八．蔬菜病害 我国蔬菜作物种类很多，主要包括葫芦科蔬菜、茄科蔬菜、十字花科蔬菜、豆科蔬菜及其他蔬菜。 葫芦科蔬菜主要包括多种瓜类作物，其病害种类繁多，据统计达近百种，有些病害可以危害多种瓜类作物，给生产造成严重损失。其中以黄瓜霜霉病、枯萎病、细菌性角斑病、白粉病等发生较重，为害最重；黄瓜黑星病曾作为某些省区的检疫性病害，近年间在北方保护地严重发生，损失极大，现已蔓延至很多地区；黄瓜灰霉病、炭疽病、菌核病等历年均有不同程度发生；其它瓜类病害如病毒病、枯萎病、根结线虫病、白粉病、西瓜和甜瓜炭疽病、西瓜疫病、甜瓜蔓枯病等，每年都有一定为害。 茄科蔬菜主要包括番茄、茄子和辣椒等。茄科蔬菜上的病害约有70多种。番茄上以各种病毒病为害最重，晚疫病和早疫病在各地发生也很普遍，流行年份损失很大；近年来保护地番茄灰霉病发生广、为害猖獗，上升为最重要的病害；其次叶霉病也普遍发生；番茄溃疡病是全国的检疫性病害，已对生产构成威胁。茄子上主要是黄萎病发生普遍，一直是多年来的顽症，在露地和保护地均较严重，褐纹病、绵疫病等发生也较为普遍，流行年份损失严重。辣椒上则以病毒病、炭疽病、疮痂病等为害严重；近年来辣椒疫病急剧上升，已给生产造成了严重损失。此外，茄科蔬菜根结线虫病近年来发生严重，有蔓延趋势，局部地区已造成较大损失。 在十字花科蔬菜生产上，发生的病害近50种。其中病毒病、霜霉病和软腐病合称为白菜的三大病害，发生区域广泛，为害比较严重，对白菜生产威胁较大；十字花科蔬菜其它病害，如白斑病、黑斑病、黑腐病、炭疽病、白锈病等，历年均有不同程度发生，也给蔬菜生产、贮藏等造成一定损失；根肿病在部分省区见有发生，发病重时为害也较重；菌核病多在南方十字花科蔬菜上或采种株上发生。 其他发生普遍、危害较大的蔬菜病害还有豆类锈病、炭疽病、枯萎病，芹菜斑枯病、早疫病、大葱锈病和紫斑病，韭菜灰霉病，莴苣霜霉病，姜腐烂病、芦笋茎枯病及各种蔬菜的根结线虫病等。 实验实习一 葫芦科蔬菜病害识别与鉴定 一．目的要求 本实验以黄瓜病害为主，熟悉葫芦科蔬菜上为害较重的主要病害的症状和病原物的形态特点，次要病害以症状为主作一般观察，为病害的正确诊断尤其是早期诊断、田间调查以及指导生产及时防治，提供科学依据。 二．仪器用品 载玻片、盖玻片、解剖刀、解剖针、移植针、清水滴瓶、刀片、酒精灯、镜头纸等，显微镜、幻灯机、投影仪、计算机及多媒体教学设备等。 三．实习材料 黄瓜主要病害（霜霉病、枯萎病、细菌性角斑病、黑星病、白粉病、炭疽病、菌核病、灰霉病、绵腐病、疫病、蔓枯病、褐斑病、细菌斑点病）的标本、新鲜材料、挂图、病原菌制备片，相应的多媒体教学课件（含幻灯片、录象带、光盘等影象资料）。 四．观察内容和方法 （一）黄瓜霜霉病（Pseudoperonospora cubensis） 1．症状 主要危害成株期叶片。病斑水浸状、多角形、黄褐色至红褐色，潮湿时病斑背面生出灰黑色霉层。取病叶标本，注意观察病斑形状、颜色等特点，病斑背面霉状物有何特点？ 2．病原 属鞭毛菌亚门假霜霉属真菌。孢子囊梗无色、无隔，呈单轴状、锐角分枝；孢子囊卵球形、无色，顶端具乳头状突起。刮取病叶标本上的灰色霉层制片镜检，注意病菌孢子囊梗的分枝、孢子囊的形态特征，孢子囊有无乳头状突起？ （二）瓜类枯萎病（Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum） 1．症状 典型症状是植株萎蔫。多在成株期开花结果后表现症状。病株似缺水状萎蔫，反复几次后不能复原；茎基部出现黄褐色条斑，常有胶质物溢出，易纵裂，潮湿时产生白粉色霉层；茎部维管束变褐色。观察病株，注意其全株性萎蔫和枯死、茎蔓病部外表皮层组织撕裂的特点，剖视病部维管束，注意内部是否变褐色？ 2．病原 属半知菌亚门镰刀菌属真菌。病菌可产生三种类型的孢子：小型分生孢子无色、单胞、卵圆形或香蕉形；大型分生孢子无色、多胞、镰刀形或纺锤形；厚垣孢子淡黄褐色、近球形、光滑。挑取病茎上白粉色霉层制片，镜检其大、小两型分生孢子及厚垣孢子的形态、颜色、分隔等特点。 （三）黄瓜黑星病（Cladosporium cucumerinum） 1．症状 苗期和成株期均可危害，可侵染叶片、卷须、茎蔓和瓜条，以幼嫩部分受害严重。子叶上产生黄白色圆形斑点；成株期叶片上病斑近圆形，淡黄褐色，易破裂穿孔；卷须及茎蔓上病斑梭形，凹陷，开裂；瓜条上病斑暗绿色、不规则形；病斑上可溢出桔黄色胶质物，湿度大时，病部生出灰黑色霉层。取病害标本，观察各病斑形态、颜色及其上病菌表现状态；病部是否呈星形放射状开裂？后期病斑穿孔与否？病果上病斑形状、颜色如何？有无桔黄色胶质物溢出？ 2．病原 属半知菌亚门枝孢霉属真菌，病部的霉层为病菌的分生孢子梗和分生孢子。分生孢子梗细长、褐色、顶端有短分枝；分生孢子串生、多数单胞、椭圆形、浅褐色。从病果上或培养的病菌上挑取霉层制片，镜检其分生孢子梗及分生孢子颜色、形态等特点，注意孢子着生状态、细胞数目、呈何颜色？ （四）黄瓜细菌性角斑病（Pseudomonas syringae pv. lachrymans） 1．症状 主要危害成株期叶片，偶尔可危害果实。病斑油浸状、多角形、枯白色至枯黄色，潮湿时病斑边缘溢出乳黄色菌脓，干燥时结为菌痂。取病叶标本，观察病斑形状、颜色等特点，病斑的菌脓有何特点？注意和霜霉病的区别特点有哪些？ 2．病原 属薄壁菌门假单胞杆菌属细菌。菌体短杆状、单胞、无色，具1~5根单极生鞭毛，革兰氏染色阴性反应。在PDA培养基上形成圆形乳白色菌落。用刀片切取病叶标本，观察细菌溢脓情况，并按以前所学的方法进行革兰氏染色，镜检病菌是否为短杆状革兰氏阴性细菌。 （五）瓜类炭疽病（Colletotrichum orbiculare = C. lagenarium） 1．症状 在苗期和成株期均可危害，可侵染叶片、茎蔓和近成熟的瓜条。病苗茎基部产生褐色梭形凹陷病斑，子叶边缘形成半圆形的红褐色病斑；成株期叶片上形成红褐色圆形病斑；茎蔓上病斑梭形，常有胶质物溢出；瓜条上病斑圆形、黄褐色至红褐色、明显凹陷，常溢出桔红色的胶质物。取病叶标本，注意比较幼茎、叶片、茎蔓和瓜条上危害的异同之处；观察病斑形态、颜色、凹陷、胶质物溢出等特点。 2．病原 属半知菌亚门炭疽菌属真菌，病部可产生病菌的分生孢子盘。分生孢子单胞、无色、卵圆形至长椭圆形；分生孢子盘生中有黑褐色刚毛。从病部挑取或切取病菌制片，镜检分生孢子盘及分生孢子梗的形态；分生孢子的形状、大小、颜色；分生孢子盘上刚毛的形态和颜色等特点。 （六）瓜类菌核病（Sclerotinia sclerotiorum） 1．症状 苗期和成株期均可发病，主要侵染茎蔓和瓜条，以幼瓜、凋萎花蒂、叶腋处易于发病。