六 油料作物病害 油料作物主要包括油菜，芝麻、大豆、花生和向日葵等。其中油菜、芝麻在长江流域和黄淮流域各省广泛种植，大豆、花生、向日葵在北方在栽培较普遍。油菜菌核病、病毒病和霜霉病是油菜的重要病害；大豆胞囊线虫、疫霉根腐病、病毒病和霜霉病在大豆上危害较严重；芝麻茎点枯病、枯萎病和疫病是芝麻上的严重病害；茎腐病、叶斑病、网斑病、青枯病和根结线虫病在花生上危害较大；菌核病、锈病、霜霉病和列当等是向日葵上分布较广，危害较大的病害。 实验实习一 油料作物病害的识别与鉴定 一 目的要求 了解油料作物常见病害种类，掌握主要病害发生危害的症状特点和病原物显微形态特征，熟悉一般病害的症状和发生概况。从而为大田病害的正确诊断，田间调查和病害防治奠定基础。 二 实验用品 显微镜，载玻片，盖玻片，解剖刀，镊子，挑针，刀片，纱布，蒸馏水滴瓶，幻灯机，投影仪及相关电化教学设备等。 三 实验材料 油菜主要病害（油菜菌核病、霜霉病、白锈病和病毒病等）；花生主要病害（花生黑斑病、褐斑病、网斑病、青枯病、锈病和根结线虫病等）；大豆主要病害（大豆胞囊线虫病、疫霉根腐病、花叶病、霜霉病、菟丝子等）；芝麻主要病害（芝麻茎点枯病、枯萎病、叶斑病、疫病等）以及向日葵主要病害（菌核病、锈病、霜霉病和列当等）的盒装标本、新鲜材料、挂图、病原物玻片以及电化教学等相关影像资料。 四 观察内容和方法 (一)油菜菌核病（Sclerotinia sclerotiorum） 1 症状 本病可危害油菜植株地上部的各个部位，其中以茎秆发病最重，损失最大。叶片病斑呈圆形或不规则形，病斑周缘有一层黄色晕圈；茎部病斑初为水渍状，逐渐扩展为长形或环茎大斑块，后期病部变白。病部提早枯死，病茎内有鼠粪状菌核。注意观察叶片病斑内外层色泽，病斑是否破裂？有无腐败现象？有无白色霉层？危害茎干最重的是上部还是下部？湿度大时是否腐败和长出白色霉层？菌核发育形成不同时期颜色变化如何？ 2 病原 属子囊菌亚门核盘属真菌。病菌菌核黑色，鼠粪状或球形、不规则形，成熟菌核外皮黑色，髓部粉色至米黄色，为疏丝组织组成。菌核萌发可产生1至数个柄，柄褐色，顶部膨大形成子囊盘。子囊盘黄褐色，子实层由子囊与侧丝栅状排列组成。子囊长圆形，顶部钝圆，内生8个子囊孢子，子囊孢子无色透明，椭圆形。先用肉眼观察菌核的形状、大小、然后用刀片切开菌核观察内外颜色是否一致？根据提供的实验材料，观察菌核萌发子囊盘的形状、大小、颜色，再经徒手切片纵切子囊盘，制片镜检，或直接观察子囊盘的永久玻片 注意观察显微镜下子囊和侧丝的排列情况，子囊排列是否整齐？每个子囊内有几个子囊孢子？子囊和子囊孢子呈何形状？子囊孢子有无颜色和隔膜？ （二）油菜霜霉病(Peronospora parastica) 1 症状 本病可危害油菜地上部的各部位，重病植株可导致死亡。叶片病斑正面为不规则形或多角形黄色斑块，背面有霜状霉层；花轴受害呈肿大弯曲的“龙头状”， 花瓣变绿呈小叶状。注意观察叶片病斑扩展是否受叶脉限制？重病植株是否较健株矮小？整株是否有霜状物？病有无干枯现象？ 2 病原 属鞭毛菌亚门霜霉菌属真菌。病组织产生白色霜状霉层为病菌的孢囊梗和孢子囊。孢囊梗无色，向顶端分支，每小梗顶端着生一个孢子囊，孢子囊单孢无色，长椭圆形。发病后期在病组织内产生卵孢子。一般在“龙头”皮层内最多。卵孢子球形，厚壁。用解剖刀或挑针从病叶背面挑取少许霜状霉制片镜检，观察孢囊梗及孢子囊形态特征。用解剖刀在病花轴山的“龙头”上刮取少量病组织制片镜检，观察卵孢子的形态特征。注意观察显微镜下孢囊梗是否有隔膜？基部和顶端粗细是否一致？分枝方式如何？孢子囊有无颜色和乳实？卵孢子形状怎样？是什么颜色？厚壁还是薄壁？外表是否光滑？ (三)油菜白锈病（Albugo condita） 1 症状 主要危害叶片和花轴。叶片上产生白色隆起小包斑，后期破裂散出白色粉末（病菌的孢子囊）。花轴受害后，也形成肿胀状“龙头”，与霜霉病症状相似，二者主 要区别于霜霉病的“龙头”表面光滑，并产生白色霜状霉层，而白锈病的“龙头”表面粗糙，有白色隆起胞斑。两病的“龙头”在组织内均产生卵孢子。 2 病原 属鞭毛菌亚门白锈菌属真菌。胞囊梗呈棍棒状，无色，顶端串生孢子囊，孢子囊近球形，无色，单胞。卵孢子球形，黄褐色，外壁很厚，表面有不规则的突起。用挑针挑取白色病斑内的粉末制片镜检，或直接镜检病菌永久玻片观察孢囊梗和孢子囊的形态特征。用解剖刀括取“龙头”少量肥厚病组织制片镜检，观察卵孢子形态特征。 注意观察显微镜下病菌孢子囊梗和孢子囊的颜色，形态；卵孢子的形态，颜色，壁的厚薄，以及外壁特征，并与霜霉病菌比较区别。 （四）油菜病毒病（TuMv ，CMV，TMV） 1 症状 油菜病毒病的症状在甘蓝型油菜和白菜型油菜上表现出明显区别。甘蓝型油菜上产生系统性黄斑和枯斑型症状，而白菜型油菜表现为花叶症状。黄斑型症状特点是初期病叶上出现分散绿色斑点，后逐渐变成明显的黄斑，病斑背面中心出现褐色细小枯点，后期病斑正面也出现枯点。枯斑型症状病叶上出现深褐色枯斑,叶柄，花梗，茎杆等部位可产生黑褐色油渍状坏死长条纹。花叶型症状主要表现为病叶呈黄绿相间花叶，皱缩，病株矮缩结荚少或不接荚，提早枯死。