滤器 。 细胞的螺数,
螺间及弧幅各不相同, 在分类上有意义 。
轴丝 螺旋体的细胞中心为原生质柱, 外有 2-100
根以上的 轴丝, 又称轴鞭毛或内鞭毛, 现亦简称为
鞭毛, 沿原生质柱的长轴缠绕其上 。 轴丝夹在细胞
壁外鞘和细胞膜之间 。 螺旋体通过轴丝而运动, 主
要有 3种方式,① 沿长轴旋转, 快速前进； ② 细胞屈
曲伸缩前进； ③ 螺旋状或蛇状前进 。
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螺旋体具有不定形的核, 无芽孢, 核酸兼有
RNA和 DNA,以二等分横分裂法繁殖 。
染色特性 都是革兰氏阴性, 多数不易着色 。 姬
姆萨氏染色效果较好, 可染成 红色 或 蓝色 。 蓝色多
属腐生性螺旋体 。 常用 镀银染色法 染色, 使之变租
而显黑褐色 。 也用印度墨汁或刚果红负染, 螺旋体
透明无色, 背景衬有颜色, 反差明显 。 以相差和暗
视野显微镜观察螺旋体效果良好 。 能检查形体又可
分辨运动方式, 甚为常用 。
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2,培养特性 螺旋体的培养有的较为困难, 多数需
厌氧培养 。 但有些属种, 特别是细螺旋体 (又称 钩
端螺旋体 )的培养并不难 。 个别致病性螺旋体可采
用含血液, 腹水或其他特殊成分的培养基培养 。 有
些螺旋体尚不能用人工培养基培养 。
3,分类 螺旋体目, 下分为两个科, 即螺旋体科和
细螺旋体科 。 细螺旋体科只有一个属, 即细螺旋体
属 （ 钩端螺旋体属 ） 。 螺旋体科又由螺旋体属, 脊
螺旋体属, 密螺旋体属, 疏螺旋体属和蛇形螺旋体
属五个属组成 。 其中与兽医有关的主要有 疏螺旋体
属, 密螺旋体属, 蛇形螺旋体属和细螺旋体属 。
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课件 002 兽医微生物学教学课件 11
第二节 疏螺旋体属
本属成员细胞呈螺旋状, 长 3-20um,宽 0.2-0.5um，
每条菌体有 3-10个不规则的疏松螺旋, 有 15-20根轴
丝 。 以螺旋状推进方式活泼运动 。 用姬姆萨氏染液
着色良好 。 易培养, 微需氧或厌氧 。
伯氏疏螺旋体
是 莱姆病 (Lyme disease)的病原体 。 莱姆病最早于
1975年在美国的莱姆镇发现, 故而得名, 现己遍布
全世界 。 此病由 硬蜱 为传播媒介, 感染人和犬, 牛,
马等动物, 致关节炎等多种疾病 。
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1,生物学特性 菌体细长, 长约 20-30um,直径约
0.2um,有 4-20个大而宽疏的螺旋 。 其鞭毛缠绕着菌
体, 位于外膜和胞浆膜之间, 称之为轴鞭毛 。
2,致病性 伯氏疏螺旋体 致人, 犬, 牛和马的关节炎,
被 硬蜱 叮咬的部位呈圆环状疹块, 之后表现为游走
性关节炎, 可见破行, 关节肿胀, 发热及淋巴结肿
大 。
硬蜱在吸吮感染动物的血液之后, 便可在数年内
都具有传染性 。 啮齿动物是伯氏疏螺旋体的天然贮
主 。
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3,微生物学检查 蜱叮咬部的附近皮肤, 患病关节
的关节液可用于病原学检测 。 用暗视野显微镜或作
姬姆萨染色等可观察到疏螺旋体 。
伯氏疏螺旋体培养困难, 可用改良的 Kelley氏培
养基分离培养, 培养物每周用暗视野显微镜检查 。
血清学诊断可行 。 ELISA最为常用 。 犬在感染 4
周后即可测出抗体, 3个月后抗体达高峰, 此时犬
可持续感染 。 抗体滴度维持高水平至少 18个月 。
PCR,限制性酶切及 DNA杂交等分子生物学手
段亦用于诊断 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 14