病部湿腐，扩展较快，表面长满浓密的白絮状霉层，以后产生黑色菌核。取受病组织，观察其分解腐烂的状态及其病菌霉层的表现特点，和枯萎病的危害比较有何区别？注意茎蔓及病果上是否生有黑色菌核？ 2．病原 属子囊菌亚门核盘菌属真菌。病菌无性世代菌丝无色、粗壮发达、分隔明显且密集，易于纠结形成菌核；菌核初白色，后表面呈黑色，球形、鼠粪状或不规则形。从病部挑取菌丝制片镜检，注意其颜色、形态、分隔等特点。 （七）瓜类白粉病（Sphaerotheca fuliginea） 1．症状 主要危害叶片。病部初现白色小粉点，扩大呈白粉状斑，以后连片；后期粉层灰白色，其间产生许多小黑点。观察病叶标本，注意病害症状主要发生在叶部的哪一面？病斑边缘是否明显？病部有无白粉状物和间杂的小黑点？分别为何物？ 2．病原 属子囊菌亚门单丝壳属真菌。病菌分生孢子梗无色、短小、不分枝；分生孢子无色、单胞、椭圆形、串生；闭囊壳褐色、球形、表面具菌丝状附属丝；子囊单个，卵圆形，内含8个子囊孢子。取黄瓜白粉病叶，挑取病部菌体，制片镜检病菌分生孢子梗和分生孢子的颜色、形态特点；镜检闭囊壳和附属丝特点；注意闭囊壳的颜色、附属丝的形状；轻压盖片，挤破闭囊壳，观察子囊的形状和数目。 （八）黄瓜灰霉病（Botrytis cinerae） 1．症状 主要危害叶片和果实，幼瓜受害严重。瓜条蒂部呈水浸状、褪色、变软、很快生出灰褐色霉层，病瓜易于腐烂；叶片上病斑为水浸状、暗绿色、近圆形，有时呈现隐约的轮纹。观察病害标本，注意病果水浸状、变褐、变软腐烂的特点；病叶上病斑是否暗绿色、近圆形，有无隐约的轮纹？ 2．病原 属半知菌亚门灰葡萄孢属真菌。病菌分生孢子梗直立、多为褐色、顶端具1~2次分枝；分生孢子单胞、无色、球形至卵圆形。挑取病部或培养的病菌制片镜检，注意分生孢子梗的颜色、形态、分枝等特点；分生孢子是否小而密集、球形无色？ （九）黄瓜疫病 （Phytophthora melonis） 1．症状 在整个生长期中、各个部位均可危害，以幼茎、嫩尖受害重。幼苗受害嫩尖缢缩、水浸状，其上部是叶片枯萎，植株枯死；病叶上为水浸状、暗绿色、近圆形大斑，易于扩展腐烂；嫩枝受害呈水浸状、暗绿色腐烂；病瓜条上为水浸状、暗绿色、近圆形凹陷斑；病害在湿度大时扩展快，病部生出稀疏的白色霉层。取受害病部组织，观察受害特点，注意是否幼嫩部位发病严重？病部是否为水浸状、暗绿色腐烂？是否生出稀疏的白色霉层？ 2．病原 属鞭毛菌亚门疫霉菌属真菌。病菌孢子囊无色、卵圆形至长椭圆形，顶端具乳头状突起；孢子囊萌发产生游动孢子；卵孢子球形，淡黄色。从病部标本上挑取病菌，制片镜检孢子囊的形状、颜色，卵孢子的形态、颜色等特点。 （十）瓜类蔓枯病 （ Mycosphaerella citrulina；无性Ascochyta citrulina） 1．症状 主要危害叶片和茎蔓。叶片上病斑多从叶缘向内发展呈“V”字形或半圆形，黄褐色至枯黄色；后期病斑易破碎；病斑上密生小黑点；茎蔓上病斑梭形、黄褐色、有时溢出桔黄色胶质物；病蔓维管束不变色。观察此病受害组织，注意叶片上病斑是否呈“V”字形或半圆形？病斑上是否密生小黑点；茎蔓上病斑形状、颜色如何？是否有桔黄色胶质物溢出？病蔓维管束是否变色？ 2．病原 属子囊菌亚门球壳孢属真菌，其无性世代为半知菌亚门壳二胞属。病菌子囊壳球形、黑褐色，子囊棍棒状，子囊孢子无色、椭圆形、双胞；分生孢子器椭球形，分生孢子椭圆形至圆柱形、无色、双胞。取病部组织做徒手切片，镜检分生孢子器和子囊壳的形态、颜色；子囊孢子和分生孢子是否均为双胞？大小、颜色、形状如何？ （十一）黄瓜褐斑病（Corynespora melonis） 1．症状 主要危害成株期叶片，多以中、下部叶片先发病。病斑圆形至近圆形、有的呈不规则形，黄褐色，边缘深褐色，潮湿时，病斑上生出灰褐色霉层。取病叶标本，注意观察病斑的大小、颜色、形状，注意霉层的生出部位。 2．病原 属半知菌亚门棒孢霉属真菌。病菌分生孢子梗直立、不分枝、褐色；分生孢子粗壮、较长、淡色、具多个分隔。从病叶上挑取病菌制片镜检，注意分生孢子梗的颜色，有无分枝，是否直立？分生孢子的颜色、形态、大小和分隔等各有何特点？ （十二）黄瓜绵腐病（Pythium aphanidermatum） 1．症状 主要在瓜条近成熟期危害，近地面的瓜条易于受害。果面上病斑水浸状、不规则形、青褐色至黄褐色、凹陷，很快扩展，致病部腐烂，表面生出棉絮状的白色霉层。取病瓜条，和其他病害的病果比较观察，注意各病害危害病斑的颜色、腐烂程度等特点，相互比较霉层的颜色、着生特点等区别。 2．病原 属鞭毛菌亚门腐霉菌属真菌。病菌菌丝无色、无隔，孢子囊为姜瓣状。从病部或培养基上挑取病菌制片镜检，观察病菌菌丝及孢子囊的颜色、形态特点，注意菌丝是否有隔？孢子囊呈何种形态？和其他低等卵菌比较有何不同？ （十三）其他病害 根据当地葫芦科蔬菜病害发生的情况，观察其他重要病害症状特点和病菌形态特征。 五． 作业 1． 绘黄瓜霜霉病菌、枯萎病菌和黑星病菌形态图。 2． 列表比较黄瓜霜霉病和细菌角斑病的症状特点。 3． 列表比较黄瓜枯萎病和菌核病的症状特点。 实验实习二 十字花科蔬菜病害识别与鉴定 一．目的要求 熟悉白菜三大病害和白斑病、黑腐病、黑斑病等主要病害的症状特点；通过观察和镜检，举一反三鉴定掌握十字花科蔬菜主要病害病原物的基本形态特征，为田间诊断和防治病害奠定基础。 二．仪器用品 载玻片、盖玻片、解剖刀、解剖针、移植针、清水滴瓶、刀片、酒精灯、镜头纸等，显微镜、幻灯机、投影仪、计算机及多媒体教学设备等。 三．实习材料 十字花科主要病害（病毒病、霜霉病、软腐病、白斑病、黑腐病、黑斑病、炭疽病、根肿病、菌核病等）的标本、新鲜材料、挂图、病原菌制备片，相应的多媒体教学课件（含幻灯片、录象带、光盘等影象资料）。 四．观察内容和方法 （一）白菜病毒病（Turnip Mosaic Virus，TuMV） 1．症状 在白菜整个生育期均可危害。幼苗心叶明脉、褪绿、花叶、皱缩，重者扭曲畸形，叶脉上出现褐色坏死斑；成株期病株矮缩，叶片上可产生黑褐色小斑；病株根系发育不良。观察白菜病毒病症状特点，注意植株是否矮化畸形，叶片颜色、形状有无变化，叶脉上有无坏死斑和明脉现象，根部发育是否正常？ 2．病原 主要为芜菁花叶病毒。病毒粒体线状。可结合电镜照片或多媒体教学课件进行观察。 （二）白菜霜霉病（Peronospora parasitica） 1．症状 秋菜上主要危害叶片。子叶上出现水浸状小斑点，生有白色霉层；成株期叶片病斑水浸状、多角形、黄褐色，潮湿时病斑背面生出白色霉层；采种株受害，花器畸形、变色，生出白色霉层。取病叶标本，注意观察病斑发生部位、形状、颜色等特点，病斑背面霉状物有何特点？ 