观察病株标本，注意比较观察黄斑型和枯斑型在叶片和茎秆上的区别要点，比较病株和健株株型差异，病株花梗是否短而弯曲？花的颜色是否加深？荚果是否僵弯？种子是否正常？ ２ 病原 油菜病毒病主要有芜菁花叶病毒 （ＴuＭＶ），黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）和烟草花叶病毒（ＴＭＶ）所致，不同油菜产区病毒主次不尽相同，通常以芜菁花叶病毒为主。ＴuMＶ粒体为线状，ＣＭＶ粒体为球状，ＴＭＶ粒体为棒状。根据试验提供的病毒电镜图片，或有关多媒体教学课件影像资料，观察三种病毒粒体形态。 （五）油菜萎缩不实病（生理性病害） １ 症状 病株最明显的症状是花而不实。根系发育不良，侧根很少，根表皮变褐，根颈膨大，有的内部变空，皮层龟裂，中部叶片由叶缘向内出现玫瑰红色，叶质增厚、易脆、倒卷。花序顶端花蕾褪绿变黄，萎缩枯干或脱落。有的抽苔迟缓，主花序和分枝花序极度紧缩矮化，形如试管刷。胚珠萎缩不能发育成正常种子，往往形成空角，即花而不实。有的形成只有几粒不规则种子的粗大“萝卜角果”。观察病株标本，注意子粒形成情况，与健株有何区别？ ２ 病原 生理性病害，主要由由缺硼引起。 （六）花生黑斑病（Cercospora personata） １ 症状 本病主要危害花生的叶片、叶柄、托叶，茎杆也可受害。病斑圆形或近圆形，黑褐色，病斑周缘有一层较窄的黄色晕圈，被面有许多黑色小点（子座）呈同心轮纹状排列，潮湿时病斑上产生一层灰褐色霉状物。 ２ 病原 属半知菌亚门尾孢属真菌。分生孢子梗丛生，粗短，上部膝状弯曲。分生孢子到棍棒状或圆筒形 ３~５个隔膜。用解剖刀括取病斑上的霉层制片镜检，或直接镜检病菌永久玻片。观察病菌分生孢子梗和分生孢子形态特征。 （七）花生褐斑病（Cercospora arachidicola） １ 症状 本病对花生的危害部位与黑斑病基本相同。两病的症状特点也有相似之处，二者的区别要点在于褐斑病在叶片上的病斑较黑斑病的大， 圆形或不规则形圆形，颜色较浅，呈黄褐色，病斑边缘黄色晕圈较黑斑病宽，潮湿时，病斑上也产生灰褐色霉层，但不产生轮状排列的小黑点。注意比较观察褐斑病和黑斑病症状异同点，对照区别病斑大小、颜色深浅、病斑周缘黄色晕圈带的宽窄，仔细观察黑斑病病斑的背面小黑点的排列状况。 ２ 病原 属半知菌亚门尾孢属真菌．分生孢子梗丛生或散生，直或略弯，上部渐细呈曲膝状有明显孢痕，分生孢子顶点，倒棍状或鞭状，５~７个隔膜。用解剖刀刮取病斑上的霉层制片镜检，或直接镜检永久玻片，观察病菌分生孢子梗和分生孢子形态特征。注意比较观察褐斑病菌和黑斑病菌显微形态主要差别，仔细观察两种病菌分生孢子梗和分生孢子有无隔膜，隔膜数多少，颜色的深浅，哪种病菌有明显子座？子座是什么形态？ （八）花生锈病（Puccinia arachidis） 1.症状 本病主要危害花生的叶片，严重时其它部位也可受害。叶片初生褪绿色斑点，逐渐变黄并隆起，最后变成褐色，表皮裂开，成为锈状粉斑（夏孢子堆）并散出锈状粉末（夏孢子），严重时病株枯死。 注意观察受害叶片出现的夏孢子堆是正面居多还是背面居多？出现夏孢子堆的相对应叶面颜色是否变黄？田间植株发病是从下部往上蔓延还是从上部向下扩展？ ２.病原 属担子菌亚门双孢锈菌属真菌。夏孢子椭圆形或近圆形，黄褐色，表面有细刺，中央有两个排列对称的发芽孔。用挑针挑取叶片上的夏孢子堆制片镜检，观察夏孢子的形态特征。注意观察夏孢子表面的细刺和发芽孔。 （九）花生茎腐病（Diplodia gossypina） 1.症状 本病可危害植株的地上和地下部分，花生幼芽出土前感病导致腐烂。子叶感病呈黑褐色干腐状，并可沿子叶柄侵染根颈部，形成黄褐色不规则病斑，渐显黑褐色腐烂，上部萎焉枯死。潮湿时，病部产生许多黑色小颗粒（分生孢子器）。 ２.病原 属半知菌亚门色二孢属真菌。分生孢子器突出寄主体外，黑色，有孔口。分生孢子梗短条状，无色，分生孢子初期无色，单胞，椭圆形，成熟时为暗褐色，双胞。 用挑针挑取病组织上的分生孢子器制片，镜检分生孢子器和分生孢子形态特征，注意观察病菌分生孢子器顶端乳突状突起孔口，分生孢子不同发育时期隔膜和颜色变化情况。 （十） 花生青枯病 （Ralstonia solanacearum） 1.症状 本病从花生苗期至收获整个生育期均可发病，以盛花，落叶期发病最盛。其主要症状特点是叶片急速凋谢，维管束变色，病株之根尖端变褐湿腐，根瘤呈墨绿色。潮湿条件下，用手挤压茎部切口处，常有混浊白色的细菌液渗出。观察病害新鲜标本，注意凋萎的病株叶片颜色是否为青绿色？剖视病株茎秆和根茎部维管束是否变褐？手挤是否有混浊白色的细菌液渗出？根瘤的颜色是否呈墨绿色？ ２.病原 属薄壁菌门青枯劳尔氏菌属细菌。菌体短杆状，两端钝圆，有一根至多根极生鞭毛。在培养茎上，菌落乳白色，光滑稍隆起。根据提供的实验材料，观察细菌在培养菌上的菌落特征，涂片观察或直接观察病菌封片，注意病菌菌体形态和革兰氏染色反应。 （十一）花生根结线虫病（Meloidogyne arenaria ；M. hapla） 1.症状 本病可危害花生植株的地上和地下部分。病株的地上部生长缓慢，叶黄且脱落，花少，而开放迟。病株地下根间形成不规则虫瘿。