4,防治 强力霉素或阿莫西林 可用于莱姆病的治疗,
但只能一定程度缓解病损, 并不能完全消灭伯氏疏螺
旋体 。
在疫区可预防接种 。 有两种疫苗, 一种是全菌灭活
疫苗, 有不良反应, 效果不好 。 另一种亚单位疫苗,
为纯化的 OspA。 用它免疫犬可产生抗体, 当蜱吸血
时, 伯氏疏螺旋体被抗体阻断, 不能从蜱的中肠向唾
液腺移行, 从而使蜱不再感染新的吮血对象 。
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第三节 蛇形螺旋体属
蛇形螺旋体属是一个新属, 包括 猪痢蛇形螺旋体 和
无害蛇形螺旋体 。
本属特性 细胞呈疏松, 规则的螺旋形, 长 7-9um，
宽 0.3-0.4um。 有 8,9根轴丝, 呈屈曲和蛇形运动或
移位运动 。 有机营养 。 可在含 10％ 胎犊, 犊牛或兔血
清的酪蛋白胰酶消化物大豆胨汤 (TSB)或脑心浸液汤
(BHIB),36-42℃ 厌氧生长 。 在 TSB 血液琼脂平板,
38℃ 培养 48-96h形成扁平, 半透明的菌落, 大小 0.5-3
mm,可呈现微弱或强 β溶血 。
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猪痢蛇形螺旋体
1.致病性 猪痢疾 又称血痢, 黑痢, 出血性痢疾, 粘膜
出血性痢疾等, 由猪痢蛇形螺旋体引起, 最常发生于
8-14周龄幼猪 。 主要症状是严重的粘膜出血性下痢和
迅速减重 。 特征病变为大肠粘膜发生部液渗出性 (卡他
性 ),出血性和坏死性炎症 。 经口传染, 病的传播迅速,
发病率较高 (约 75％ )而致死率较低 (5％ -20％ ) 。
2,形态结构及染色特性 本螺旋体形态结构与其属的
描述一致, 菌体多为 2-4个弯曲, 两端尖锐 。 革兰氏阴
性, 姬姆萨氏和镀银法均能使其较好着色 。
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3,培养特性 严格厌氧, 一般厌氧环境不易培养成功,
必须使用预先还原的培养基, 并置于含的 H2(或 N2)和
CO2(二者比例为 80,20)混合气体以及以冷钯为触媒
的环境中才能生长 。 对培养基要求苛刻, 通常使用含
10％ 胎牛 (或犊牛或兔 )血清或血液的 TSB或 BHIB培养
基 。 在 TSB血液琼脂上, 38℃ 48-96min可形成扁平,
半透明, 针尖状, 强 β溶血性菌落 。
4,抗原与免疫性 猪痢疾密螺旋体有两种抗原成分：
脂多糖, 蛋白质 （ 特异性 ） 。 该菌有 8个血清型 。 自
然发病猪康复后, 可产生相应的抗体, 具有一定的保
护力 。
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5,微生物学检查
（ 1） 直接镜检 有以下 3种方法。
染色镜检,以病猪的新鲜粪便粘液，或病变结肠
粘膜刮取物制成薄涂片，染色镜检。多用姬姆萨氏
法染色法。也可用印度墨汁作负染或镀银染色法染
色镜检。
相差或暗视野显微镜活体检查,待检样品与适量
生理盐水混合后制成压滴标本片，用相差或暗视野
显微镜下镜检。若每个高倍视野中见有 2-3个或更
多个蛇样运动的较大螺旋体即可确诊。
课件 002 兽医微生物学教学课件 19
染色组织切片检查,将采集的病变肠组织先用 10
％甲醛缓冲液固定后切片，再用维多利亚蓝染色法
染色。镜检时可见螺旋体大量存在组织表面及粘液
囊腔内，有时数量多到堆积成网状。
（ 2）分离培养,分离培养方法。
过滤培养法,将样品作 5-10倍稀释，轻度离心，
上清用 0.8um和 0.45um滤膜依次过滤。取滤液直接
涂布接种于鲜血琼脂平板上，厌氧培养 37-38℃ 培
养 3-6d，每隔 2d检查 1次，当观察到平板上出现 β溶
血现象时，即可挑取可疑菌落，作成悬滴或压滴标
本，用暗视野显微镜检查。
课件 002 兽医微生物学教学课件 20
