第二十一章高效液相色谱法
High-Performance Liquid
Chromatography,HPLC
第二十一章 高效液相色谱 法
70年代迅速发展不挥发有机物约占 70%
80年代以来 HPLC
文献量 21%（ 89年）
仪器销售量 25%（ 12 亿）（ 89年）
应用领域 拓展（化工、环保、临床、药品、生命）
超过 GC
第二十一章 高效液相色谱 法
21－ 1 高效液相色仪
21－ 2 固定相和流动相
21－ 3 高效液相色谱法和主要分离类型
21－ 4 超临界流体色谱第二十一章 高效液相色谱 法
21-1 高效液相色谱仪
1,仪器结构第二十一章 高效液相色谱 法
21-1 高效液相色谱仪
1,仪器结构第二十一章 高效液相色谱 法 21-1 高效液相色谱仪
1、仪器结构第二十一章 高效液相色谱法 21-1 高效液相色谱仪
1、仪器结构
HPLC与 GC比较
a,柱 长,10— 50cm 内径,2— 5mm
微柱
◎填充柱微 HPLC 柱 0.5~1.0 m m
毛细管 HPLC 柱 100~500 μm
纳级 HPLC 柱 10~100 μm
◎拉制 HPLC 柱 50~200μm
◎开管 HPLC 柱 5~10μm
第二十一章 高效液相色谱法 21-1 高效液相色谱仪
2、掌握要点微柱的优越性,
1,消耗少（样、流动相、固定相）
2、灵敏（溶质在柱上稀释比下降）
3、分离效率高（可装长柱）
4、操作条件易选择
5、其它分离联用易第二十一章 高效液相色谱法 21-1 高效液相色谱仪
2、掌握要点
b、检测系统常用 UV光度检测 （包括它的现代方法）
第二十一章 高效液相色谱法 21-1 高效液相色谱仪
2、掌握要点第二十一章 高效液相色谱法 21-1 高效液相色谱仪
2、掌握要点
b、检测系统光度阵列检测
b、检测系统引人注目,荧光检测 选择性 10-9~10-11 g/ml
质谱检测 通用性 10-8 g/ml
蛋白质分析生物质谱第二十一章 高效液相色谱法 21-1 高效液相色谱仪
2、掌握要点
C,梯度林洗装置作用：
让流动相的组成随时间而改变，以调节流动相的极性、离子强度或 pH,使样品组分的相对保留值得以改变，从而提高分离效率。
与 GC的程序升温技术比较第二十一章 高效液相色谱法 21-1 高效液相色谱仪
2、掌握要点
1,固定相分类材料性质形状
2、流动相选择溶剂要求第二十一章 高效液相色谱法
21－ 2 固定相和流动相
1 分配色谱 （ LLC） 2 吸附色谱 （ LSC）
3 键合相色谱 4 离子交换色谱
5 离子对色谱 6 凝胶渗透色谱分离原理分离类型选择正相色谱与反相色谱的概念第二十一章 高效液相色谱法
21－ 3 高效液相色谱法的主要分离类型
1、超临界流体指物质在高于临界点，即高于其临界压力和临界温度时的一种物态。
相图 S L G
第二十一章 高效液相色谱法
21－ 4 超临界流体色谱第二十一章 高效液相色谱法
21－ 4 超临界流体色谱
2、超临界流体色谱（ SFC） 特点超临界流体的 特点 超临界流体的密度、扩散系数和粘度等性质刚好介于气体和液体之间物态 密度 ρ 粘度 η 扩散系数 D
(g﹒ ml-1) (Pa﹒ S) (cm2﹒ s-1)
气体,(0.6-2.0)× 10-3 (1-3)× 10－ 5 0.1－ 0.4
0.1MPa,
15-30℃
超临界流体,0.2-0.5 (1-3)× 10－ 5 0.7× 10－ 3
Tc,Pc
液体,0.6-1.6 (0.2-3)× 10－ 3 (0.2-2)× 10－ 5
15-30℃
超临界流体色谱（ SFC） 特点
※ 比 HPLC具有更高的分离效率 。
※ SFC使用温度较低,可以分离热稳定性差,高分子量的化学物 。
※ SFC还可以与 GC和 HPLC的大多数的通用型或选择型的检测器相匹配 。
第二十一章 高效液相色谱法
21－ 4 超临界流体色谱
3,仪器第二十一章 高效液相色谱法
21－ 4 超临界流体色谱
3,应用超临界流体的特殊性,使得它有自己特点,是
GC和 HPLC 的重要补充,它可以分离分析气相色谱和高效液相色谱难以分离检测组分,或使分离分析更为方便和有效 。
超临界流体色谱法被广泛地应用于 聚合物,油脂类物质,环境样品,天然产物,药物等 物质的分离分析 。
第二十一章 高效液相色谱法
21－ 4 超临界流体色谱
《高效液相色谱法》结束请预习第二十章