虫瘿上可形成乱丝状“须根团”，成熟的果壳上形成较大的 痂状虫瘿。注意观察病株根间的虫瘿的特征，虫瘿表面是否粗糙？剖视内部是否有乳白色砂粒状的雌虫？并比较虫瘿与根瘤的区别？ ２ 病原 属线形动物门根结线虫属线虫。国内的报道病原线虫有花生根结线虫和北方根结线虫两个种。白色一龄线虫常呈“８”字形卷曲在卵壳内，二龄幼虫头部较钝，尾尖翘，吻针呈 “大头针状”。雌成虫早期呈长颈烧瓶状，成熟时呈鸭梨形。用挑针挑取根瘤被白色砂粒状制片镜检，观察雌虫形态特征。或直接检验永久玻片。观察幼虫或雌虫形态。注意观察两种根结线虫形态上的区别要点。那种线虫阴门近尾尖处有点刺？那种线虫近侧线处有不规则的横纹？ （十二）芝麻茎点枯病(Macrophomina phaseolina) １ 症状 该病自苗期到成株期均可危害，以开花结果后期发生较重。病株根部变褐腐烂茎部产生黑褐色长条斑，中间呈银灰色，有光泽，密生小黑点，皮层下及髓部产生大量的小菌核。病株常枯死，茎杆易折断。注意观察病斑发生部位、色泽、形状，病部是否产生大量小黑点？皮层下是否有黑褐色小菌核？ 2病原 属半知菌亚门壳球孢属真菌。病部的小黑点是病菌的分生孢子器，着生在寄主表皮的角质层下，球形或近球形，黑褐色，以孔口突破表皮而外露。分生孢子长椭圆形或圆筒形，无色，单胞。菌核小，球形或不规则形，黑褐色。观察病菌玻片，注意病原菌分生孢子器及分生孢子特点。 （十三）芝麻枯萎病（Fusarium oxysporum. f.sp. sesami） 1 症状 多在成株期发病，病株叶片自下而上逐渐变黄萎蔫，最后整株枯死，有时仅半边枯死。病株根部、茎基部变褐腐烂，在茎秆上产生长条形褐色病斑。潮湿时，在枯死病部产生粉红色粘质霉层。剖茎检查，可见维管束变为红褐色至褐色。仔细观察病株发病部位，是否为系统侵染？病斑特点如何，有无霉层产生，有何特征？维管束是否变色？ 2 病原 属半知菌亚门镰孢属真菌。病部的粉红色霉层主要是病菌的分生孢子，大型分生孢子镰刀形，稍弯，无色透明，顶端细胞圆锥形，足胞明显，一般2～5个分隔，多数有3个分隔。小型分生孢子椭圆形或卵圆形，无色透明，多数单细胞。厚垣孢子球形或近球形，淡褐色，顶生或间生。观察大、小分生孢子形状、颜色、分隔情况，有无厚垣孢子及其特点。 （十四）芝麻褐斑病(Cercospora sesami) 1．症状 主要危害芝麻叶片，病斑近圆形或多角形，中央灰白色，边缘暗褐色，病斑背部有灰色霉层，严重时叶片枯死脱落。观察病斑形状及色泽，背部有无霉层及其特点。 2．病原 属半知菌亚门尾孢属真菌。分生孢子梗丛生，暗褐色，直立不分枝。分生孢子尾鞭状，无色，直或稍弯，有多个隔膜。镜检病菌玻片，观察分生孢子梗和分生孢子的形状、颜色、分隔情况等特征。 （十五）芝麻叶枯病(Corynespora sesamum) 1．症状 主要危害中后期芝麻叶片，病斑近圆形或多角形，黑褐色，潮湿时病斑上生有灰黑色霉层，严重时叶片干枯脱落。观察病斑形状及色泽，有无霉层及其特点。 2．病原 属半知菌亚门棒孢属真菌。分生孢子梗丛生，暗褐色，直立。分生孢子棍棒状，一端较粗而另一端较细，暗褐色，稍弯曲，有多个隔膜。镜检病菌玻片，重点观察分生孢子的形状、颜色、分隔情况等特征。 （十六）芝麻疫病(Phytophthora nicotinane var. sesami ) 1．症状 为害芝麻茎、叶和蒴果。叶上病斑初呈水渍状褐色较大病斑，后呈黑褐色湿腐状，略有轮纹，边缘常生白色霉层。茎基部感病后多形成绕茎病斑，水浸状黑褐色，多有白色霉层，病部常缢缩并上下蔓延，严重时致使整株枯死。茎上部发病可蔓延至蒴果，并可造成顶枯。注意观察发病部位和病斑特点，病部是否产生霉层？特点如何？ 2．病原 属鞭毛菌亚门疫霉属真菌。孢囊梗多从叶背部生出，无色。孢子囊近无色，近圆形，顶端有乳突。用挑针自保湿培养的病叶上挑取少量霉层制片镜检。注意观察孢子囊的形状、大小、有无乳状突起等特点。 （十七）芝麻角斑病(Pseudomonas syiringae pv. sesami) 1．症状 主要为害芝麻叶片，严重时亦可危害叶柄、茎杆和蒴果。叶上病斑黑褐色,多角形，周围常有黄色晕圈，干燥时病斑常穿孔，后期病叶干枯脱落。有时叶脉、叶柄和茎杆上可形成黑褐色长条状病斑。注意观察发病部位和病斑特点。比较与褐斑病和叶枯病的区别。 2．病原 属假单胞杆菌属细菌。菌体杆状，G-，极生2-5根鞭毛。用油镜观察病菌玻片，注意病菌形状，革兰氏染色反应，鞭毛有无及其着生部位。 （十八）芝麻花叶病(Sesame Mosaic Virus ，SMV) 1．症状 芝麻整株系统感病，病株矮化，茎顶扭曲，叶片呈花叶状，小而畸形。病株结蒴少或不结蒴，种子秕瘦。观察病株标本或有关教学材料，注意病株与健株有何差异？ ２.病原 属病毒。 （十九）大豆疫霉根腐病（Phytophthora sojae） 1．症状 子叶节期发病，茎基部腐烂，根变褐，软化，直达子叶节，植株萎缩或立枯。真叶期发病，茎上出现水渍状病斑，叶黄化、萎蔫，侧根几乎全部腐烂，主根变为深褐色，这种深褐色环绕主茎向上延伸，有时可达第十节。成株期发病，叶片褪绿，植株萎蔫，病茎的皮层及维管束组织均变褐。