6,防治 对猪痢目前尚无可靠或实用的免疫制剂以
供预防之用 。 普遍采用抗生素和化学药物控制此病,
培育 SPF猪, 净化猪群 是防治本病的主要手段 。
第四节 密螺旋体属 (自学 ）
第五节 细螺旋体属
细螺旋体属成员是一大类纤细, 螺旋致密, 一端
或两端弯曲呈钩状的螺旋体, 故常称 钩端螺旋体,
简称钩体 。 大部分营腐生生活, 广泛分布于各种水
生环境中, 无致病性 。 一部分为寄生性和致病性的
螺旋体, 可 引起人和动物的细螺旋体病 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 21
1,形态结构与染色特性 呈纤细的圆柱形, 长 6-
20um,宽 0.1-0.2um,螺旋弧度 0.2-0.3um,至少有
18个弯曲细密规则的螺旋, 菌体一端或两端可弯曲
呈 钩状 。 其运动形式多样, 能翻转和屈曲运动, 也
可沿其长轴旋转而快速前进 。
细胞壁结构与革兰氏阴性杆菌相似。外膜位于原
生质柱和轴丝外层，相当于细菌荚膜。
革兰氏染色阴性 。镀银染色法和刚果红负染较好。
用暗视野显微镜较易观察其形态和运动力。
课件 002 兽医微生物学教学课件 22
2,培养及生化特性 需氧，对营养要求不高，较易
人工培养。在含血清和蛋白胨的培养基上生长良好。
钩体某些菌株能产生溶血素。
3,抵抗力 钩体 pH中性湿土和水中可存活数月，该
病主要经水源传播。对热和酸碱环境抵抗弱，
45℃30min, 50℃10min, 60℃10s 即可致死。 4℃ 冰
箱中可存活 1-2周,-70℃ 可保存 2年多。对各种化学
消毒剂和青霉素、金霉素、四环素等抗生素敏感性。
4,抗原结构 抗原分两种：表面抗原 (P抗原 )，为
多糖蛋白复合物，具有型特异性。内部抗原 (共同抗
原,S抗原 )，系类脂多糖复合物，具有属特异性。
课件 002 兽医微生物学教学课件 23
5,毒力因子 本病为动物源性疾病 。 毒力因子主要
有,吸附物质, 溶血素, 内毒素样物质, 细胞毒性
因子 。
6,感染途径及其所致疾病
（ 1） 传染源 钩体可感染大部分 哺乳动物和人 。 已
从 50多种动物检出钩体, 其中 鼠类和猪 是钩体的主
要贮存宿主和传染来源, 排菌期长 。
（ 2） 感染途径 人和家畜通过直接或间接地接触污
染源而被感染 。 途径,(1) 损伤的皮肤黏膜, 最为常
见； (2) 口腔, 咽喉头和肠道粘膜； (3) 动物咬伤或
吸血昆虫的叮咬, 引起感染； (4)通过交配或人工授
精 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 24
（ 3） 易感动物及症状 在家畜中以 牛和羊 对钩体的
易感性最高, 其次为 马, 猪, 犬, 水牛和驴 等, 许
多野生动物, 特别是鼠类易感 。
钩体病临床表现：急性病例的主要症状为 发热,
贫血, 出血, 黄疸, 血红素尿 及粘膜和皮肤坏死；
亚急性病例可表现为 肾炎, 肝炎, 脑膜炎 及产后泌
乳缺乏症；慢性病例则表现 虹膜睫状体炎, 流产,
死产及不育或不孕 。
（ 4） 钩体病的病程 约持续 7-8d的钩体菌血症 (前期
发热 )阶段和持续 2-3月或更长时间的钩体菌尿期 (后
期无热 )阶段 。 在前期阶段, 钩体于 血, 肝, 肾和脑
脊髓液 中, 而后期于 肾 内长期繁殖, 经尿排出 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 25
7,微生物学诊断 最后诊断有赖于微生物学检查 。
检查病料：即发病 7-8d内 (菌血症, 发热期 )可采集
血, 脑脊髓液, 剖捡可取 肝和肾 ；发病 7-8d后 (退热,
菌尿症期 ) 采集 尿液, 死后为 肾 。 方法,
（ 1） 直接镜检 可分 2种方法,
暗视野活菌检查,将病料差速离心集菌压滴标本
片镜检 。 如在暗视野中见有钧体菌的典型形态与运
动方式, 即可确认为钩体 。
染色镜检,多用改良镀银法和媒染法 。 前者使钩
