一 水稻病害 ? 水稻是我国主要粮食作物之一，种植面积广，约占全国耕地面积的1/4。水稻病害种类很多，全世界有100多种，我国有记载的约70多种。发生普遍、危害较重的病害约20多种。其中稻瘟病、纹枯病和白叶枯病发生面积大，流行性强，危害重，一直被认为是水稻的三大病害。病毒病是我国南方稻区的重要病害，主要有普通矮缩病、黑条矮缩病、黄矮病和条纹叶枯病等。水稻恶苗病、干尖线虫病为种传病害，目前在部分地区有所回升，造成严重损失。近年来由于品种的更换和施肥水平的提高，稻曲病的发生不断加重。水稻细菌性条斑病为国内检疫性病害，现已蔓延至长江以北地区。随着杂交稻的推广，杂交稻制种田的粒黑粉病发生严重，杂交稻后期的叶部病害，如叶尖枯病、云形病等也成为局部地区生产上的重要问题。 ? 实验实习一 水稻病害识别与鉴定 ? 一、目的要求 通过实验，认识水稻各种常见病害的症状特点及病原菌形态特征，能正确区分易混淆的病害，从而为病害诊断、调查和防治打下基础。 二、仪器用品 幻灯机、投影仪、计算机及多媒体教学设备，显微镜、载玻片、盖玻片、解剖刀、刀片、挑针、纱布、徒手切片工具、蒸馏水滴瓶、革兰氏染色液一套、香柏油、二甲苯、擦镜纸等。 三、实习材料 水稻病害（稻瘟病、纹枯病、恶苗病、稻曲病、叶鞘腐败病、叶尖枯病、云形病、粒黑粉病、菌核秆腐病、胡麻斑病、窄条斑病、白叶枯病、细菌性条斑病、细菌性基腐病、病毒病、干尖线虫病、赤枯病等）标本，新鲜病组织材料、病原物玻片或培养的新鲜菌体、挂图、多媒体教学课件。 四、观察内容和方法 （一）稻瘟病（Pyricularia grisea） 1. 症状 该病在水稻整个生育期都可发生，为害秧苗、叶片、穗、节等，分别称为苗瘟、叶瘟、穗瘟和节瘟。除叶片病斑外，其余部位症状均为病组织变褐色，湿度大时有灰色霉层。叶片病斑有几种类型：①慢性型病斑为梭形，两端有延长的褐色坏死线，病斑最外层为黄色晕圈，内层为褐色，中央呈灰白色，一般于病斑背面产生霉层；②急形性病斑为水渍状不规则形，叶片正反两面均产生大量霉层；③白点形病斑为白色近圆形小斑点；④褐点形病斑是褐色小点，仅限于叶脉之间。注意观察各种病害症状发生部位、形状、颜色、有无霉层等特点，联系品种抗病性、生育期和环境条件分析各种叶瘟类型的病害发展趋势，比较慢性型病斑和急形性病斑的差异。 2. 病原 属半知菌亚门梨孢属真菌。分生孢子梗由病组织气孔成簇生出，淡褐色，顶端屈折状，分生孢子无色或淡褐色，洋梨形，顶端钝尖，基部钝圆，具两个隔膜，孢子基部足细胞明显。用挑针从病组织表面挑取少量霉层制片，观察分生孢子大小、颜色、分隔数；病组织徒手切片，观察分生孢子梗着生、颜色和顶端屈折状特点。 （二）稻纹枯病（Rhizoctonia solani） 1. 症状 主要为害叶鞘，其次是叶片。病斑形状为云纹状，边缘暗绿色，中央灰绿色，病部有白色蛛丝状菌丝和菌核。天气干燥时，病斑边缘褐色，中央灰白色。发病后期病部还可见白色粉状霉层，为病菌的担子和担孢子。观察病害标本，注意病斑发生部位、扩展方向、子实体类型。 2. 病原 属半知菌亚门丝核属真菌。菌丝初期无色，后变淡褐色，分枝近直角，分枝处梢溢缩，近分枝处有一隔膜。该菌不产生分生孢子，易产生菌核，菌核黄褐色，扁球状或不规则形。挑取少量菌丝制片镜检，注意菌丝色泽、分枝和分隔特点，比较幼嫩菌丝和老熟菌丝形态差异。 观察PDA培养基上菌核产生情况。 （三）稻恶苗病（Gibberella fujikuroi） 1. 症状 秧田期最明显的症状是徒长，病苗比健苗高，颜色黄绿色，植株细弱。成株期叶鞘和和茎秆上产生淡红色或白色粉状物，后期常可见蓝黑色颗粒状物。