注意观察：①不同时期病株的症状特点。②后期病株的皮层及维管束是否变色。③不同时期病株根部呈何状态？ 2．病原 属鞭毛菌亚门疫霉属真菌。卵孢子球形，壁厚而光滑。孢囊梗分化不明显，孢子囊无色、卵形、单孢无乳突。用挑针在病组织材料上挑取少量黄色粉末状物，制片镜检。注意观察卵孢子的形态特征，卵孢子和藏卵器器壁结合的紧密程度；观察孢囊梗及孢子囊的形态有何特征？ （二十）大豆胞囊线虫病（Hetercdera glycines） 1．症状 受害的大豆植株明显矮化，叶片褪绿黄化、瘦弱，花丛生，结荚少而小，严重时整株枯死。地下部根系发育不良，根表附有大量初为白色后变为黄褐色的小颗粒，此即为线虫的胞囊（雌成虫）。注意观察病株地上部症状特点，根系及根瘤发育如何？病根上是否有胞囊？ 2．病原 属异皮科胞囊线虫属。雄虫线状，雌虫柠檬状，体壁膜质至革质，无色至褐色，腹部膨大成胞囊。胞囊阴门椎双半窗形，下桥和胞状突均发达。卵蚕茧形或长圆形，一侧微弯，每胞囊内平均出贮卵200多粒。在放大镜下观察根上胞囊的形 态及色泽，在显微镜下观察线虫的卵、雌雄虫、胞囊的形态特征，并区分不同龄期的幼虫。 （二十一）大豆霜霉病（Peronospora manshurica） 1．症状 主要危害叶片，开始为灰白色至淡黄色小斑点，后扩大成圆形或受叶脉的限制呈大小不一的不规则形病斑，灰褐色至暗褐色，边缘黄绿色。潮湿时叶片背面病斑长出灰色至紫灰色霉层，即病菌的孢囊梗和孢子囊。注意观察：①病斑发生的部位、色泽、形状；②叶片正反面的症状特点；③病征有何特点？ 2. 病原 属鞭毛菌亚门霜霉属真菌。孢囊梗自气孔伸出，为二叉状分枝3～4次，无色透明，单根或成簇，顶端分枝尖锐，向内弯曲呈钳状，无色，着生单个椭圆形或倒卵圆形孢子囊，有乳头状突起，无色，单孢。卵孢子近球形，黄褐色或淡褐色，壁厚，表面光滑或有乳头状突起。在病组织材料上刮取少量霉状物，制片镜检，观察孢囊梗的色泽、形状、分枝方式及其分枝顶端特点；孢子囊的形状、色泽、顶端是否有乳状突起？ （二十二）大豆炭疽病（Colletotrichum destructivum） 1．症状 自苗期到成熟期均可发病，主要危害茎和荚，亦可危害叶片和叶柄。病斑褐色，其上密生排列不规则形的黑色小点，即病菌的分生孢子盘，在病荚上呈轮纹状排列。苗期子叶发病，病斑黑褐色，边缘色淡，病斑扩大后常出现凹陷或开裂，病斑也可以从子叶扩展到幼茎，茎、叶柄上病斑不规则，褐色。叶片上病斑边缘呈深褐色，内部浅褐色。注意观察病斑发生的部位、色泽、是否具小黑点？小黑点是否呈轮纹状排列？病苗、病荚症状有何特点？ 2．病原 有性世代属子囊菌亚门小丛壳属真菌。子囊壳球形，常多个聚生在皮层的子座组织内，子囊长圆形至棍棒形，有侧丝。子囊孢子无色，单孢，微弯曲。无性世代属半知菌亚门炭疽菌属。分生孢子盘黑色，周围长有许多黑色或深褐色刚毛，分生孢子梗短，无色。分生孢子无色，单孢，镰刀形。在病组织材料上刮取几个黑色小点状物，或用徒手切片法制片镜检，观察：①分生孢子盘的色泽、大小及形状，是否有黑色的刚毛；②分生孢子的形状、色泽及分隔情况。 （二十三）大豆灰斑病（Cercospora sojina） 1. 症状 主要危害叶片，也可侵染子叶、茎、荚、和种子，在叶片上病斑最初为褪绿圆斑，后变为边缘褐色、中央灰色或灰褐色蛙眼状斑，直径1～5毫米，也可为椭圆形或不规则形斑，潮湿时叶背病斑中央部分密生灰色霉层，病重时病斑合并，叶片枯死，脱落。注意观察病斑发生的部位、色泽、形状及大小；叶片正反面的症状特点；病苗呈何状态？ 2. 病原 属半知菌亚门尾孢属真菌。分生孢子梗5～12个束生，淡褐色，不分枝，有膝状节，孢痕明显。分生孢子无色，倒棍棒状或圆柱状，基部钝圆，顶部尖细，有1～9个分隔。用挑针在病组织材料上挑取少量霉层，制片镜检，注意观察分生孢子梗的色泽、形状、分隔及孢子痕情况；分生孢子的形状、色泽及分隔多少？ （二十四）大豆紫斑病（Cercospora kikuchii） 1．症状 叶片上产生紫红色圆形的小斑，后由于扩展受叶脉的限制成多角形，湿度高时病斑两面密生灰色的霉状物。茎上病斑梭形，红褐色。荚上病斑圆形至不规则形。种子上的病斑为紫色斑块，常从种脐基部发展到其它部分，紫色病斑上常有裂纹。注意观察：①病株不同部位病斑的形状、色泽如何；②湿度大时，病斑的病征有何特点？③和其它叶斑类病害，如灰斑病、霜霉病在叶部的症状有何区别？ 2．病原 属半知菌亚门尾孢属真菌。分生孢子梗丛生，单根或有分枝，淡褐色至深褐色。分生孢子无色，鞭状，1～9个隔膜。在病部用挑针挑取少量霉状物，制片镜检，观察：①分生孢子梗的形状、色泽、分枝情况；②分生孢子的形状、色泽、分隔情况。③和Cercospora sojina有何区别？ （二十五）大豆菌核病（Sclerotinia sclerotioum） 1. 症状 主要危害植株的地上部分，以花期危害最重，产生苗枯、叶腐、茎腐、荚腐等症状，最后导致全株腐烂枯死。苗期发病，茎基部呈水渍状变褐，潮湿时病部有大量絮状菌丝，病部干缩，表皮呈撕裂状；茎秆发病，多在分枝处形成形成褐色水渍状病斑，病部有大量白色菌丝和黑色鼠粪状菌核，后期干燥时茎部皮层纵向开裂，维管束外露呈乱麻状。