体呈深黑色或灰色 。 后者, 钩体呈紫红色 。 姬姆萨
染色片中钩体呈紫色 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 26
（ 2） 分离培养 钩体的培养基很多, 常用的有柯氏
培养基等培养基 。 病料接种后, 置 28-30℃ 温箱内
培养, 每 5-7d观察钩体生长情况并取样镜检, 连续
四周 (最多至 3个月 )末检出钩体者可作阴性处理 。
（ 3） 动物接种试验 可用于病料内钩体的分离, 又
可作为菌株毒力测定 。 动物常用体重 150-200g幼龄
豚鼠或 50-60g金黄仓鼠 。
一般在接种后 1-2周动物出现体温升高和体重减
轻, 此时即可剖检, 取其肾和肝进行镜检和分离培
养 。 主要病变为内脏出血和皮下出血, 黄染 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 27
（ 4） 血清学检查 a,显微凝集溶解试验有高度型特
异性, 既是诊断钩体病最常用的方法之一, 又是钩
体分型的主要方法 。 b,补体结合试验 。 c,酶联免
疫吸附试验 (ELISA)。 d,SPA协同凝集试验等用于钩
体菌株鉴定, 分型, 抗原变异等的研究 。
8,免疫
疫苗有良好的免疫预防效果 。 初次免疫 2d后, 应
进行再次接种, 以后可每年接种 1次 。 所用疫苗应与
引起发病的菌株同型, 或使用多价疫苗 。 母牛免疫
接种后可使犊牛获得较高的母源抗体, 在出生后数
月内不受感染 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 28
复习思考题
1,什么是螺旋体?它的主要生物学特性有哪些?目前的
分类概况如何?
2,疏螺旋体属的基本特征有哪些?伯氏疏螺旋体引致
何病?如何诊断?
3,蛇形螺旋体属与密螺旋体属之间有何联系和区别?
该属的基本特征是什么?猪痢蛇形螺旋体应如何分离培养?
4,钩端螺旋体的形态及培养特征有哪些?它们的抗原
结构与其血清学分类有何关系?钩体的分类有何进展?
5,概述钩端螺旋体的致病因素及其主要特征, 动物钩
体病有哪些特点?有诊断意义的微生物学检查方法有哪些?
各有何特点?
课件 002 兽医微生物学教学课件 29
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2003/02/28
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绪言 共六部分，介绍微生物与微生物学的概念，微生物学发展简史，微生
物学理论与技术成就及应用，兽医微生物学的地位、任务与贡献。
细菌总论 共七章，介绍细菌的形态、构造、生理，消毒与灭菌，细菌生态、
致病机理、遗传变异，细菌分类与命名等。
免疫基础 共七章，介绍抗原抗体，免疫系统，抗感染免疫，变态反应，免
疫调节，免疫技术及应用等。
细菌各论 共十二章，介绍各属重要病原细菌的形态、生化特性、致病性、
微生物学诊断和免疫防治等。
真菌 共二章，介绍真菌的分类、形态、生化及致病特性，真菌病的诊断与
防治等。
病毒 共十四章，介绍病毒的形态、构造、繁殖、遗传、培养，病毒的致病
性。各科属重要病毒形态、生化及致病特性，微生物学诊断和防治等。
实验 共十多个，显微镜油镜的使用，细菌形态及构造观察，细菌抹片制备
及染色，培养基的制备，细菌的分离培养、生长表现观察、生化试验、药
敏试验，沉淀反应和凝集反应，重要病原菌的认识，真菌与病毒培养测定
等 。
内
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简
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第十五章 革兰氏阳性球菌
第十六章 肠杆菌科
第十七章 弧菌科
第十八章 巴氏杆菌科及相关属
第十九章 革兰氏阴性需氧杆菌
第二十章 革兰氏阴性无芽孢微需氧和厌氧菌