剥开叶鞘，茎秆上有褐色条斑，茎节上长出倒生的不定根。注意苗期和成株期的症状特点，病苗是否比健苗高、黄、瘦？病株茎节处有无不定根？叶鞘表面子实体类型？ 2. 病原 有性态为子囊菌亚门赤霉属真菌，无性态为半知菌亚门镰孢属真菌。子囊壳蓝黑色，球形，子囊圆筒形，基部较细，子囊孢子长椭圆形，无色双胞。分生孢子以小型分生孢子为主，链状着生或簇生，无色，单胞，多为卵形和椭圆形。挑取病部霉层观看分生孢子形态，用子囊壳切片观看子囊和子囊孢子，注意孢子大小、形状、分隔数等特征。 （四）稻曲病（Ustilaginoidea virens） 1. 症状 该病先从内外颖壳缝隙处露出淡黄绿色孢子座，后包裹整个颖壳，颜色逐渐变为墨绿色，最后孢子座表面龟裂，散出墨绿色粉状物。孢子座表面可产生黑色、扁平、硬质的菌核。注意观察不同时期的病粒和孢子座颜色的关系，解剖病粒，观察孢子座内部颜色层次 2. 病原 属半知菌亚门绿核菌属真菌。厚垣孢子侧生于菌丝上，球形或椭圆形，黄褐色，表面有瘤状突起，分生孢子单胞、椭圆形。子囊壳内生于子座表层，子囊圆筒形，子囊孢子无色、单胞、丝状。挑取孢子座表面粉层制片，观察厚垣孢子大小、形状、颜色、着生特点及表面结构。用有性态切片，观看子囊壳排列特征、子囊孢子形态。 （五）稻粒黑粉病（Tilletia barclayana） 1. 症状 病菌先在病粒内部生长，破坏籽粒结构，颖壳仅出现颜色变暗。冬孢子成熟后，从内外颖壳缝隙处露出圆锥形黑色角状物，破裂后散出黑色粉末。比较病粒、健粒颖壳颜色、籽粒硬度，剥开病粒，观看内部被害状。 2. 病原 病原菌属担子菌亚门腥黑粉菌属真菌。冬孢子近球形，黑褐色，表面密生无色的齿状突起，齿状突起排列整齐，冬孢子表面常可见一无色透明的尾状残余物。冬孢子堆中混有球形、无色的不孕细胞。担孢子线形、无色、单胞，在担子顶端轮状着生。挑取病粒内黑色粉末制片，注意观察冬孢子表面结构和不孕细胞有无。观看担孢子形态和着生方式。 （六）稻菌核秆腐病（Nakateae sigmoidea，N. irregulare） 1. 症状 近地面稻株内外叶鞘产生黑色斑块，叶片发黄枯死，病斑表面产生浅灰色霉状物。最后病组织变软腐朽，整个植株贴地倒伏。剥开叶鞘，早期有白色菌丝体，后期茎秆腔壁上产生大量细小的黑色菌核。观察田间稻株被害状，注意与其他因子造成的倒伏相区别。触摸病组织，有无绵软之感？ 2. 病原 属半知菌亚门双曲孢属真菌。分生孢子梗单生或丛生，淡橄榄色。分生孢子纺锤形或新月形，一般3个隔膜，中央两个细胞色深，两端细胞淡色或无色。菌核小，直径约0.2~0.4mm，球形，黑色有光泽，表面光滑。取病株表面霉层制片观察分生孢子，注意两端细胞与中央细胞的颜色、形状差异。剥开叶鞘看菌核，注意不同秆腐病菌的菌核大小、数目差异。 （七）稻叶尖枯病（Phyllosticta oryzicola） 1. 症状 一般多从叶片尖端或叶缘开始产生，病斑呈长条形，黄或枯黄色，病健交界明显，有时有褐色波浪线，病叶尖端易破裂成麻丝状，后期病部埋生褐色小点即分生孢子器。注意观察病叶症状特点，与稻白叶枯病比较症状有何异同？ 2. 病原 属半知菌亚门叶点霉属真菌。分生孢子器近球形，埋生，后期孔口外露。分生孢子卵圆形或椭圆形，单胞无色，端部有油球1~2个。取后期病叶对光观看，是否有褐色小点？徒手切片，观察分生孢子器和分生孢子形态。 （八）稻云形病（Gerlachia oryaae） 1. 症状 病斑初为水渍状，后呈灰褐色和暗褐色相交互的波浪云纹。湿度高时叶片呈水渍状腐烂，波浪纹不明显，病斑表面可产生少量不明显的白色粉状物，后期产生褐色小点（子囊壳）。注意观察病斑位置、颜色，波浪纹是否清晰？ 