2．病原 属鞭毛菌亚门霜霉菌属真菌。病菌孢子囊梗为典型的二叉状分枝，顶端小梗弯曲呈钳状；孢子囊球形、无色；卵孢子黄褐色、不规则球形、表面不甚光滑。挑取病叶背面霉层制片，镜检孢囊梗和孢子囊形态，注意孢囊梗分枝特点，孢子囊是否具乳状突？取干枯病叶用乳酚油（配方见附注）透明后，镜检组织内卵孢子是否球形、壁厚、黄褐色，表面是否略带皱纹？ （三）白菜软腐病（Erwinia carotovora pv. carotovora） 1．症状 白菜多在包心期开始发病。菜株外叶萎蔫，重者外叶平贴地面，叶球外露，叶柄基部腐烂胶粘；有的从外叶边缘或心叶顶端开始腐烂。观察白菜软腐病病株为害特点、腐烂起始部位和状态、颜色，是否有臭味？ 2．病原 属薄壁菌门欧文氏杆菌属真菌。菌体短杆状、单胞、多单生或双生，具2~8根周生鞭毛，革兰氏染色阴性反应。在培养基上形成圆形灰白色菌落。从病部切制标本，观察细菌溢脓情况；从新鲜腐烂处挑取病菌按以前所学的方法进行革兰氏染色，镜检病菌是否为短杆状革兰氏阴性细菌。 （四）十字花科黑腐病（Xanthomonas campestris pv. campestris） 1．症状 主要在成株期危害叶片。病叶上多从叶缘向内形成“V”字型、黄褐色病斑，边缘淡黄色；有的沿叶片中肋呈淡褐色干腐；重病株倒瘫；湿度大时，病部油浸状湿腐、溢出黄褐色菌脓；病株无臭味。取病株标本，观察病斑形状、颜色等特点，是否呈“V”字型？病斑的菌脓有何特点？注意和软腐病的危害有哪些异同点？ 2．病原 属薄壁菌门假单胞杆菌属细菌。菌体短杆状、单胞、无色、可链生，具1根单极生鞭毛，革兰氏染色阴性反应。在PDA培养基上形成圆形乳黄色菌落。观察方法可参照软腐病进行。 （五）白菜白斑病（Cercosporella albo-maculans） 1．症状 白斑病主要危害叶片，还可为害油菜、萝卜等。初期病斑圆形、灰色，后呈浅灰色，边缘有深绿色晕圈；潮湿时病部生出灰色霉层；后期病部变薄，易穿孔。取病叶标本，注意观察病斑形状、颜色，其上有否灰色霉状物？病斑周围是否浓绿？ 2．病原 属半知菌亚门小白尾孢属真菌。病菌分生孢子梗束生、无色、多数直立而不分枝；分生孢子线形、无色、具1~4个分隔。从病斑背面挑取霉层（保湿后效果好）制片镜检，注意观察分生孢子梗直或略弯、单胞、无色，分生孢子无色、线状或鞭状、直或微弯、具有分隔等特点。 （六）白菜黑斑病（Alternaria brasicae；A. exitiosa） 1．症状 主要危害叶片，有可危害叶柄、花梗和种荚。白菜、萝卜、甘蓝、花椰菜等均可受害。叶片上病斑近圆形，灰白色至灰褐色，有明显的轮纹；叶柄上病斑梭形，暗褐色、凹陷；潮湿时病部产生黑色霉层。取病害标本，注意观察病叶和叶柄上病斑的形状区别；病斑颜色如何？有无轮纹？是否产生黑色的霉状物？ 2．病原 属半知菌亚门交链孢属真菌，有2个种可侵染致病（A. brassicae和 A. exitiosa ）。病菌分生孢子梗褐色，不分枝但有分隔；分生孢子单生，淡褐色至黄褐色，手雷状，有长喙，具纵横隔膜。从病部霉层或培养基上挑取病菌，制片镜检分生孢子梗和分生孢子的形态，注意两种病菌在孢子大小、颜色、形状和分隔情况等方面的区别。 （七）白菜炭疽病（Colletotrichum higginsianum） 1．症状 主要危害叶片、叶柄和叶脉，有时可危害花梗和种荚等。叶片上形成近圆形病斑、较小、中央枯白色、边缘褐色，后期病斑穿孔；叶柄和叶脉上病斑梭形、凹陷、淡褐色；潮湿时，病部产生桔黄色粘稠物。取病叶标本，注意比较叶片、叶柄和叶脉上危害的异同之处；观察病斑形态、颜色、凹陷、粘稠物溢出等特点；并和黑斑病比较观察，注意病斑大小、轮纹有无等区别。 2．病原 属半知菌亚门炭疽菌属真菌，病部可产生病菌的分生孢子盘。分生孢子单胞、无色、卵圆形至长椭圆形；分生孢子盘生中有黑褐色刚毛。从病部挑取病菌制片，镜检分生孢子盘及分生孢子梗的形态；分生孢子的形状、大小、颜色；分生孢子盘上刚毛的形态和颜色等有何特点。 （八）十字花科白锈病（Albugo candida） 1．症状 主要发生在叶片上。叶片正面病斑黄绿色、边缘不清晰；叶背病斑为近圆形、稍突起的白色疱斑，具光泽，成熟时疱斑表皮破裂，散出白色粉末；花器也可受害出现疱斑。取病害标本，注意观察白锈病在白菜、萝卜等的叶片、茎杆和种荚上的为害特点，叶片正面病斑的颜色如何？边缘是否清晰？叶背病斑是否为乳白色圆形突起的疱斑？表皮是否破裂散出白色粉状物？ 2．病原 属鞭毛菌亚门白锈菌属真菌。病菌孢囊梗并列、短棍棒状、不分枝；孢子囊串生、单胞、无色、多数球形。挑取病叶上疱状突起内的病菌或切制标本，镜检孢囊梗和孢子囊的形态；注意孢囊梗并列、短棍棒状、不分枝、孢子囊串生、无色等特点。 （九）十字花科根肿病（Plasmodiophora brassicae） 1．症状 蔬菜苗期即可受害，主要发生在根部。成株期植株发育不良、矮小，叶片发黄、萎蔫、枯萎，重者全株枯死；根部生成形状不整、大小不等的肿瘤，后期肿瘤可龟裂、腐烂。取病株根部，注意观察主根和侧根上的形状不整、大小不等的肿瘤形成情况以及和正常根系的明显区别。 2．病原 属鞭毛菌亚门根肿菌属真菌。病菌在寄主根细胞内形成孢子囊、密集排列呈鱼卵块状；单个孢子囊球形、单胞、无色或淡色；孢子囊萌发可产生游动孢子。从病根部标本上挑取病菌制片或取制备片，镜检孢子囊的形状、颜色和孢子囊密集排列呈鱼卵块状的特点。 （十）十字花科菌核病（Sclerotinia sclerotiorum） 1．症状 在蔬菜后期及留种株上发生较重。主要危害茎杆、叶片或叶球及种荚。病部产生水浸状、淡褐色的病斑，茎基部或叶球湿腐，扩展较快，表面长满浓密的白絮状霉层，以后产生黑色鼠粪状菌核；采种株茎杆组织内部腐朽、后期中空、内有黑色菌核。取受害组织，观察其分解腐烂的状态及其病菌霉层的表现特点，注意茎基部、叶球上及茎杆内是否生有黑色鼠粪状菌核？ 2．病原 属子囊菌亚门核盘菌属真菌。病菌无性世代菌丝无色、粗壮发达、分隔明显且密集，易于纠结形成菌核；后期菌核表面呈黑色，球形或鼠粪状；病菌子囊盘由菌核上生出，黑褐色；子囊棍棒状；子囊孢子无色、单胞、椭圆形。从病部挑取菌丝制片镜检，注意其颜色、形态、分隔等特点。取培养产生的子囊盘或取其制备片，镜检子囊盘的形态、颜色；子囊和子囊孢子的颜色、形状等特点？ （十一）十字花科细菌性黑斑病（Pseudomonas syringae pv. maculicola） 1．症状 可危害秋菜叶片及采种株茎杆及种荚等。病斑初为油浸状小斑点；叶片上病斑多角形或哦不规则形、淡褐色；茎杆及花梗上病斑紫褐色、条形；种荚上病斑圆形至不规则形、稍凹陷、黑色。