第二十一章 革兰氏阳性无芽孢杆菌
第二十二章 革兰氏阳性产芽孢杆菌
第二十三章 分支杆菌及相似属
第二十四章 螺旋体
第二十五章 霉形体
第二十六章 立克次体及衣原体
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第二十四章 螺旋体
第一节 概述
第二节 疏螺旋体属
第三节 蛇形螺旋体属
第四节 密螺旋体属
第五节 细螺旋体属
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第一节 概述
螺旋体 是一类细长, 柔软, 弯曲呈螺旋状, 能活
泼运动的原核单细胞微生物 。 它的基本结构与细菌
类似, 细胞壁中有脂多糖和壁酸, 胞浆内含核质,
以二分裂繁殖 。 依靠位于胞壁和胞膜间的 轴丝 的屈
曲和旋转使其运动, 这与原虫类似 。 所以螺旋体是
介于细菌和原虫之间的一类微生物 。
螺旋体广泛存在于水生环境, 也有许多分布在人
和动物体内 。 大部分营自由的腐生生活或共生, 无
致病性, 只有一小部分可引起人和动物的疾病 。
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1,形态与结构 螺旋体细胞呈螺旋状圆柱形, 具有多
个完整的螺旋 。 其大小极为悬殊, 长可为 5-250um，
宽可为 0.1-3um。 某些可通过细菌滤器 。 细胞的螺数,
螺间及弧幅各不相同, 在分类上有意义 。
轴丝 螺旋体的细胞中心为原生质柱, 外有 2-100
根以上的 轴丝, 又称轴鞭毛或内鞭毛, 现亦简称为
鞭毛, 沿原生质柱的长轴缠绕其上 。 轴丝夹在细胞
壁外鞘和细胞膜之间 。 螺旋体通过轴丝而运动, 主
要有 3种方式,① 沿长轴旋转, 快速前进； ② 细胞屈
曲伸缩前进； ③ 螺旋状或蛇状前进 。
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螺旋体具有不定形的核, 无芽孢, 核酸兼有
RNA和 DNA,以二等分横分裂法繁殖 。
染色特性 都是革兰氏阴性, 多数不易着色 。 姬
姆萨氏染色效果较好, 可染成 红色 或 蓝色 。 蓝色多
属腐生性螺旋体 。 常用 镀银染色法 染色, 使之变租
而显黑褐色 。 也用印度墨汁或刚果红负染, 螺旋体
透明无色, 背景衬有颜色, 反差明显 。 以相差和暗
视野显微镜观察螺旋体效果良好 。 能检查形体又可
分辨运动方式, 甚为常用 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 9
2,培养特性 螺旋体的培养有的较为困难, 多数需
厌氧培养 。 但有些属种, 特别是细螺旋体 (又称 钩
端螺旋体 )的培养并不难 。 个别致病性螺旋体可采
用含血液, 腹水或其他特殊成分的培养基培养 。 有
些螺旋体尚不能用人工培养基培养 。
3,分类 螺旋体目, 下分为两个科, 即螺旋体科和
细螺旋体科 。 细螺旋体科只有一个属, 即细螺旋体
属 （ 钩端螺旋体属 ） 。 螺旋体科又由螺旋体属, 脊
螺旋体属, 密螺旋体属, 疏螺旋体属和蛇形螺旋体
属五个属组成 。 其中与兽医有关的主要有 疏螺旋体
属, 密螺旋体属, 蛇形螺旋体属和细螺旋体属 。
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第二节 疏螺旋体属
本属成员细胞呈螺旋状, 长 3-20um,宽 0.2-0.5um，
每条菌体有 3-10个不规则的疏松螺旋, 有 15-20根轴
丝 。 以螺旋状推进方式活泼运动 。 用姬姆萨氏染液
着色良好 。 易培养, 微需氧或厌氧 。
伯氏疏螺旋体
是 莱姆病 (Lyme disease)的病原体 。 莱姆病最早于
1975年在美国的莱姆镇发现, 故而得名, 现己遍布
全世界 。 此病由 硬蜱 为传播媒介, 感染人和犬, 牛,
马等动物, 致关节炎等多种疾病 。