High-Performance Liquid
Chromatography,HPLC
第二十一章 高效液相色谱 法
70年代迅速发展不挥发有机物约占 70%
80年代以来 HPLC
文献量 21%（ 89年）
仪器销售量 25%（ 12 亿）（ 89年）
应用领域 拓展（化工、环保、临床、药品、生命）
超过 GC
第二十一章 高效液相色谱 法
21－ 1 高效液相色仪
21－ 2 固定相和流动相
21－ 3 高效液相色谱法和主要分离类型
21－ 4 超临界流体色谱第二十一章 高效液相色谱 法
21-1 高效液相色谱仪
1,仪器结构第二十一章 高效液相色谱 法
21-1 高效液相色谱仪
1,仪器结构第二十一章 高效液相色谱 法 21-1 高效液相色谱仪
1、仪器结构第二十一章 高效液相色谱法 21-1 高效液相色谱仪
1、仪器结构
HPLC与 GC比较
a,柱 长,10— 50cm 内径,2— 5mm
微柱
◎填充柱微 HPLC 柱 0.5~1.0 m m
毛细管 HPLC 柱 100~500 μm
纳级 HPLC 柱 10~100 μm
◎拉制 HPLC 柱 50~200μm
◎开管 HPLC 柱 5~10μm
第二十一章 高效液相色谱法 21-1 高效液相色谱仪
2、掌握要点微柱的优越性,
1,消耗少（样、流动相、固定相）
2、灵敏（溶质在柱上稀释比下降）
3、分离效率高（可装长柱）
4、操作条件易选择
5、其它分离联用易第二十一章 高效液相色谱法 21-1 高效液相色谱仪
2、掌握要点
b、检测系统常用 UV光度检测 （包括它的现代方法）
第二十一章 高效液相色谱法 21-1 高效液相色谱仪
2、掌握要点第二十一章 高效液相色谱法 21-1 高效液相色谱仪
2、掌握要点
b、检测系统光度阵列检测
b、检测系统引人注目,荧光检测 选择性 10-9~10-11 g/ml
质谱检测 通用性 10-8 g/ml
蛋白质分析生物质谱第二十一章 高效液相色谱法 21-1 高效液相色谱仪
2、掌握要点
C,梯度林洗装置作用：
让流动相的组成随时间而改变，以调节流动相的极性、离子强度或 pH,使样品组分的相对保留值得以改变，从而提高分离效率。
与 GC的程序升温技术比较第二十一章 高效液相色谱法 21-1 高效液相色谱仪
2、掌握要点
1,固定相分类材料性质形状
2、流动相选择溶剂要求第二十一章 高效液相色谱法
21－ 2 固定相和流动相
1 分配色谱 （ LLC） 2 吸附色谱 （ LSC）
3 键合相色谱 4 离子交换色谱
5 离子对色谱 6 凝胶渗透色谱分离原理分离类型选择正相色谱与反相色谱的概念第二十一章 高效液相色谱法
21－ 3 高效液相色谱法的主要分离类型
1、超临界流体指物质在高于临界点，即高于其临界压力和临界温度时的一种物态。
相图 S L G
第二十一章 高效液相色谱法
21－ 4 超临界流体色谱第二十一章 高效液相色谱法
21－ 4 超临界流体色谱
2、超临界流体色谱（ SFC） 特点超临界流体的 特点 超临界流体的密度、扩散系数和粘度等性质刚好介于气体和液体之间物态 密度 ρ 粘度 η 扩散系数 D
(g﹒ ml-1) (Pa﹒ S) (cm2﹒ s-1)
气体,(0.6-2.0)× 10-3 (1-3)× 10－ 5 0.1－ 0.4
0.1MPa,
15-30℃
超临界流体,0.2-0.5 (1-3)× 10－ 5 0.7× 10－ 3
Tc,Pc
液体,0.6-1.6 (0.2-3)× 10－ 3 (0.2-2)× 10－ 5
15-30℃
超临界流体色谱（ SFC） 特点
※ 比 HPLC具有更高的分离效率 。
※ SFC使用温度较低,可以分离热稳定性差,高分子量的化学物 。
※ SFC还可以与 GC和 HPLC的大多数的通用型或选择型的检测器相匹配 。
第二十一章 高效液相色谱法
21－ 4 超临界流体色谱
3,仪器第二十一章 高效液相色谱法
21－ 4 超临界流体色谱
3,应用超临界流体的特殊性,使得它有自己特点,是
GC和 HPLC 的重要补充,它可以分离分析气相色谱和高效液相色谱难以分离检测组分,或使分离分析更为方便和有效 。
超临界流体色谱法被广泛地应用于 聚合物,油脂类物质,环境样品,天然产物,药物等 物质的分离分析 。
第二十一章 高效液相色谱法
21－ 4 超临界流体色谱
《高效液相色谱法》结束请预习第二十章