注意观察：①发病的部位及病斑的色泽变化；②病部是否有白色絮状的菌丝，上面夹杂的菌核的形状、色泽如何；③用刀割开病株茎部，观察髓部呈何状态？ 2. 病原 属子囊菌亚门核盘属真菌。菌丝集结成黑色菌核，菌核萌发产生子囊盘柄，顶部膨大成子囊盘。子囊盘浅褐色，内有平行排列的子囊。子囊棒状，无色，内有8个子囊孢子。子囊孢子无色，椭圆形，单孢，侧丝无色，丝状，杂生于子囊间。在病部用挑针挑取少量菌丝和菌核，制片镜检，观察①菌丝的形状、色泽、分枝情况；②菌核的形状、大小及色泽，菌核内外的结构；③在适宜的条件下促使菌核萌发，观察子囊盘的形态，子囊间是否有侧丝，子囊孢子的形状、色泽。 （二十六）大豆细菌性斑点病（Pseudomonas　syringae） 1．症状 叶片、叶柄、茎和豆荚均可受害，叶片受害产生多角形或不规则形的透明水渍状、黄色到淡褐色的斑点，大小3～4mm，病斑中间褐色，外围具一圈窄的褪绿晕环，严重时病斑愈合成枯死斑块，叶片脱落。注意观察病斑的形状、色泽，是否有菌脓，病斑有何特点？ 2．病原 属薄壁菌门假单胞菌属细菌。菌体短杆状，有荚膜，无芽孢，具有单根极生鞭毛。在肉汁胨琼脂平板上培养，观察菌落的形状、色泽、质地，革兰氏染色是阴性还是阳性？ （二十七）大豆荚枯病（Macrophoma mane） 1．症状 豆荚上产生暗褐色病斑，以后变成灰褐色，上面密生黑色小点，豆粒发病后，腐败收缩。基部病斑褐色，上密生黑点。注意观察病斑发生的部位，形状、色泽；病斑上是否有黑色小点？ 2．病原 属半知菌亚门大茎点菌属真菌。病斑上的小黑点即病菌的分生孢子器，分生孢子器散生或聚生，球形或扁球形，壁黑褐色。分生孢子长卵圆形，无色透明，单胞。用挑针在病斑处挑取黑色小点，制片镜检。观察分生孢子器的形状、色泽及大小；分生孢子的形状、色泽、分隔情况。 （二十八）大豆菟丝子（Cuscuta chinensis） 1．症状 大豆从幼苗期即可被害。菟丝子以丝状茎蔓缠绕大豆，并产生吸盘伸入寄主体内吸取养分，被害大豆矮小，结荚少，籽粒不饱满.重者病株上缠满黄色菟丝子,全株黄萎甚至枯死。注意观察病株上是否被丝状茎蔓缠绕，黄色菟丝子呈何状态？ 2．病原 病原为菟丝子，属旋花科菟丝子属。在我国危害大豆的菟丝子有2种：一种是中国菟丝子Cuscuta chinensis ，另一种是欧洲菟丝子C. anstralis，2种菟丝子形态特征相似，其区别是前者花冠长为花萼的2倍，可完全包被蒴果，后者花冠比蒴果短，仅能包住果实下部，蒴果不规则开裂。均无根，叶片退化成鳞片状，没有叶绿素，茎藤丝状，细呈黄色或橙黄色。花小，常十余个簇生成球状，花萼环状，分裂。花冠白色。雄花5枚，每一雄花下有一鳞片，花药卵形。雌蕊长1.5mm，花柱2枚，柱头头状。蒴果近球形，稍扁，全被花冠所包。果内有种子2～4枚，种子很小，近圆形，褐色，表面粗糙。注意观察菟丝子的形态特征，果实类型等。 （二十九）大豆花叶病毒病（Soybean mosaic virus） 1．症状 因品种而异，主要症状类型有①轻花叶型。有轻微的淡黄色斑驳。②重花叶型。病叶呈黄绿相间的斑驳，严重皱缩，叶肉突起，叶缘向后卷曲，叶脉坏死，植株矮化，暗绿色。③皱缩花叶型。叶片皱缩歪曲，叶脉泡状突起，植株矮化，结荚少。④黄斑型。轻花叶和皱缩花叶混生。⑤芽枯型。病株顶芽萎缩卷曲，呈黑褐色枯死，豆荚上生圆形或不规则形的褐色斑快。⑥褐斑型。病株种子常产生斑驳，为放射状或云纹状。注意观察不同类型症状特点？病株呈何状态？ 2．病原 属马铃薯Ｙ病毒属的大豆花叶病毒。病毒粒体线条形。观察电子显微镜下病毒粒体的形状。 （三十）向日葵锈病（Puccinia helianthi） 1．症状 主要危害叶片，叶片上有圆形或近圆形、黄褐色、小疱状的夏孢子堆，破裂后散出褐色粉末，生长后期，在夏孢子堆周围大量黑色的小疱状的冬孢子堆，裂后散出铁锈色粉末。生长后期，叶片两面长出黄色圆形的性孢子器，叶背长出鲜黄色的锈孢子器。注意观察病斑的形状、色泽；孢子堆的排列方式、色泽，散生还是聚生？ 2. 病原 属担子菌亚门柄锈菌属真菌。夏孢子球形、椭圆形或卵形，淡褐色，单孢，表面有细刺，冬孢子双孢，椭球形或长圆形,顶端钝圆，基部圆形，分隔处稍有缢缩，有柄，表面光滑，栗褐色。在病斑上，刮取少量锈状物，制片镜检。观察夏孢子、冬孢子的形状、大小、色泽等。 （三十一）向日葵菌核病（Sclerotinia sclerotiorum） 1. 症状 苗期至成熟期均可发病，茎基部有水浸状淡褐色斑点，后呈白色，组织湿腐，重者猝到，病部有白色菌丝和黑色菌核。在适宜的条件下，病斑扩展迅速，可蔓延环绕全茎，后期组织腐烂，皮层纵裂，维管束外露如麻丝，茎内中空，内有黑色菌核，重者全株枯死。花盘受害，腐烂，上密生菌丝和黑色菌核。注意观察不同部位的症状特点，茎基部是否有缢缩？病部是否有菌丝和菌核?剖开病株茎杆,呈何状态？ 2.病原 属子囊菌亚门核盘菌属真菌。菌核黑色，大小不一。菌核萌发形成的子囊盘肉褐色，碟状，2～6mm。子囊棍棒状，无色，具侧丝。子囊孢子单胞、无色、椭圆形。观察菌核的形状、色泽及大小。用放大镜观察子囊盘的形状及色泽。镜检子囊及子囊孢子的形态。 （三十二）向日葵黑斑病(Alternaria helianthi) 1.症状 向日葵各部位均可受害。叶部病斑长圆形或近圆形,边缘褐色，中央灰白色，褐色部分有同心轮纹,上生有灰褐色霉层。叶柄、茎上病斑常呈梭形，稍凹陷。注意观察病斑发生的部位、色泽、形状、霉层以及有无轮纹等特征。 2.病原 属半知菌亚门链格孢属真菌。分生孢子梗单生或2～4根束生，淡榄褐色。分生孢子褐色，圆柱形或长椭圆形，有横隔膜4～12个，无纵隔膜或有1～2个纵隔。用挑针在病组织上挑取少量霉层，制片镜检，观察分生孢子梗的色泽及形态，分生孢子的形状、色泽、分隔以及喙胞长短，是否有纵隔？脐点是否明显？ （三十三）向日葵褐斑病（Septoria helianthi） 1. 症状 主要侵害叶片，病斑初期为黄色小圆点，扩大后呈圆形、多角性或不规则性褐斑，周围有黄色晕圈，病斑上密生小黑点。严重时病斑互相愈合，引起叶片枯死。叶柄和茎上产生褐色狭条斑。病害从下部叶片开始发病逐渐向上部叶片扩展。注意观察病斑发生的部位、形状、色泽，病株呈何状态？ 2. 病原 属半知菌亚门壳针孢属真菌。在病斑上看到的小黑点即病菌的分生孢子器，分生孢子器球形、近球形，暗褐色。分生孢子鞭形，微弯，无色透明，2～3个隔膜。用刀片刮取1或2个分生孢子器，或徒手切片，镜检，观察分生孢子器的形状和色泽，是否有孔口？另外，用手轻压盖玻片将分生孢子器压破，观察分生孢子的形状、色泽、分隔情况。 （三十四）向日葵霜霉病 (Plasmopara halstedii) 1. 症状 为系统性侵染病害。主要危害叶片，受叶脉的限制呈大小不一的不规则病斑，灰褐色至暗褐色，边缘黄绿色。潮湿时叶片背面平铺一层灰色的霜霉状物，即病菌的孢囊梗和孢子囊。注意观察病斑霉层、色泽、形状，叶片的黄化程度，病株呈何状态？ 2. 病原 属于鞭毛菌亚门轴霜霉属真菌。孢囊梗自气孔伸出，无色，单生或从生，上端单轴状近直角分枝，4～6次，顶端略膨大，具有2～3个小枝，着生单个椭圆形、卵球或近球形孢子囊，无色，单孢。卵孢子球形，黄褐色，外壁由皱褶或网状突起。在病组织材料上刮取少量霉状物，制片镜检，观察孢囊梗的色泽、形状、分枝方式，孢子囊的形状、色泽、顶端突起等特征。 （三十五）向日葵列当（Orobanche cernua） 1．症状 向日葵被列当寄生后，植株矮小，叶片变黄，花盘直径变小，籽实秕粒数增加。注意观察病株呈何状态？ 2．病原 属被子植物门列当属寄生植物。1年生，草本，茎单生，直立，肉质，有纵棱，淡黄色紫褐色；地下部分为黄白色，高度变化较大，一般在20cm左右。叶片退化成鳞片状，无柄，无叶绿素，螺旋状排列在茎秆上，花序排列紧密为穗状；每株有花20～70朵；两性花，蓝紫色，花冠呈屈膝状；花萼5裂；苞叶狭长披针状，雄蕊4枚，2长2短；雄蕊1枚。蒴果常2纵裂，内含大量深褐色极小的种子，种子形状为不规则形有纵横网纹。注意观察列当的形态特征，花序排列形状，雌雄蕊有何区别，色泽如何？ 五、作业 1 根据实验那提供的油料作物病害材料，列表简述相关病害症状要点。 2 根据实验观察材料，绘制油料作物病害主要病原菌显微形态图。 实验实习二 油料作物病害田间病情调查 一、目的要求 了解油料作物田间病害发生种类，危害特点。掌握主要病害的调查方法，为开展病害研究和大田防治奠定基础。 二、调查用品 手持扩大镜、记载板、标本采集用具等。 三、内容和方法 油菜病害调查 1. 油菜病害普查 （1）调查内容 对油菜田间病害发生种类、分布危害特点及发病条件等基本情况进行普查。 （2）调查时间 在油菜抽薹期、开花期和结荚期进行调查，根据田间病情和具体情况，确定调查时间和次数。 （3）调查方法 结合当地油菜田块的实际状况和田间病害分布特点，可采用五点取样、随机取样、对角线取样、“之”字型取样等方法，每点取20—50株，分别记载统计各病害的发病率，并对油菜菌核病严重度分级，计算病情指数。同时，将调查田块的相关情况记入调查表6-1。 表6-1 油菜病害田间调查记载表 调查地点 调查时间 调查人 项目 病害 种类 田 块 号 品 种 播 期 前 茬 肥 料 生 育 期 病 情  病指  备 注       底 肥 追 肥  调查株数 病株数 发病率 %                   2. 油菜菌核病病情调查 （1）调查目的 ①了解病害发生情况，为病害防治提供参考； ②了解不同品种对菌核病抗病性强弱。 （2）调查时间 在油菜开花期和末花期分别进行调查，前者主要用于指导药剂防治工作，后者则多用于品种抗性调查和防治效果调查。 （3）调查方法 结合油菜田块的实际状况和田间病害分布特点，可采用对角线五点取样或棋盘式10点取样等方法，每点取10—20株。分别记载病害的发病率，并进行病情严重度分级，计算病情指数。病情严重度分级标准如下： 0级 无病； 1级 主茎无病，全株1/3以下分枝数发病，或主茎病斑≤3cm，单株产量损失≤30%； 2级 主茎无病，全株1/3—2/3分枝数发病，或主茎病斑>3cm，单株产量损失 30%—60%； 3级 主茎无病，全株2/3以上分枝数发病，或主茎中下部病斑>3cm，单株产量损失60%—90%； 4级 全株严重发病或提早枯死，单株产量损失>90%。 