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1,生物学特性 菌体细长, 长约 20-30um,直径约
0.2um,有 4-20个大而宽疏的螺旋 。 其鞭毛缠绕着菌
体, 位于外膜和胞浆膜之间, 称之为轴鞭毛 。
2,致病性 伯氏疏螺旋体 致人, 犬, 牛和马的关节炎,
被 硬蜱 叮咬的部位呈圆环状疹块, 之后表现为游走
性关节炎, 可见破行, 关节肿胀, 发热及淋巴结肿
大 。
硬蜱在吸吮感染动物的血液之后, 便可在数年内
都具有传染性 。 啮齿动物是伯氏疏螺旋体的天然贮
主 。
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3,微生物学检查 蜱叮咬部的附近皮肤, 患病关节
的关节液可用于病原学检测 。 用暗视野显微镜或作
姬姆萨染色等可观察到疏螺旋体 。
伯氏疏螺旋体培养困难, 可用改良的 Kelley氏培
养基分离培养, 培养物每周用暗视野显微镜检查 。
血清学诊断可行 。 ELISA最为常用 。 犬在感染 4
周后即可测出抗体, 3个月后抗体达高峰, 此时犬
可持续感染 。 抗体滴度维持高水平至少 18个月 。
PCR,限制性酶切及 DNA杂交等分子生物学手
段亦用于诊断 。
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4,防治 强力霉素或阿莫西林 可用于莱姆病的治疗,
但只能一定程度缓解病损, 并不能完全消灭伯氏疏螺
旋体 。
在疫区可预防接种 。 有两种疫苗, 一种是全菌灭活
疫苗, 有不良反应, 效果不好 。 另一种亚单位疫苗,
为纯化的 OspA。 用它免疫犬可产生抗体, 当蜱吸血
时, 伯氏疏螺旋体被抗体阻断, 不能从蜱的中肠向唾
液腺移行, 从而使蜱不再感染新的吮血对象 。
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第三节 蛇形螺旋体属
蛇形螺旋体属是一个新属, 包括 猪痢蛇形螺旋体 和
无害蛇形螺旋体 。
本属特性 细胞呈疏松, 规则的螺旋形, 长 7-9um，
宽 0.3-0.4um。 有 8,9根轴丝, 呈屈曲和蛇形运动或
移位运动 。 有机营养 。 可在含 10％ 胎犊, 犊牛或兔血
清的酪蛋白胰酶消化物大豆胨汤 (TSB)或脑心浸液汤
(BHIB),36-42℃ 厌氧生长 。 在 TSB 血液琼脂平板,
38℃ 培养 48-96h形成扁平, 半透明的菌落, 大小 0.5-3
mm,可呈现微弱或强 β溶血 。
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猪痢蛇形螺旋体
1.致病性 猪痢疾 又称血痢, 黑痢, 出血性痢疾, 粘膜
出血性痢疾等, 由猪痢蛇形螺旋体引起, 最常发生于
8-14周龄幼猪 。 主要症状是严重的粘膜出血性下痢和
迅速减重 。 特征病变为大肠粘膜发生部液渗出性 (卡他
性 ),出血性和坏死性炎症 。 经口传染, 病的传播迅速,
发病率较高 (约 75％ )而致死率较低 (5％ -20％ ) 。
2,形态结构及染色特性 本螺旋体形态结构与其属的
描述一致, 菌体多为 2-4个弯曲, 两端尖锐 。 革兰氏阴
性, 姬姆萨氏和镀银法均能使其较好着色 。
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3,培养特性 严格厌氧, 一般厌氧环境不易培养成功,
必须使用预先还原的培养基, 并置于含的 H2(或 N2)和
CO2(二者比例为 80,20)混合气体以及以冷钯为触媒
的环境中才能生长 。 对培养基要求苛刻, 通常使用含
10％ 胎牛 (或犊牛或兔 )血清或血液的 TSB或 BHIB培养
基 。 在 TSB血液琼脂上, 38℃ 48-96min可形成扁平,
半透明, 针尖状, 强 β溶血性菌落 。
4,抗原与免疫性 猪痢疾密螺旋体有两种抗原成分：
脂多糖, 蛋白质 （ 特异性 ） 。 该菌有 8个血清型 。 自