2. 病原 属半知菌亚门格氏霉属真菌。分生孢子短新月形，单胞或双胞无色。子囊孢子无色，长椭圆形，两端钝圆，3~5个细胞，分隔处稍溢缩。观察病原菌形态，着重分生孢子的形态特征。 （九）稻叶黑粉病（Entyloma oryzae） 1. 症状 叶片上形成黑色、略隆起、断续的条点状病斑（冬孢子堆），病部表皮不破裂，叶片易枯黄。观看病叶标本，冬孢子堆可否抹去？为什么？ 2. 病原 属担子菌亚门叶黑粉菌属真菌。冬孢子聚生，排列紧密，形状为多角圆形或卵圆形，褐色，壁光滑。取病叶徒手切片，观察冬孢子的排列、形态、大小和颜色。 （十）稻叶鞘腐败病（Sarocladium oryzae） 1. 症状 病斑产生在剑叶叶鞘上，呈暗褐色虎纹状，叶鞘内幼穗全部或部分腐烂，剥开病叶鞘，有白色菌丝和淡红色霉层。注意症状产生部位，对稻穗有何影响？ 2. 病原 属半知菌亚门帚枝霉属真菌。分生孢子梗1~2次分枝，分枝处具3~4个轮枝，分生孢子着生于轮枝顶端，无色、单胞、圆柱形。挑取病部霉层制片，观察分生孢子梗分枝特点和分生孢子形态。 （十一）稻苗期病害（Achlya oryzae；Pythium spp.；Fusarium spp.；Rhizoctinia solani） 1. 症状 不同育秧方式病害种类不同，水育秧苗病多为绵腐病，通称“烂秧”。旱育秧、半旱育秧苗病多为立枯病和恶苗病。绵腐病症状为种壳破口处或幼芽基部出现少量乳白色胶状物，逐渐向四周长出放射状白色絮状菌丝，后呈铁锈色或绿褐色，稻种、幼苗易腐烂死亡。立枯病有几种症状类型，芽腐：幼芽变褐扭曲腐烂；针腐：心叶枯黄，茎部变褐软腐；黄枯：从外部叶片到心叶逐渐变黄，萎蔫，心叶卷曲，残留少许绿色，容易拔断；青枯：心叶纵卷成针状，全株呈污绿色枯死。观察各种苗病症状，注意烂秧和立枯病几种症状的区别。 2. 病原 烂秧主要由稻绵霉（Achlya oryzae）引起，病菌为鞭毛菌亚门绵霉属真菌。游动孢子囊管状，游动孢子肾形，两根鞭毛。雄器细长管状，藏卵器球形，内生多个卵孢子。立枯病病原菌主要有：腐霉菌（Pythium spp.），鞭毛菌亚门腐霉属真菌；镰孢菌（Fusarium spp.），半知菌亚门镰孢菌属；茄丝核菌（Rhizoctinia solani），半知菌亚门丝核菌属。腐霉菌菌丝发达，无隔，孢子囊球状或姜瓣状，藏卵器近球形，内生一个卵孢子。镰孢菌大型分生孢子镰刀形，弯曲或稍直，多分隔无色，小型分生孢子椭圆形或卵圆形，无色透明单胞。茄丝核菌特征见稻纹枯病。观察各种病原菌形态，注意绵腐、腐霉的菌丝有无隔膜，游动孢子囊呈何形状，藏卵器中卵孢子数目，镰孢菌大小分生孢子形态、厚垣孢子有无、产生方式。 （十二）稻胡麻斑病（Biplaris oryzae） 1. 症状 叶片病斑椭圆形，有黄色晕圈，内圈褐色，有时中央还呈枯白色坏死状。穗颈、籽粒、枝梗和谷粒病斑均为褐色，表面产生黑色霉层。与稻瘟病比较，叶片病斑的大小、形状、颜色和病斑数目多少，霉层颜色深浅。 2. 病原 属半知菌亚门双极蠕孢属真菌。分生孢子褐色，倒棍棒形，多数弯曲，脐点基部平截。重点观察分生孢子形状、颜色、和脐点特征。 （十三）稻窄条斑病 （Cercospora jansena） 1. 症状 可侵害叶片、叶鞘和穗等。在叶片上，病斑初为褐色小点，后沿叶脉扩展，形成0.5~1×1~5mm短线状条斑。病斑的周围紫褐至褐色，中央灰褐色。严重时多个病斑连结成长条斑，引起叶片早枯。 2. 病原 属半知菌亚门尾孢属真菌。分生孢子梗褐色，顶生分生孢子。分生孢子多为短鞭状，淡橄榄色或无色，3~4个分隔。 （十四）稻白叶枯病 （Xanthomonas oryzae pv. oryzae） 1. 