取病部标本，注意观察各病斑的大小、颜色、形状，注意是否初期为油浸状？ 2．病原 属薄壁菌门假单胞杆菌属细菌。菌体短杆状、无色、可链生，具1~5根单极生鞭毛，革兰氏染色阴性反应。在PDA培养基上形成圆形乳白色菌落。用刀片切取病叶标本，观察细菌溢脓情况，并按前述方法进行革兰氏染色，镜检病菌的染色反应。 （十二）其他病害 根据当地十字花科蔬菜病害发生的情况，观察其他重要病害症状特点和病菌形态特征。 五． 作业 1． 绘白菜的霜霉病和白斑病病原菌形态图。 2． 绘葱紫斑病和菜豆锈病病原菌形态图。 3． 列表比较白菜霜霉病、白斑病、黑斑病和炭疽病的症状特点。 实验实习三 茄科蔬菜病害的识别与鉴定 一．目的要求 通过实验，掌握生产上常见多发、为害较重的茄科蔬菜病害的症状特点和病原菌形态特性，为病害的正确诊断尤其是早期诊断、田间调查以及指导生产及时防治，提供科学依据。 二．仪器用品 载玻片、盖玻片、解剖刀、解剖针、移植针、清水滴瓶、刀片、酒精灯、镜头纸等，显微镜、幻灯机、投影仪、计算机及多媒体教学设备等。 三．实习材料 茄科蔬菜主要病害（番茄病毒病、灰霉病、晚疫病、叶霉病、早疫病、斑枯病、溃疡病等；茄子黄萎病、褐纹病、绵疫病等；辣椒炭疽病、疮痂病、疫病、白星病、病毒病等）的标本、新鲜材料、挂图、病原菌玻片，相应的多媒体教学课件（含幻灯片、录象带、光盘等影象资料）。 四．观察内容和方法 （一）番茄病毒病（Tobacco Mosaic Virus，TMV；Cucumber Mosaic Virus，CMV） 1．症状 病害有三种类型：（1）花叶型：叶片上表现花叶、叶脉紫色，植株矮小，果实表面呈花脸状：（2）条斑型：茎杆上形成暗褐色条纹、表面下陷，可致植株枯死；（3）蕨叶型：新叶线状似蕨叶，植株矮小，黄绿色，复叶节间缩短，呈丛枝状。观察病害标本，注意叶片、茎杆、果实受害的特点；注意区分三种病毒病类型各自危害的异同点；掌握三种类型——花叶型、条斑型、蕨叶型的区别和识别要点。 2．病原 由病毒引起，主要由TMV、CMV和PVX或复合侵染所致。TMV粒体杆状；CMV粒体球形；PVX粒体线状。可结合电镜照片或多媒体教学课件进行观察。 （二）番茄灰霉病（Botritis cinerae） 1．症状 主要危害叶片和果实，以果实受害最重。叶片上病斑水浸状、暗绿色、近圆形，有时呈现隐约的轮纹，从叶尖或叶缘侵染的可表现为“V”字型。果实多从果蒂凹陷处呈水浸状白斑、变软腐烂、很快生出灰褐色霉层。观察病害标本，注意病果水浸状、变褐、变软腐烂的特点；病叶上病斑是否暗绿色、近圆形，有无隐约的轮纹？ 2．病原 属半知菌亚门灰葡萄孢属真菌。病菌分生孢子梗多为褐色、直立、分隔、顶端具1~2次分枝；分生孢子单胞、无色、球形至卵圆形。从病部或培养基上挑取病菌制片镜检，注意分生孢子梗的颜色、形态、分枝等特点；分生孢子是否小而密集、球形无色？ （三）番茄晚疫病（Phytophthora infestans） 1．症状 整个生育期均可发病，主要危害叶片、果实和茎杆。幼苗受害使茎叶接触处变黑腐烂，致植株枯萎；成株期叶片上病斑所从叶尖或叶缘开始、水浸状、暗绿色，潮湿时病健交界处生出霜状白霉；茎杆上病斑黑褐色、条状、交界不明显；果实上病斑不规则块状、棕褐色、较硬、边缘不清晰，潮湿时生出霜状白霉。取病害标本，观察叶片、茎杆和果实上的危害特点；颜色是否为青褐色转深褐色？叶片病健交界有无霜状霉轮？茎杆上病斑是否为条形黑杆状？果实上是否呈边缘不清晰、棕褐色、较硬的病斑？ 2．病原 属鞭毛菌亚门疫霉菌属真菌。病菌孢囊梗无色、无隔，生长不均而具膨大结节状；孢子囊无色、卵圆形至长椭圆形，顶端具乳头状突起。从病部标本上挑取病菌，制片镜检孢囊梗和孢子囊的形状、颜色等特点，注意孢囊梗的膨大结节状特点。 （四）番茄早疫病（Altertnaria solani） 1．症状 植株整个生育期均可发病，可危害叶片、茎杆和果实。叶片上病斑多为圆形、深褐色；叶柄和茎杆上病斑椭圆形；果面上病斑圆形、暗褐色、凹陷；各部病斑均具明显的同心轮纹，潮湿时生出灰黑色霉层。取病害标本，观察各部位病斑形状、颜色等特点，有何区别？注意病斑同心轮纹的特点？ 2．病原 属半知菌亚门链孢霉属细菌。病菌分生孢子梗褐色、分隔、不分枝；分生孢子单生、淡褐色至黄褐色、手雷状、有长喙、具纵横隔膜。从病部霉层或培养基上挑取病菌，制片镜检分生孢子梗和分生孢子的形态，注意孢子大小、颜色、形状和分隔情况；纵横分隔是否明显？ （五）番茄叶霉病（Fulvia fulva = Cladosporium fulvum） 1．症状 主要危害叶片、偶尔侵害果实。叶片上病斑椭圆形或不规则形、淡黄绿色，边缘不明显；病斑背面生出灰色、褐色、桔黄色至紫褐色的绒状霉层。取病叶标本，观察病斑形态、颜色及其上病菌表现状态；病斑正、反面的特点有何不同？病斑上霉层是否多种颜色？ 2．病原 属半知菌亚门褐孢霉属真菌，病部的霉层为病菌的分生孢子梗和分生孢子。分生孢子梗较长、褐色、顶端有短分枝；分生孢子椭圆形、长圆形至棍棒形，浅褐色，单胞、双胞、多胞者均有。从病叶上挑取病菌制片，镜检分生孢子梗及分生孢子颜色、形态等特点，注意孢子着生状态、呈何颜色？孢子细胞数目是否有多种情况？ （六）番茄斑枯病（Septoria lycopersici） 1．症状 植株整个生育期均可发病，主要危害叶片，也可侵害茎杆和果实。叶片上病斑较小，圆形、中央灰白色、边缘深褐色，斑面上散生小黑点。取病叶标本，观察病斑形状、颜色等特点，注意病斑同心轮纹的特点？斑面上是否生有明显的小黑点？ 2．病原 属半知菌亚门壳针孢属真菌，病部可产生病菌的分生孢子器。分生孢子器球形、黑色；分生孢子无色、针状、具3~9个隔膜。取病叶作徒手切片，镜检分生孢子器的颜色、形态；注意分生孢子是否针状、无色、多个隔膜？ （七）番茄白粉病（Erysiphe polyconi） 1．症状 在成株期发病，主要危害叶片，偶尔茎杆、叶柄发病。病部初现白色小粉点，扩大呈白粉状斑，以后连片。观察病叶标本，注意病害症状主要发生在叶部的哪一面？病斑边缘是否明显？病部有无白粉状物？ 2．病原 属子囊菌亚门白粉菌属真菌。病菌无性世代的生孢子梗无色、短小、不分枝、基部不膨大；分生孢子无色、单胞、椭圆形、串生；闭囊壳少见。取黄瓜白粉病叶，挑取病部菌体，制片镜检病菌分生孢子梗和分生孢子的颜色、形态特点。 （八）番茄溃疡病（Clavibacter michiganense pv. michiganense） 1．症状 整株危害，茎杆基部和果实上症状明显。病株下部叶片萎蔫、似缺水状；病茎基部增粗、可产生大量的气生根、后期中空，髓部变褐色；果实上病斑圆形、外圈白色、中心粗糙、褐色，似鸟眼状——特点独具。