将调查田块的相关情况记入调查表6-2。 表6-2 油菜菌核病田间调查记载表 调查地点： 调查时间 ： 调查人： 处理或 品种 重复 调查株数 各级病株数 病株率% 病情指数 备注     0 1 2 3 4                  花生病害调查 1. 花生病害普查 （1）调查内容：主要调查花生叶部和茎基部病害发生种类，危害特点。重点对花生叶部病害进行普查，并对黑斑病和褐斑病严重度进行分级，计算病情指数。 （2）调查时间：根据当地气候条件和田间病情，可在花生苗期、生长中期和后期进行调查。具体调查时间和次数依不同情况而定。 （3）调查方法：通常采用五点取样或随机取样等方法，每点查40—50株或100片叶(视茎基部或叶部病害而定)，分别记载统计各病害的发病率，对主要叶部病害严重度进行分级，计算病情指数，并将调查田块的相关情况记入调查表6-3。 表6-3 花生病害田间调查记载表 调查地点 调查时间 调查人 项目 病 害种类 田 块 号 品 种 播 期 耕作 制度 土 质 肥料 生 育 期  病 情  病 指  备 注        底肥 追肥  调查叶数 病叶数 发病率 %                    2. 花生叶斑病（黑斑病和褐斑病）病情调查 （1）调查目的：①了解叶斑病病害发生情况，为病害防治提供参考； ②了解不同品种抗病性强弱。 （2）调查时间：在花生盛花期和收获前期分别进行一次调查，前者主要用于指导药剂防治工作，后者则多用于品种抗性调查和防治效果调查。 （3）调查方法： 结合田块的实际状况和田间病害分布特点，每小区可采用对角线五点取样等方法，每点取20株。分别记载每株病情严重度，计算发病率和病情指数。病情严重度分级标准如下： 0级 无病 1级 叶片上有少量小圆斑，病斑直径≤1mm； 2级 叶片上有典型圆形或近圆形病斑，病斑直径1.1—5mm，中间坏死，但病斑相互不愈合； 3级 叶片上有较多圆形或不规则形斑，直径3.1—5mm，部分病斑相互愈合，伴有枯死； 4级 叶片上病斑大而多，病斑直径>5mm，且相互愈合，病叶枯死。 将调查田块的相关情况记入调查表6-4。 表6-4 花生叶斑病田间病情调查记载表 调查地点： 调查时间： 调查人： 处理或 品种 重复 调查株数 各级病株数 病株率% 病情指数 备注     0 1 2 3 4                  大豆病害调查 1. 大豆病害普查 （1）调查内容：根据当地实际情况，调查大豆上一般常见病害和重要病害的发生种类、危害特点、分布、发病条件等基本情况。对病毒病发生严重的地区或田块，还应系统调查田间蚜虫的消长规律，从而为病害防治提供依据。 （2）调查时间：结合生产实习，可在大豆苗期，生长中期和收获前调查三次。 （3）调查方法：采取五点取样或随机取样，每点查50株（叶），分别统计记载各病害的发病率，病毒病或大豆根结线虫发生较重的田块，对病害严重度进行分级。并将调查田块的相关情况记入调查表6-5。 2. 大豆胞囊线虫病病情调查 （1）调查目的：①了解胞囊线虫病发生情况，为病害防治提供参考； ②了解不同品种抗病性强弱。 （2）调查时间：在大豆开花期（播后1个月）进行调查。 （3）调查方法： 结合田块的实际状况和田间病害分布特点，每小区可采用对角线 表6-5 大豆病害田间调查记载表 调查地点： 调查时间 ： 调查人： 项目 病 害种类 田 块 号 品 种 播 期 耕作 制度 土 质 肥 水 条 件 生 育 期  病 情  病 指  备 注          调查株数 病株数 发病率 %                   五点取样等方法，每点取１0株。根据根部胞囊线虫数量进行病情严重度分级，最后计算发病率和病情指数。病情严重度分级标准如下： 0级 无病； 1级 株高基本正常，但叶片发黄，看似缺肥； 2级 植株较正常株略矮，节间短，叶片发黄，花芽少，根系须根增多，须根上有白色颗粒（胞囊）； 3级 植株明显矮小，叶片发黄早落，花芽枯萎，根系成发状须根，须根上有许多白色小颗粒，结荚少； 4级 植株不能结荚，提早枯死。 将调查田块的相关情况记入调查表6-６。 表6-６ 大豆胞囊线虫病田间病情调查记载表 调查地点： 调查时间： 调查人： 处理或 品种 重复 调查株数 各级病株数 病株率% 病情指数 备注     0 1 2 3 4                  　　（四）芝麻和向日葵病害调查 　　　参照油菜、花生和大豆病害调查方法进行。　 　　 附：油料作物主要病害严重度分级标准 1. 油菜菌核病 0级 无病； 1级 主茎无病，全株1/3以下分枝数发病，或茎病斑≤3cm； 2级 主茎无病，全株1/3—2/3分枝数发病，或主茎病斑>3cm； 3级 主茎无病，全株2/3以上分枝数发病，或主茎中下部病斑>3cm； 4级 全株严重发病或提早枯死。 2. 花生叶斑病（黑斑病、褐斑病） （1）根据单个叶片病斑来分级： 0级 无病 1级 叶片上有少量小圆斑，病斑直径≤1mm； 2级 叶片上有典型圆形或近圆形病斑，病斑直径1.1—5mm，中间坏死，但病斑相互不愈合； 3级 叶片上有较多圆形或不规则形斑，直径3.1—5mm，部分病斑相互愈合，伴有枯死； 4级 叶片上病斑大而多，病斑直径>5mm，且相互愈合，病叶枯死。 （2）根据整个植株病情进行分级： 0级：整株无病； 1级：植株下部叶片上有很少且较小的病斑斑，症状不明显； 2级：植株下部和中部叶片上有病斑，症状明显； 3级：植株下部和中部叶片上有较多病斑，上部叶片有少量病斑，下部叶片少量发黄脱落； 4级：植株上部叶片上有较多病斑，下部叶片大量脱落； 5级：植株叶片上布满病斑，脱落率达50%以上。 （3）抗病性分级标准（感病对照应达到4级） 免疫：病情级别为0级； 高抗：病情级别为1级； 中病：病情级别为2~3级； 感病：病情级别为4级； 高感：病情级别为5级。 3. 大豆胞囊线虫病 0级：无病； 1级：株高基本正常，但叶片发黄，看似缺肥； 2级：植株较正常株略矮，节间短，叶片发黄，花芽少，根系须根增多，须根上有白色颗粒（胞囊）； 3级：植株明显矮小，叶片发黄早落，花芽枯萎，根系成发状须根，须根上有许多白色小颗粒，结荚少； 4级：植株不能结荚，提早枯死。 4. 大豆霜霉病 0级：全叶无病； 1级：病斑占叶片面积的25%以下； 2级：病斑占叶片面积的26~50%； 3级：病斑占叶片面积的51~75%； 4级：病斑占叶片面积的76%以上。 5. 大豆花叶病 0级（免疫）：叶片上无症状； 1级（高抗）：叶片轻度皱缩，明脉，植株株型正常； 2级（中抗）：叶片明显皱缩，植株株型基本正常或矮化不明显； 3级（感病）：叶片严重皱缩，株型矮化明显； 4级（高感）：叶片严重皱缩，株型严重矮化，顶枯甚至死亡。 6. 芝麻茎点枯病 0级：无病； 1级：根部或1/3以下茎杆长度或分枝数发病，植株不矮化，全株受害蒴果数1/4 以下； 2级：1/3—2/3以下茎杆长度或分枝数发病，植株轻度矮化，全株受害蒴果数 1/4—1/2； 3级：2/3以上茎杆长度或分枝数发病，植株显著矮化，全株受害蒴果数1/2—3/4； 4级：整个茎杆或所有分枝数发病，植株严重矮化，接近枯死，全株受害蒴果数3/4 以上。 （7）向日葵褐斑病 0级（免疫）：叶片无病； 1级（高抗）：病斑占叶片面积10%以下； 2级（中抗）：病斑占叶片面积11~30%； 3级（感病）：病斑占叶片面积31~50%； 4级（高感）：病斑占叶片面积51%以上。 五、作业： 根据调查油料作物对象，写出调查报告。 2. 分析某一重要病害发生危害特点，制定合理的综防措施。 实验实习三 油料作物病害田间药剂试验 一、目的要求 根据当地的作物种类和病害发生情况，结合教学实习，以油菜菌核病或花生叶斑病（黑斑，褐斑）为代表，分别选用某种新型杀菌剂，确证田间防病效果。通过试验，使学员掌握田间药效试验的基本方法，杀菌剂的筛选及防病效果的评价，为病害的化学防治提供理论依据。 二、试验用品 天平、烧杯、量筒、玻棒、背负式喷雾器、杀菌剂（根据具体情况，分别选用一种针对花生叶斑病或油菜菌核病的新型杀菌剂） 三、试验方法 1. 供试作物：油菜或花生 试验田块：选择当地油菜菌核病或花生叶斑病常发病田块。 3. 试验药剂：根据具体情况和试验组数，分别选择当地推广的药剂和新药剂数种， 根据试验提供的杀菌剂，分别配制三种不同的浓度，以期确证防病的最适浓度。并设清水和常规药剂对照。 4. 小区设计：根据田间的具体情况，可采用随机区组排列设置试验小区，小区面积20~30 m2，三次重复。 5. 喷药时期和方法：油菜菌核病可在油菜始花期喷药，花生叶斑病应掌握在花生田间发病初期喷药。采用背负式喷雾器喷施，油菜菌核病用药量按75 kg/ 667 m2 药液量喷雾，花生叶斑病按70 kg /667m2 药液量喷雾。 四、调查记载 1.调查时期：喷药前要调查病情基数，施药后10d进行防治效果调查，必要时可再间隔数日调查1~2次防效。 2. 调查方法：采取随机取样或五点取样，每处理各小区查50株，分别进行病情严重度分级。记载调查总株数和各级病株数。将调查结果填入表6-7内。 表6-7 不同处理对油菜菌核病（花生叶斑病）防治效果调查表 处理 重复 调查株数 各级病株数 病株率% 病情指数 平均病情指数 病指增长率% 防治效果% 位次     0 1 2 3 4 5                                                                                                                                                                                                                                                                                                         3. 统计分析：对各小区病情调查数据进行统计。计算出发病率、病情指数和病情增长率，与对照病情比较，计算和评价各供试药剂的防病效果、最适浓度和残效期。 五、作业 1. 写出规范的药剂试验报告。 2. 简要说明药剂实验中应注意的有关事项。