症状 有几种类型，叶枯型：病斑长条形，颜色黄白色或枯白色，病健交界清晰，病部易见蜜黄色珠状菌脓；急性型：病斑暗绿色，似开水烫伤状，有菌脓产生；凋萎型：病株叶片失水、青卷，最终枯死，卷曲青枯的叶片内可见菌脓；黄叶型：幼叶均匀褪绿，或产生黄绿相间宽条斑。重点观察叶枯型症状特点，怎样与生理性枯黄区别？如何观察菌脓？ 2. 病原 属薄壁菌门黄单胞菌属细菌。菌体短杆状，鞭毛单根极生，革兰氏染色反应阴性。菌落蜜黄色，粘性。切取病健交界叶片组织3×3mm，置显微镜下，暗视野观察喷菌现象。通过实验，学会了用哪些方法诊断植物细菌病害？ （十五）稻细菌性条斑病（Xanthomonas oryzae pv. oryzicola） 1. 症状 病斑初为沿叶脉扩展的暗绿色或黄褐色纤细条纹，后病斑增多并愈合成不规则形或长条状枯白色条斑，对光观察，病斑为许多半透明的小条斑愈合而成。病部产生较多细小的深蜜黄色菌脓。注意病斑分布、形状、数目、是否透明，菌脓大小和数量。 2. 病原 属薄壁菌门黄单胞菌属细菌，与稻白叶枯病分别为水稻黄单胞菌的两个致病变种。 （十六）稻细菌性基腐病（Erwinia chrysanthemi pv. zeae） 1. 症状 近土面叶鞘产生不规则、边缘深褐色、中央枯白色病斑，剥开叶鞘，茎秆也有黑褐色纵条斑。叶片青卷，以后枯黄。有的病株心叶枯死，似螟害造成的枯心，有的叶片由下而上枯死，表现为“剥皮死”。病株易齐根拔断，有恶臭。病茎洗净后挤压，可见乳白色浑浊细菌液溢出。观察各种症状类型，该病的症状特点主要是什么？如何区别于螟虫造成的枯心？ 2. 病原 属薄壁菌门欧文氏菌属细菌。菌体短杆状，单生，周生鞭毛4~8根，革兰氏染色反应阴性。菌落乳白色，后中心变褐色，圆形，边缘不整齐呈假根状。观察细菌形态和菌落特征，取病株观看细菌液的溢出现象。 （十七）稻黄萎病（Phytoplasma） 1. 症状 病株矮化，丛生，全株发黄，叶片狭而短小，薄而柔软，有的小分蘖叶片呈竹叶状。多数病株不能抽穗，少数抽穗后病穗黄化，不能结实。观察病株生长矮小的特点，触摸病叶，是否变柔软？ 2. 病原 属软壁菌门植物菌原体。菌体椭圆形或卵圆形，无细胞壁，有单位膜，大小80~800nm。传播媒介为黑尾叶蝉。比较菌体与原核生物中细菌有何不同？致病的症状又有何差异？ （十八）稻病毒病（Rice virus diseases） 1. 症状 我国水稻病毒病常见有以下几种：①稻条纹叶枯病（Rice stripe virus）：心叶有断续的黄绿色短条斑，条斑合并后叶片变成黄白色，高秆品种心叶细长柔软并弯曲成纸捻状枯死，称为假枯心，病株分蘖减少，矮化不明显；②稻普通矮缩病（Rice dwarf virus）病株矮化丛生，叶片变短僵硬，叶色浓绿，新叶和叶鞘上可见与叶脉平行的黄白色虚线状条点斑；③稻黑条矮缩病（Rice black-streaked dwarf virus）：植株矮化，分蘖增多，叶色浓绿僵硬，叶背、叶鞘和茎秆上出现初为蜡白色后变黑褐色的条状突起；④稻黄矮病（Rice yellow stunt virus）：病株矮缩，株形松散，病叶片平展或下垂，前期叶片有褪绿色条点状花叶，后期叶片枯黄卷缩。观察各种病毒病症状，哪些病害明显矮化？分蘖增多或减少？叶片有无花叶或其他特征？叶质和叶色有何变化？什么是条纹叶枯病的假枯心？ 2. 病原 条纹叶枯病由水稻条纹病毒引起，粒体环状或丝状，内含体“8”或“0”形，传毒媒介为灰飞虱；普通矮缩病由水稻矮缩病毒引起，粒体球状，花叶细胞内内含体近球形，传毒媒介主要是黑尾叶蝉；稻黑条矮缩病毒粒体球状，内含体圆球形，传毒媒介主要是灰飞虱；稻黄矮病毒粒体弹状，内含体圆形，个体较大，传毒媒介黑尾叶蝉。