观察病茎标本，注意病部畸形增粗、生出气生根的特点；病茎后期是否中空？剖视病茎髓部是否变褐色？果实上病斑是否外圈白色、中心粗糙褐色，似鸟眼状？ 2．病原 属厚壁菌门棒杆菌属细菌。菌体短杆状、单胞、无色、无鞭毛，革兰氏染色阳性反应。在培养基上形成圆形黄色菌落。用刀片切取病害标本，观察细菌溢脓情况，并对细菌进行革兰氏染色，镜检其是否为短杆状革兰氏阳性细菌。 （九）番茄脐腐病（生理性病害） 1．症状 多发生在前期幼果上。初期在果实脐部出现暗绿色、油浸状斑点，扩大后直径达2厘米左右，褐色至黑褐色，病皮革质化，较硬，内部果肉干缩，使病部向内凹陷；病果易于提早着色变红。取病果标本，观察脐部受害的发病特点；注意病斑的颜色、大小、形状、凹陷的特点；和其他侵染性病害比较危害的区别；注意病部有否病原物生出？ 2．病因 果实缺钙或供水不均所引起的生理病害。 （十）茄子黄萎病（Verticillium dahliae） 1．症状 多在门茄坐果后开始发病，典型症状是叶片的叶肉变黄呈现黄绿相间的斑驳状，植株萎蔫、落叶。开始病株整株或半边似缺水状萎蔫，反复几次后不能复原；有的全叶黄萎，严重时全株叶片脱落；茎部维管束变褐色。观察病株，注意其全株性或半边性萎蔫枯死、叶片上掌状斑驳的特点；并回忆棉黄萎病为害特点与之比较，注意其叶上症状表现，是否呈现斑驳状枯黄？剖视病部维管束，注意内部是否变褐色？ 2．病原 属半知菌亚门轮枝菌属真菌。病菌菌丝初无色，老熟时褐色；分生孢子梗直立，较长，呈轮状分枝；分生孢子椭圆形、单胞。挑取培养的病菌制片、或取制备片镜检，注意分生孢子梗直立、轮状分枝和分生孢子的形态、颜色等特点；观察分生孢子梗的轮状分枝和其他病菌有何不同？ （十一）茄子褐纹病（Phomopsis vexans） 1．症状 主要危害叶片、茎杆和果实。叶片上病斑枯白色至褐色，其上轮生许多小黑点，病斑后期可干裂、穿孔；茎杆上病斑梭形、中央灰白色、边缘褐色，密生小黑点；果实上病斑圆形、浅褐色只黑褐色、具明显的同心轮纹、密生小黑点。取病害标本，观察各部病斑的形状及颜色有何变化？果实上病斑是否凹陷？是否有小黑点？病斑上的小黑点是否均排列成同心轮纹状？ 2．病原 属半知菌亚门拟茎点菌属真菌。病菌分生孢子器椭球形，该菌可产生椭圆形和钩形、丝状、弯曲的两种类型的器孢子，均无色、单胞。取茄褐纹病果皮（带小黑点的）作徒手切片。镜检分生孢子器和器孢子形态；注意茎杆及果实上的分生孢子器中多产生哪种孢子，你检查的以哪种孢子为多？ （十二）茄子绵疫病（Phytophthora parasitica） 1．症状 主要危害果实。病部初期为水浸状、暗褐色、圆形病斑，稍凹陷，扩展较快；高湿时，病斑产生白色絮状菌丝，内部果肉腐烂变黑；叶片和茎杆受害可产生褐色病斑，病部生出稀疏的白絮状霉层。取病叶标本，观察病果上病斑颜色、形状、腐烂特点和表生的白色绵霉状物；注意病斑的大小、颜色、形状，注意霉层的生出部位。 2．病原 属鞭毛菌亚门疫霉菌属真菌。病菌菌丝和孢子囊梗无明显区别；孢子囊无色、卵圆形至长椭圆形，顶端具乳头状突起；卵孢子球形，淡色。从病部标本上挑取病菌，制片镜检孢子囊及卵孢子各自的形状、颜色等特点；和疫病病菌比较孢子囊梗和孢子囊的形态区别。 （十三）茄子褐色圆星病（Cercospora melongenae） 1．症状 主要危害叶片。叶片上病斑圆形至近圆形，中部灰褐色，边缘红褐色，湿度大时，病斑上生出浅灰色霉层。取病叶标本，注意观察病斑的大小、形状、颜色等特点；病斑是否为中部灰褐色，边缘红褐色？ 2．病原 属半知菌亚门尾孢属真菌。病菌分生孢子梗无分枝、多曲折状、浅褐色；分生孢子鞭状、无色、具多个分隔。从病部挑取病菌制片镜检，观察病菌分生孢子梗和分生孢子的颜色、形态特点；注意分生孢子梗是否曲折状、浅褐色？分生孢子是否鞭状、多隔？ （十四）辣椒炭疽病（Colletotrichum capsici） 1．症状 主要危害果实和叶片。叶片上病斑褐色、近圆形、中部灰白色、边缘褐色；果面上病斑黄褐色、圆形或不规则形、凹陷、中部灰白色、边缘红褐色，轮生小黑点。取病叶和病果标本，注意观察病斑圆形或不规则形、呈灰色腐烂、中央凹陷、上生轮状小黑点的症状特点。比较观察炭疽病和疮痂病叶部为害症状的区别，斑形、颜色有何异同之处？ 2．病原 属半知菌亚门炭疽菌属真菌。分生孢子单胞、无色、卵圆形至长椭圆形；分生孢子盘生中有黑褐色刚毛。取辣椒炭疽病带小黑点的病果皮作徒手切片，镜检分生孢子盘及分生孢子梗的形态；分生孢子的形状、大小、颜色；注意分生孢子盘周缘是否生有较粗壮、具分隔、暗褐色的刚毛？ （十五）辣椒疮痂病（Xanthomonas campestris pv. vesicatoria） 1．症状 主要危害叶片、果实和茎杆。叶片上病斑褐色、多不规则形、边缘稍隆起，呈疮痂状，病叶易变黄、脱落；果面上病斑呈疮痂状、稍隆起、圆形或长圆形、黑褐色，潮湿时病部可溢出菌液。取病叶标本，和炭疽病比较观察，注意病斑的颜色、形状等特点；病斑是否呈疮痂状、稍隆起？注意病果上病斑的颜色、形状等特点。 2．病原 属薄壁菌门假单胞杆菌属细菌。菌体短杆状、单胞、无色，具1~5根单极生鞭毛，革兰氏染色阴性反应。在PDA培养基上形成圆形乳黄色菌落。用刀片切取病叶标本，观察细菌溢脓情况，并进行革兰氏染色，镜检病菌是否为革兰氏阴性细菌。 （十六）辣椒疫病（Phytophthora capesici） 1．症状 植株整个生育期均可发病，可危害叶片、茎杆和果实。叶片上病斑近圆形、暗褐色；茎杆上分叉处易受害，出现褐色条斑，病部以上枝叶易凋萎；果实受害多从蒂部开始，病斑水浸状、暗绿色、很快软腐；湿度大时，病部表面密生霜粉状灰白色霉层。取病害标本，观察疫病在叶、茎、果上的为害特点，注意病斑是否为暗褐色、腐烂？表面呈现的灰白色霉粉为何物？ 2．病原 属鞭毛菌亚门疫霉菌属真菌。病菌孢子囊梗无色、丝状；孢子囊单胞、淡色、卵圆形，顶端具乳头状突起；卵孢子球形，淡黄色。从标本上病部挑取病菌制片，镜检孢子囊梗、孢子的形状、颜色，孢子囊呈何种形态？和其他低等卵菌比较有何特点？卵孢子的形态、颜色等特点如何？ （十七）辣椒白星病（Septoria lycopersici） 1．症状 主要危害叶片。病斑圆形或椭圆形、中央灰白色、边缘深褐色且稍隆起，斑面上散生小黑点。取病叶标本，注意观察病斑的形状、颜色等特点，是否中央灰白色、边缘深褐色？ 2．病原 属半知菌亚门壳针孢属真菌。病部可产生病菌的分生孢子器。分生孢子器球形、黑色；分生孢子无色、针状、具3~9个隔膜。取病叶作徒手切片，镜检分生孢子器的颜色、形态；注意分生孢子是否针状、无色、多个隔膜？ （十八）辣椒日灼病 1．症状 主要危害果实。果实向阳面呈现灰白色、革质状、不规则形病斑，病斑坏死后硬化呈干疤状；潮湿时易受腐生菌侵染，长出灰黑色霉层而腐烂。取受害病果，观察病斑灰白色、革质状的特点；注意和侵染性病害病斑的区别。 2．病因 由阳光直射、高温灼烫等引起的生理病害。 （十九）其他病害 根据当地茄科蔬菜病害发生的情况，观察其他重要病害症状特点和病菌形态特征。 五．作业 1．绘番茄晚疫病和灰霉病病菌形态图。 2．绘茄子褐纹病和辣椒炭疽病菌原形态图。 3．列表比较番茄早疫病、晚疫病和灰霉病危害叶片和果实的症状特点。 4．列表比较茄子褐纹病、褐色圆星病危害叶片的症状特点。 实验实习四 豆科和其他蔬菜主要病害的识别与鉴定 一、目的要求 通过实验，认识豆科和其他蔬菜主要病害的症状和病原特点，掌握病害的诊断特征。 二、仪器用品 显微镜、幻灯机、投影机、计算机、载玻片、盖片、解剖刀、拨针、软化液、棉蓝、切片、培养皿、蒸馏水、擦镜纸、徒手切片夹持物等。 三、实习材料 豆科和其他蔬菜主要病害(菜豆炭疽病、锈病、细菌性疫病、枯萎病，芹菜斑枯病和早疫病，葱锈病、紫斑病和霜霉病，姜腐烂病，韭菜灰霉病等)的症状标本、新鲜材料、切片、挂图、照片、幻灯片、多媒体课件等。 四、观察内容及方法 （一）菜豆炭疽病（Colletotrichum lindemuthianum） 1．症状 主要危害茎和荚，亦可危害叶片和叶柄。茎部和叶柄上病斑呈褐锈色细条形斑；荚上病斑近圆形至不规则形，边缘红褐色，中央凹陷，褐色，潮湿时内生大量的粉红色分生孢子团，干燥时形成小黑点；叶片上病斑边缘呈深褐色，中间浅褐色，常愈合为大型不规则病斑。注意观察病斑发生的部位、形状和色泽，是否有粉红色孢子团和小黑点？ 2．病原 病菌属半知菌亚门炭疽菌属真菌。分生孢子盘黑色，周围长有许多黑色或深褐色刚毛，分生孢子梗短，无色。分生孢子无色，单孢，卵圆形。在病组织材料上刮取几个黑色小点状物，或用徒手切片法制片镜检，观察：①分生孢子盘的形状、大小及色泽，是否有黑色的刚毛；②分生孢子的形状及色泽。 （二）菜豆锈病（Uromyces appendiculatus） 1．症状 主要危害叶片，病斑圆形，病叶正反面都产生红褐色隆起的夏孢子堆，表皮破裂后散出铁锈状粉状物，即病菌的夏孢子，后期在病部产生黑褐色的冬孢子堆。观察病叶标本，注意：①夏孢子堆发生的部位、形状、色泽；②夏孢子堆和冬孢子堆有何区别？ 2 .病原 属担子菌亚门单胞锈属真菌。夏孢子单细胞，椭圆形或卵圆形，黄褐色，表面有细刺；冬孢子单细胞，栗褐色，近圆形, 顶端有浅褐色的乳头状突起。基部有柄，无色。在病斑上，刮取少量锈状物，制片镜检，观察夏孢子、冬孢子的形状、大小、色泽？ （三）菜豆细菌性疫病（Pseudomonas　syringae） 1．症状 主要危害叶片，也可危害叶柄、茎和豆荚等部位。叶片受害，多在叶边缘产生不规则形的暗绿色水渍状斑点，病斑中间褐色，外围有一黄色的褪绿晕环。潮湿时病斑上有淡黄色菌脓溢出，干燥时形成黄白色菌膜。严重时病斑愈合成大斑，导致叶片枯死。注意观察病斑的形状、色泽等特点，是否有菌脓或菌膜，？ 2．病原 属假单胞菌属细菌。菌体短杆状，有荚膜，无芽孢，具有单根极生鞭毛。在肉汁胨琼脂平板上培养，观察菌落的形状、色泽、质地，革兰氏染色是阴性还是阳性？ （四）菜豆枯萎病（Fusarium oxysporum. f.sp. phaseoli） 1.症状 多在成株期发病，病株叶片自下而上逐渐变黄，似缺肥状，后导致整株萎蔫枯死。病株根部、茎基部变褐腐烂，在茎秆上产生长条形褐色病斑。潮湿时，在枯死病部产生粉红色粘质状霉层。剖茎检查，可见维管束变为红褐色至褐色。仔细观察病株发病部位，是否为系统侵染？病斑特点如何，有无霉层产生，有何特征？维管束是否变色？ 2.病原 属半知菌亚门镰孢属真菌。病部的粉红色霉层主要是病菌的分生孢子，大型分生孢子镰刀形，稍弯，无色透明，顶端细胞圆锥形，足胞明显，一般2～3个隔膜。小型分生孢子单细胞，椭圆形或卵圆形，无色透明。厚垣孢子球形或近球形，淡褐色，顶生或间生。观察大、小分生孢子和厚垣孢子形状、颜色、分隔情况等特点。 （五）芹菜斑枯病（Septoria apiicola） 1.症状 主要危害叶片，也危害茎和叶柄。病斑初为淡褐色油浸状小斑点，逐渐扩大呈边缘红褐色，中间黄褐色，病斑中央密生小黑点（分生孢子器）。在叶柄和茎上两型病斑相似均为长园形，稍凹陷，色稍深，散生黑色小点。观察病害标本，注意危害部位、病斑颜色、形状等特征，是否产生小黑点？ 2.病原 病原属半知菌亚门壳针孢属真菌，分生孢子器球形，分生孢子无色透明，丝状，直或稍弯曲，具有0～7个横隔膜（3个居多）。切片观察病菌特征，或直接观察病菌玻片，注意病菌分生孢子器形状，分生孢子形状、颜色、分隔情况等。 （六）芹菜早疫病（Certospora apii） 1. 症状 主要为害叶片，其次是茎和叶柄。叶片初生水浸状黄绿色斑点，以后发展成圆形或不规则形病斑，黄褐色，边缘黄色或深褐色。病斑不受叶脉限制，可扩展连片最后叶片干枯。叶柄和茎上病斑产生水浸状条斑或圆斑，后变褐色，稍凹陷。田间湿度大时，病斑上生有稀疏灰白色霉状物。观察病害标本，注意病斑大小、形状、颜色等特点，与斑枯病有何区别？病部有无病征，特征如何？ 2.病原 属半知菌亚门尾孢属真菌。分生孢子梗直立或弯曲；常成簇从寄主气孔伸出，不分枝或略有分枝，有或无屈膝状，褐色，顶端色较淡；分生孢子单生，倒棍棒状或鞭形，无色，具3~19个分隔，表面光滑。挑片观察或直接观察病菌玻片，注意分生孢子梗和分生孢子形状、颜色和分隔情况。 （七）姜瘟病（Pseudomonas solanacearum） 1.症状 主要为害生姜根茎，茎、叶也能受害。发病初期，植株地上部叶片萎垂，无光泽，整株叶片自下而上枯黄，反卷，病害由茎部逐渐向上发展，靠近地表的茎基部和地下根茎的上半部首先发病。病部初呈水浸状，黄褐色，无光泽，稍变软，纵剖茎基部和根茎，可见维管束变褐色。用手挤压有污白色菌脓从维管束溢出。最后根茎和茎基部变褐腐烂，伴有污白发臭的汁液，最后脱水干燥仅剩表皮。观察标本和病害照片，注意危害病害部位，病部颜色、形状有何变化？ 2.病原 属薄壁菌门假单胞杆菌属细菌。病菌细菌为短杆状，革氏染色阴性，大小为具有1~4根极生鞭毛，不形成荚膜和芽孢，两端着色较深。在肉汁胨培养基上，菌落污白色，不规则形或近圆形，直径1~4cm。湿润有光泽。观察病菌玻片和培养菌落，注意病菌形态和培养性状。 （八）莴苣霜霉病 （Bremia lactucae） 1.症状 主要为害叶片。发病初期，叶片上产生黄色多角形病斑，叶背部病斑上长出白色霜状霉层。