然发病猪康复后, 可产生相应的抗体, 具有一定的保
护力 。
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5,微生物学检查
（ 1） 直接镜检 有以下 3种方法。
染色镜检,以病猪的新鲜粪便粘液，或病变结肠
粘膜刮取物制成薄涂片，染色镜检。多用姬姆萨氏
法染色法。也可用印度墨汁作负染或镀银染色法染
色镜检。
相差或暗视野显微镜活体检查,待检样品与适量
生理盐水混合后制成压滴标本片，用相差或暗视野
显微镜下镜检。若每个高倍视野中见有 2-3个或更
多个蛇样运动的较大螺旋体即可确诊。
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染色组织切片检查,将采集的病变肠组织先用 10
％甲醛缓冲液固定后切片，再用维多利亚蓝染色法
染色。镜检时可见螺旋体大量存在组织表面及粘液
囊腔内，有时数量多到堆积成网状。
（ 2）分离培养,分离培养方法。
过滤培养法,将样品作 5-10倍稀释，轻度离心，
上清用 0.8um和 0.45um滤膜依次过滤。取滤液直接
涂布接种于鲜血琼脂平板上，厌氧培养 37-38℃ 培
养 3-6d，每隔 2d检查 1次，当观察到平板上出现 β溶
血现象时，即可挑取可疑菌落，作成悬滴或压滴标
本，用暗视野显微镜检查。
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6,防治 对猪痢目前尚无可靠或实用的免疫制剂以
供预防之用 。 普遍采用抗生素和化学药物控制此病,
培育 SPF猪, 净化猪群 是防治本病的主要手段 。
第四节 密螺旋体属 (自学 ）
第五节 细螺旋体属
细螺旋体属成员是一大类纤细, 螺旋致密, 一端
或两端弯曲呈钩状的螺旋体, 故常称 钩端螺旋体,
简称钩体 。 大部分营腐生生活, 广泛分布于各种水
生环境中, 无致病性 。 一部分为寄生性和致病性的
螺旋体, 可 引起人和动物的细螺旋体病 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 21
1,形态结构与染色特性 呈纤细的圆柱形, 长 6-
20um,宽 0.1-0.2um,螺旋弧度 0.2-0.3um,至少有
18个弯曲细密规则的螺旋, 菌体一端或两端可弯曲
呈 钩状 。 其运动形式多样, 能翻转和屈曲运动, 也
可沿其长轴旋转而快速前进 。
细胞壁结构与革兰氏阴性杆菌相似。外膜位于原
生质柱和轴丝外层，相当于细菌荚膜。
革兰氏染色阴性 。镀银染色法和刚果红负染较好。
用暗视野显微镜较易观察其形态和运动力。
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2,培养及生化特性 需氧，对营养要求不高，较易
人工培养。在含血清和蛋白胨的培养基上生长良好。
钩体某些菌株能产生溶血素。
3,抵抗力 钩体 pH中性湿土和水中可存活数月，该
病主要经水源传播。对热和酸碱环境抵抗弱，
45℃30min, 50℃10min, 60℃10s 即可致死。 4℃ 冰
箱中可存活 1-2周,-70℃ 可保存 2年多。对各种化学
消毒剂和青霉素、金霉素、四环素等抗生素敏感性。
4,抗原结构 抗原分两种：表面抗原 (P抗原 )，为
多糖蛋白复合物，具有型特异性。内部抗原 (共同抗
原,S抗原 )，系类脂多糖复合物，具有属特异性。
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5,毒力因子 本病为动物源性疾病 。 毒力因子主要
有,吸附物质, 溶血素, 内毒素样物质, 细胞毒性
因子 。
6,感染途径及其所致疾病
（ 1） 传染源 钩体可感染大部分 哺乳动物和人 。 已
从 50多种动物检出钩体, 其中 鼠类和猪 是钩体的主
要贮存宿主和传染来源, 排菌期长 。
（ 2） 感染途径 人和家畜通过直接或间接地接触污
染源而被感染 。 途径,(1) 损伤的皮肤黏膜, 最为常