观看各种病毒粒体及内含体电镜照片，注意形状和大小差异。学会用病害症状、病毒粒体形态、内含体、传毒媒介诊断和区分几种水稻病毒病。 （十九）稻干尖线虫病（Aphelenchoides besseyi） 1. 症状 剑叶或上部叶片尖端1~8cm处部分细胞枯死，变黄褐色，略透明，捻转或扭曲，渐成灰白色，病健交界处有一褐色线纹。重点观察病叶尖端，是否扭曲？成何颜色？有无褐色线纹？ 2. 病原 属线虫门滑刃线虫属线虫。雌雄虫均为细长的蠕虫形，两端钝细，无色，半透明，雌成虫尾部有4个乳头状突起，静止时常扭曲或卷曲成盘状。雄成虫上、中部呈直线，尾部弯曲近90度，交合刺新月形，刺状，无交合伞。从水稻种壳分离线虫，制片观察雌雄线虫形态特征，重点是大小、形状、尾部特征。 （二十）稻赤枯病（生理性病害） 1. 症状 一般于分蘖期发生。初始叶片呈暗绿色，后形成不规则铁锈状斑点，由叶尖向基部扩展，最后呈赤褐色、枯死。受害植株矮小，分蘖少，老叶黄化，心叶窄挺。 2. 病原 属非侵染性病害，一般是因缺钾、磷或锌，或土壤环境不良（中毒）所致。 五、实习作业 1.绘稻瘟病菌、胡麻斑病菌、纹枯病菌、恶苗病菌、稻曲病菌、叶尖枯病菌、云形病菌、菌核秆腐病菌、叶鞘腐败病菌的病原图。 2.诊断水稻细菌性病害有那些方法？ 3.列表比较稻白叶枯病、细菌性条斑病、叶尖枯病、赤枯病、生理性叶片枯黄的区别。 ? 实验实习二 水稻病害田间病情调查 ? 一、目的要求 了解水稻病害发生的种类，掌握主要病害的调查方法，计算发病率和病情指数，为水稻病害调查、品种抗病性评价和病害预测预报等工作打下基础。 二、仪器用品 扩大镜、记录本、标本采集用具及其他用品和用具。 三、内容和方法 （一）水稻病害普查 1. 调查内容 对水稻病害的种类、分布特点、危害程度等进行调查。另外与发病程度的相关因子也要调查记载，如水稻品种、生育期、肥水管理水平、地势等。 2. 调查时间 水稻病害普查最少需在苗期、分蘖后期和穗期进行三次。 3. 调查方法 根据不同病害种类和分布特点，可采用五点取样或随机取样法，每点50株（穴、叶、穗等），统计各种病害发病率，记入表1-1。 表1-1 水稻病害普查表 调查地点 作物种类 调查日期 病 害 种 类 田 块 号 地 势 土 质 水 肥 条 件 品 种 种 子 来 源 播 期 生 育 期 发 病 率 % 为 害 程 度 备 注  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? 4. 统计方法 病株（叶、穗）数 发病率%= ×100 调查总株（叶、穗）数 ? ∑各级发病数×各级代表值 病情指数= ×100 调查总株（叶、穗）数×最高级别代表值 ? ? （二）稻瘟病调查 1. 主要任务 调查当地稻瘟病发生为害程度，不同品种病害发生差异，学会根据病情、品种、生育期和环境条件分析病害趋势，掌握稻瘟病的预测预报原理和方法。 2. 调查方法 分别选代表性田块5~10块，在秧田期、分蘖拔节期、抽穗后各查一次。每田查五点，每点50株（叶、穗），结果记入表1-2。 3. 严重度分级标准 （1）苗瘟 0级 无病； 1级 病斑5个以下； 2级 病斑6~20个； 3级 全株发病或部分枯死。 （2）叶瘟 0级 无病； 1级 病斑少而小（病斑5个以下，长度小于0.5cm）； 2级 病斑小而多（6个以上）或大（长度0.5cm以上）而少； 3级 病斑大而多； 4级 全株枯死。 （3）穗瘟 0级 无病； 1级 个别枝梗发病（每穗损失在5%以下）； 2级 三分之一枝梗发病（每穗损失20%左右）； 3级 穗颈或主轴发病，谷粒半饱（每穗损失50%左右）； 4级 穗颈发病，瘪谷多（每穗损失70%左右）； 5级 穗颈发病成白穗（每穗损失90%左右）。 4. 统计方法 发病率、病情指数同上。 稻瘟病流行预测指标： 轻病年：发病面积在10%以下，病田加权平均损失率1%以下； 中度流行年：发病面积15%左右，损失率5%左右； 偏重流行年：发病面积20%以上，损失率大于10%。 ? ? ? ? 表1-2 稻瘟病调查记载表 调查地点 调查时间 地块代号 品种 生育期 各级病株数 总株数 发病率% 病情指数 备注       0级 1级 2级 3级 4级 5级      ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?   （三）稻纹枯病调查 1. 主要任务 调查当地稻纹枯病为害程度，明确栽培管理水平和纹枯病的关系。 2. 调查方法 选不同类型田5~10块，采用双行直线取样法，每田取10~20个点，每点查5穴，调查病株数、病斑高度，结果记入表1-3。 3.???? 病情分级标准 根据病斑高度分级标准： 0级 不发病； 1级 一穴中少数植株发病或多数病斑的高度在稻株的1/4以下； 2级 多数病株病斑在1/4~1/2之间； 3级 多数病株病斑在1/2~3/4之间； 4级 多数病株病斑在3/4以上； 5级 多数病株发病枯死。 表1-3 稻纹枯病调查记载表 ? 调查地点 调查日期 品种  基本情况 调查总株数 病株严重度 发病率% 病情指数      移栽期 肥料水平 生育期 搁田程度               0级 1级 2级 3级 4级 5级     ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?   4. 统计方法 发病率、病情指数同上。 病害流行程度按病情指数划分： 极轻：5以下； 轻：5.1~15； 中等：15.1~30； 偏重：30.1~50； 大发生：50以上（流行程度以自然发病田病情指数划分）。 （四）稻白叶枯病调查 1. 主要任务 调查稻白叶枯病分布和危害程度，明确品种间抗性差异以及田水管理与病害的关系。 2. 调查方法 挑选不同类型田5~10块，采用五点取样法，每点查100张叶片，将调查结果记载于表1-4。 3.???? 分级标准 0级 无病； 1级 病斑面积为叶面积的1/4以下（从顶叶往下三张叶片，下同）； 2级 病斑面积为叶面积的1/4~1/2； 3级 病斑面积为叶面积的1/2~3/4； 4级 病斑面积为叶面积得3/4以上。 4.???? 统计方法 统计方法见稻瘟病。 ? 表1-4 稻白叶枯病调查记载表 ? 调查地点 调查日期 基本情况 调查总数 病株严重度 发病率 % 病情指数     品种 生育期 田水管理 肥料水平              0级 1级 2级 3级 4级     ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? 四、实习作业 1. 列表记载当地水稻病害种类、分布及危害情况。 2. 根据调查结果，结合品种、生育期、气候条件，对照往年资料，分别预测稻瘟病、纹枯病、白叶枯病的发展趋势，提出当年及次年的病害管理方案。 3. 采集水稻各种病害的标本。 实验实习三 水稻病害防治试验 ? 一、目的要求 根据病菌传播规律，选用不同的防治方法。学会田间药剂试验设计和方法，比较不同药剂和处理方法的防病效果。 