后期病斑呈黄褐色并连成片，致使叶片干枯。观察标本，注意危害病害部位和病斑特点，有无病征，特征如何？ 2.病原 属鞭毛菌亚门盘梗霉属真菌。病部霉层为病菌的孢囊梗和孢子囊，孢囊梗无色，二叉状3-6次分枝，分枝顶端膨大呈盘状，上生2-5个小梗并各着生一个孢子囊。孢子囊无色，卵圆形。卵孢子球形，淡褐色，有皱纹。挑片观察或直接观察病菌玻片，注意孢囊梗分枝情况，顶端是否膨大为盘状？孢子囊有何特征？ （九）葱锈病（Puccinia allii ） 1.症状 主要危害叶片和花梗，病部产生椭圆形隆起小疱, 红褐色, 后裂开散出铁锈色粉末, 为病菌夏孢子堆; 后期病部形成黑褐色疱斑, 为病菌冬孢子堆。病叶易提早干枯。观察病叶标本，注意夏孢子堆和冬孢子堆颜色、形状等特点。 2.病原 属担子菌亚门柄锈菌属真菌。夏孢子单细胞，圆形或椭圆形，淡褐色，表面有细刺；冬孢子双细胞，有一无色小柄，长椭圆形或倒卵圆形，深褐色。挑片观察或直接观察病菌玻片，注意夏孢子和冬孢子形状、颜色等特点。 （十）葱紫斑病 （Alternaria porri） 1.症状 主要危害叶片和花梗，病部产生椭圆形或纺锤形病斑, 淡褐色至紫褐色, 稍凹陷，表面有黑褐色霉层，呈同心轮纹状排列。病斑扩大可导致全叶干枯或折断。观察病叶标本，注意病斑颜色、形状等特点，有无霉层产生？ 2.病原 属半知菌亚门交链孢属真菌。分生孢子梗单生或束生，褐色，有分隔，少分枝。分生孢子棒状，褐色，有纵横分隔，顶端有无色细长的喙。挑片观察或直接观察病菌玻片，注意分生孢子形状、颜色和分隔等特点。 （十一）韭菜灰霉病（Bortrytis squamosa ） 1.症状 主要危害叶片，症状有以下类型：①白点和干尖型 叶正面和背面产生白色或浅褐色椭圆形斑点, 由叶尖向下发展，病斑相互愈合成斑块，致使叶尖或全叶干枯。 潮湿时病部生灰色霉层, 伴有霉味。②湿腐型 大流行或湿度大时，或储运过程中，病叶湿软腐烂，不产生白点，病部生有灰色霉层。观察病叶标本，注意病斑类型、颜色、形状等特点，有无霉层产生？特征如何？ 2.病原 属半知菌亚门葡萄孢属真菌。分生孢子梗淡褐色，直立，顶端有分枝，分枝末段膨大，常有小突起，上产生大量的分生孢子，呈葡萄穗状。分生孢子单胞，无色，近球形或卵圆形。挑片观察或直接观察病菌玻片，注意分生孢子梗和分生孢子形状、颜色等特点。 （十二）蕹菜白锈病（Albugo opomoeaeaquaticae ） 1.症状 为害叶片, 叶正面病斑黄色, 叶斑对应部位生白色疱斑, 圆形或不规则形, 后期疱斑破裂, 被害部常呈畸形。观察病叶标本，注意病斑类型、颜色、形状等特点，有无病征产生？特征如何？ 2.病原 属鞭毛菌亚门白锈菌属真菌。孢囊梗呈棍棒状，无色，顶端串生孢子囊，孢子囊近球形，无色，单胞。卵孢子球形，黄褐色，外壁很厚，表面有不规则的突起。用挑针挑取白色病斑内的粉末制片镜检，或直接镜检病菌永久玻片，观察孢囊梗和孢子囊的形态特征。 （十三） 蔬菜根结线虫病（Meloidogyne spp.） 1.症状 根结线虫寄主范围广，在蔬菜上主要危害茄科、豆科、葫芦科、十字花科及胡萝卜、蒿苣、芹菜等。主要侵染根部，以侧根和须根最易受害，形成大量瘤状根结。其根结的大小和在根上的分布因不同寄主种类而异，根结初为白色，质地柔软，后变为浅黄褐色或深褐色，表面粗糙，有时龟裂，剖视较大的根结内部，可见到白色梨形的粒状物即线虫的雌成虫，一个根结中可有一至多个雌虫，小根上根结多为一个。地上部分生长不良，植株矮小，叶色暗淡发黄，呈点片缺肥状，叶片变小，不结实或结实不良。重病株后期根部腐烂，而全株死亡。观察病株标本，注意根结形状和根部特征，剖开根结，内部有无白色小米粒状虫体？病株地上部分生长有何变化？ 2.病原 病原为线形动物门根结线虫属线虫。造成该病的主要线虫种类有南方根结线虫M. incognita，花生根结线虫M.arenaria，北方根结线虫M.hapla和爪哇根结线虫M.javanica，其中南方根结线虫为优势种群。虫体发育分为卵、幼虫和成虫3个阶段。卵呈肾脏形或椭圆形，黄褐色，两端圆，藏于黄褐色的胶质卵囊内。一龄幼虫呈“8”字形卷缩在卵壳内，蜕皮后破壳而出为二龄幼虫；二龄幼虫体细长线形无色透明，头部较钝，尾部尖，大小因种类不同而有差异，二龄幼虫开始侵染寄主故又称侵染性幼虫，蜕皮后成为三龄幼虫；此时雌雄虫体开始分化，雄虫仍为长线形，雌虫逐渐膨大呈梨形。挑片或直接观察根结线虫玻片，注意卵、幼虫和成虫的形态、颜色以及成虫虫体结构等。 （十四）其他病害 结合当地病情，观察其他重要病害的症状特点和病原特征，并与相似病害进行比较。 五.作业 列表比较菜豆几种叶部病害症状特点。 描述芹菜斑枯病和早疫病症状区别。 描述其他重要病害症状特点 绘2-3种病原菌形态图。 实验实习五 蔬菜病害田间病情调查 一．目的要求：了解当地蔬菜病害发生的种类，掌握蔬菜主要病害的调查方法与防治操作技术，为蔬菜病害的调查研究、品种的抗病性评价以及制定防治计划奠定基础。 二．仪器用品：放大镜、记录本、标本采集用具及其他调查用品和用具。 三．内容和方法： （一） 蔬菜病害的普查 以小组为单位进行。 1.调查内容 结合当地蔬菜生产的具体情况，分别对不同蔬菜作物各自病害的发生种类、分布地点、危害程度以及发病条件等基本情况进行普查，以便为制定各种蔬菜病害的防治规划提供依据。 2.调查时间 可参照其他作物病害的普查，分别于苗期、成株期和生育后期进行三次调查，以便于了解和掌握各种蔬菜病害发生的全面情况。 3.调查方法 结合不同蔬菜的布局、地块情况及田间病害发生的特点，可采用五点取样、随机取样或其他取样方法，每点取样100株（叶或果实等），统计各种病害的发病率，相应记入表8-1。 表8-1 蔬菜病害普查表 调查地点：　　　　　　　　　　　调查日期： 调查人： 作物 种类 病害 种类 田块号 地势 土质 水肥条件 品种 种子 来源 生育时期 发病率% 危害 程度 备 注                （二） 蔬菜苗期病害的调查 以小组为单位进行。 1.主要任务 调查当地蔬菜病害的种类、危害程度以及发病条件等基本情况，从而为当年和翌年病害的防治工作提供科学依据。 2.调查方法 选择苗病发生程度不同的田块，在不影响全苗、不损坏植株的前提下进行，可采用五点取样、随机取样或其他取样方法，各取5~10个点，每点随机拔取株苗50~100株，仔细检查苗病种类，统计各种病害的病苗率及病情指数。本调查也可结合间苗、定苗或移苗时进行。将调查结果相应记入表8-2。 