见； (2) 口腔, 咽喉头和肠道粘膜； (3) 动物咬伤或
吸血昆虫的叮咬, 引起感染； (4)通过交配或人工授
精 。
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（ 3） 易感动物及症状 在家畜中以 牛和羊 对钩体的
易感性最高, 其次为 马, 猪, 犬, 水牛和驴 等, 许
多野生动物, 特别是鼠类易感 。
钩体病临床表现：急性病例的主要症状为 发热,
贫血, 出血, 黄疸, 血红素尿 及粘膜和皮肤坏死；
亚急性病例可表现为 肾炎, 肝炎, 脑膜炎 及产后泌
乳缺乏症；慢性病例则表现 虹膜睫状体炎, 流产,
死产及不育或不孕 。
（ 4） 钩体病的病程 约持续 7-8d的钩体菌血症 (前期
发热 )阶段和持续 2-3月或更长时间的钩体菌尿期 (后
期无热 )阶段 。 在前期阶段, 钩体于 血, 肝, 肾和脑
脊髓液 中, 而后期于 肾 内长期繁殖, 经尿排出 。
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7,微生物学诊断 最后诊断有赖于微生物学检查 。
检查病料：即发病 7-8d内 (菌血症, 发热期 )可采集
血, 脑脊髓液, 剖捡可取 肝和肾 ；发病 7-8d后 (退热,
菌尿症期 ) 采集 尿液, 死后为 肾 。 方法,
（ 1） 直接镜检 可分 2种方法,
暗视野活菌检查,将病料差速离心集菌压滴标本
片镜检 。 如在暗视野中见有钧体菌的典型形态与运
动方式, 即可确认为钩体 。
染色镜检,多用改良镀银法和媒染法 。 前者使钩
体呈深黑色或灰色 。 后者, 钩体呈紫红色 。 姬姆萨
染色片中钩体呈紫色 。
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（ 2） 分离培养 钩体的培养基很多, 常用的有柯氏
培养基等培养基 。 病料接种后, 置 28-30℃ 温箱内
培养, 每 5-7d观察钩体生长情况并取样镜检, 连续
四周 (最多至 3个月 )末检出钩体者可作阴性处理 。
（ 3） 动物接种试验 可用于病料内钩体的分离, 又
可作为菌株毒力测定 。 动物常用体重 150-200g幼龄
豚鼠或 50-60g金黄仓鼠 。
一般在接种后 1-2周动物出现体温升高和体重减
轻, 此时即可剖检, 取其肾和肝进行镜检和分离培
养 。 主要病变为内脏出血和皮下出血, 黄染 。
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（ 4） 血清学检查 a,显微凝集溶解试验有高度型特
异性, 既是诊断钩体病最常用的方法之一, 又是钩
体分型的主要方法 。 b,补体结合试验 。 c,酶联免
疫吸附试验 (ELISA)。 d,SPA协同凝集试验等用于钩
体菌株鉴定, 分型, 抗原变异等的研究 。
8,免疫
疫苗有良好的免疫预防效果 。 初次免疫 2d后, 应
进行再次接种, 以后可每年接种 1次 。 所用疫苗应与
引起发病的菌株同型, 或使用多价疫苗 。 母牛免疫
接种后可使犊牛获得较高的母源抗体, 在出生后数
月内不受感染 。
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复习思考题
1,什么是螺旋体?它的主要生物学特性有哪些?目前的
分类概况如何?
2,疏螺旋体属的基本特征有哪些?伯氏疏螺旋体引致
何病?如何诊断?
3,蛇形螺旋体属与密螺旋体属之间有何联系和区别?
该属的基本特征是什么?猪痢蛇形螺旋体应如何分离培养?
4,钩端螺旋体的形态及培养特征有哪些?它们的抗原
结构与其血清学分类有何关系?钩体的分类有何进展?
5,概述钩端螺旋体的致病因素及其主要特征, 动物钩
体病有哪些特点?有诊断意义的微生物学检查方法有哪些?
各有何特点?
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