二、实验工具和材料 稻种500g、20%三环唑可湿性粉剂100g、25%咪鲜胺乳油2ml或10%二硫氰基甲烷乳油2ml、喷雾器、量筒、无菌土壤、盆钵（直径25cm左右）若干个、恶苗病菌培养物、显微镜、血球计数器、烧杯等。 三、实验方法 （一）稻瘟病药剂防治试验 1. 田块类型：感病品种（如盐粳2号）或高氮栽培田块1块，生育期为分蘖盛期或抽穗期； 2. 试验处理：试验药剂为20%三环唑可湿性粉剂，每公顷用量为1125~1500g，对水喷雾。设清水喷雾为对照； 3. 小区划分：每处理3个小区，每小区面积50m2左右； 4. 病情调查：每小区定5点，每点50叶（穗），用药前调查发病率和病情指数，用药后10d，再调查发病率和病情指数，结果记入表1-5。 5.???? 计算方法 ? 喷药后病指—喷药前病指 病指增长率% = ×100 喷药前病指 ? 对照区病指增长率—防治区病指增长率 防效% = ×100 对照区病指增长率 ? 表1 -5 稻瘟病药剂试验调查表 ? 处 理 小区 调*查时间 调查总数 各级病叶（穗）数 发病率 % 病情指数 病指增长率% 防治效果 % 备注      0级 1级 2级 3级 4级 5级       ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?    ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?    ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?    ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?    ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?    ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?     *记载用药前或用药后。 （二）稻恶苗病种子处理试验 1. 病种准备 收集病株稻种，或以恶苗病菌接种形成病种（稻种浸入孢子悬浮液中10min，晾干备用。孢子液浓度为106cfu/ml）。 2.???? 种子处理方法 （1）25%咪鲜胺乳油浸种 长江流域及以南地区2000~3000倍药液浸种1~2d，黄河流域及以北地区3000~4000倍药液浸种3~4d，后取出稻种催芽播种。设清水浸种为对照。 （2）10%二硫氰基甲烷（浸种灵）乳油浸种 以5000倍左右药液浸种2~3d，取出稻种催芽播种。该药剂处理可兼治稻干尖线虫病。设清水浸种为对照。 3. 播种与管理 将浸种催芽的各处理稻种播入装有无菌土的盆钵中，每处理5盆，每盆20株。盆钵内土壤湿润即可，不需积水。 4. 调查记载 出苗后开始记载，5d一次，记录各处理出苗数、病苗数，根据发病率计算防效。结果记入表1-6。 5. 计算方法 出苗数 出苗率% = ×100 播种粒数 ? 病苗数 病苗率% = ×100 调查总苗数 ? 对照病苗率—处理病苗率 防效% = ×100 对照病苗率 ? 表1-6 稻恶苗病种子处理效果调查记载表 处理 盆 钵 编 号 播 种 数 出 苗 数 出 苗 率 % 病 苗 数 发 病 率 % 防效 % 备注  ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ? ? ? ? ? ? ? ? ?   四、作业 1. 将试验结果写成实验报告，明确三环唑对稻瘟病、咪鲜胺或二硫氰基甲烷种子处理对稻恶苗病的防治效果和方法。 2. 有一种防治稻白叶枯病的新农药，请设计一个试验方案，找出最佳使用浓度。 ?