表8-2 蔬菜苗期病害发生基本情况调查表普查表 调查地点 作物种类 调查日期 品种名称 种子来源 土壤类型 耕作情况 施肥情况 播种时期 前茬作物 届时地温 防治措施 病害 种类 调查 地点 地块号 调查 株数 发病 株数 病株率% 病情 指数 备 注   猝倒病 立枯病 灰霉病 根腐病 沤根病 其他         * 必要时，可分别调查主要病种的发病率和病情指数。 3.统计方法 ① 发病率及病情指数的统计方法可参考以前的实验实习有关介绍。 ② 蔬菜苗期病害严重度分级标准： 0级 无病； 1级 茎基部病斑横向发展不超过茎周1/2； 2级 茎基部病斑横向发展超过茎周1/2，但病苗不枯死； 3级 病苗枯死。 （三）主要蔬菜病害的调查 1．主要任务 学习掌握病害发生率和危害程度调查的基本方法；必要时，了解不同品种或不同防病措施的病害发生差异。 2． 调查方法 据不同蔬菜种类以及病害种类，于病害盛发期进行，可采用五点取样、随机取样或其他取样方法，每点取样100株（叶或果实等），统计发病率、病情指数，作为分析病情轻重的依据。将调查结果填入表8-3中。 3．调查病害种类 可结合生产实习进行，以黄瓜霜霉病、白菜软腐病、蔬菜根结线虫病为典型病例，病情分级标准见下页。 表8-3 蔬菜主要病害病情调查表 调查地点： 调查时间： 调查人： 处理或 品种 调查 总株数 各级病株数 病株率% 病情指数 备注    0级 1级 2级 3级 4级 5级                  附主要病害病情分级标准 1. 黄瓜霜霉病及其他蔬菜霜霉病 0级 无病斑； 1级 病斑面积占整个叶面积的5%以下； 3级 病斑面积占整个叶面积的6%~10%； 5级 病斑面积占整个叶面积的11%~25%； 7级 病斑面积占整个叶面积的26%~50%； 9级 病斑面积占整个叶面积的50%以上； 2. 黄瓜白粉病 0级 无病斑； 1级 病斑面积占整个叶面积的1%以下； 3级 病斑面积占整个叶面积的2%~5%； 5级 病斑面积占整个叶面积的6%~20%； 7级 病斑面积占整个叶面积的21%~40%； 9级 病斑面积占整个叶面积的40%以上； 3.蔬菜叶斑病（早疫病、斑枯病、黑斑病等） 0级 无病斑； 1级 病斑面积占整个叶面积的5%以下； 3级 病斑面积占整个叶面积的6%~10%； 5级 病斑面积占整个叶面积的11%~25%； 7级 病斑面积占整个叶面积的26%~50%； 9级 病斑面积占整个叶面积的50%以上； 4.辣椒炭疽病 0级 无病斑； 1级 病斑面积占整个叶面积的2%以下； 3级 病斑面积占整个叶面积的3%~8%； 5级 病斑面积占整个叶面积的9%~15%； 7级 病斑面积占整个叶面积的16%~25%； 9级 病斑面积占整个叶面积的25%以上； 5.番茄晚疫病 0级 无病斑； 1级 个别叶片有病斑； 3级 1/3以下叶片有病斑； 5级 1/3-1/2叶片有病斑； 7级 几乎所有叶片有病斑； 9级 全部叶片霉烂，几乎无绿色部分； 6.番茄灰霉病 0级 无病； 1级 病斑面积占整个叶面积的5%以下； 3级 病斑面积占整个叶面积的6%~15%； 5级 病斑面积占整个叶面积的16%~25%； 7级 病斑面积占整个叶面积的26%~50%； 9级 病斑面积占整个叶面积的50%以上。 7.白菜软腐病 0级 全部无病； 1级 1片外叶发病； 3级 2~3片外叶发病； 5级 外叶1/3以下发病； 7级 外叶1/3以上发病； 9级 外叶部分腐败或中心部分腐败。 8.蔬菜根结线虫病 0级 根部正常无病； 1级 根部发生线虫根结部分占根部的1/10以下； 2级 发生线虫根结部分占根部的1/10~1/4； 3级 发生线虫根结部分占根部的1/4~1/2； 4级 发生线虫根结部分占根部的1/2~3/4； 5级 发生线虫根结部分占根部的3/4以上。 9.辣椒（番茄）病毒病 0级：全株无病； 1级：植株上有明脉和轻微花叶症状； 3级：植株上有明显花叶症状； 5级：植株上有重花叶症状，叶片皱缩，植株轻度矮化（1/3 以下）； 7级：重花叶，产生疱斑，叶片变窄，植株明显矮化（1/3-2/3）， 叶柄基部 有轻度坏死条斑； 9级：植株叶片畸形，严重矮化（2/3 以上），基部或生长点坏死或植株全部枯死。 四．实习作业 1．根据调查，列表记载当地蔬菜作物病害的种类及为害情况。 2．结合当地蔬菜病害的具体防治操作，分析所用措施的防治效果。 3．根据蔬菜病害的普查结果，提出当地控制两种病害蔓延为害的防治计划。 4．采集当地蔬菜作物病害标本。 实验实习六 蔬菜病害药剂防治试验 目的要求 蔬菜作物种类繁多，病害种类更是复杂多样，各种病害的发生，常常给生产造成严重的损失。及时的进行药剂防治，是控制病害发展的有效措施。本实验的目的是学习蔬菜主要病害的药剂防治方法和病原物的接种方法，并通过试验筛选有效的防治药剂。 防治对象 以黄瓜霜霉病或番茄灰霉病为防治对象。 三．实验材料 1．感病黄瓜或番茄品种的无病幼苗若干株； 2．采集的霜霉病菌和灰霉病菌备以接种； 3．接种所用的相应器具：量杯、喷雾器、水桶、保湿设备等。 4．显微镜、血球计数器、玻棒、移植针等； 5．防治药剂：选用生产上新近应用的药剂，如黄瓜霜霉病可选用58%甲霜灵锰锌WP、64%杀毒矾WP、72%克露WP，72.2%普力克水剂等药剂，可用90%乙磷铝WP作为对照药剂；防治番茄灰霉病可选用50%速克灵WP、50%农利灵WP、65%甲霉灵WP，50%扑海因WP，40%施佳乐WP等药剂，可用70%甲基硫菌灵WP作对照药剂。也可根据需要使用其他药剂进行试验。 四．实验方法 1．病原菌接种 为保证试验效果，一般应进行病原菌接种。多采用孢子悬浮液喷雾接种法，将病原菌配制成106的孢子稀释液，用喷雾器对植株叶片均匀喷雾接种即可。接种一般在施药前2~3天进行，接菌后田间应保持较高湿度以利于诱发病害。也可试验田在周围种植感病植株或诱发行，进行自然接种。 　　2．施药方法 　　（1） 根据使用药剂的特性，设置不同施药浓度，多采用常规的喷雾方法施药。通常设置3次重复，并设有清水对照； 　　（2） 根据试验作物植株大小、数量等具体情况确定喷药量，通常每处理各重复用20~30株植株为宜；一般施药1次，必要时可施药2~3次。 　　3.调查记载 在施药前应调查病情基数，每次施药1周后调查各处理各重复发病情况，统计病株率、病叶率和病情指数，并计算防治效果。将调查结果填入表8-4中。 　　 表８－４不同药剂防治蔬菜病害效果统计表 调查地点：　　　　　　　　　　　调查时间：　　　　　　　　　调查人： 处理  重复 调查株数 各级病株数 发病率％ 病情指数 防治效果％ 备注     ０级 １级 ３级 ５级 ７级 ９级                     四．作业 将调查结果整理后写出实验报告，比较不同处理的防治效果，并就实验结果进行分析。