课 时 授 课 计 划 审签 编号23 授课时间及单元     授课专业及班级      组织教学:考勤、填写教学日志 1  基本课题:实验七 细菌各论试验(二)  教学目标:1.能初步辨认并画出示教细菌的镜下形态。  2.能初步进行痰涂片抗酸染色操作,并记录检查结果。  (重点、难点)  3.了解厌氧培养法。    教学内容 教学设计 时间(分)   复习旧课: 9  什么叫抗酸菌?  实验七 细菌各论试验(二)  一、实验目的  二、实验内容  (一)分枝杆菌、厌氧性细 1.同学边画图边观察。 30  菌、其他细菌形态及培养物观察 2.仔细巡视,解答疑难。   (二)抗酸染色法 1.教师示教,学生操作。30  2.注意相关知识的提问。  3.注意强调无菌操作。  (三)厌氧培养法 示教。 20                      小结 :总结实验中出现的问题。 9      布置作业与预习 1   作业:实验报告。   预习:第十三章 第一节  课后分析           实验七 细菌各论试验(二) 一、实验目的 1. 画出分枝杆菌、霍乱弧菌以及白喉棒状杆菌、破伤风芽孢梭菌、炭疽杆菌等其他细菌。 2. 初步掌握结核痰标本直接涂片抗酸染色检查法。 3. 了解厌氧菌培养的常用方法。 二、实验内容 (一)分枝杆菌、厌氧性细菌、其他细菌形态及培养物观察。 1. 霍乱弧菌革兰氏染色标本。 2. 破伤风芽孢梭菌、产气荚膜芽孢梭菌芽孢特殊染色标本片以及在庖肉培养基上的生长现象。 3. 炭疽杆菌芽孢染色标本片。 4. 白喉棒状杆菌异染颗粒染色标本片。 5. 结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌抗酸染色标本片以及结核分枝杆菌在罗氏培养基上的生长现象。 6. 布鲁氏菌、百日咳鲍特氏菌革兰氏染色标本。 7. 鼠疫耶尔森氏菌美兰染色标本片。 (二)抗酸染色法 1. 制片 (1)涂片:用接种环挑取痰标本中的脓性或干酪样部分,直接涂于载玻片上。痰膜大小为2.0cm×2.5cm。 (2)干燥:自然干燥 (3)微火固定 2. 染色 (1)初染:滴加石炭酸复红染液,以盖满涂膜为宜。手持染色夹子,将涂片置于酒精灯火焰上方,用弱火加热至出现蒸气,随时补充染液以防干涸,持续5分钟。载玻片冷却后去掉染色夹,用细流水冲洗,甩干。 (2)脱色:滴加3%盐酸酒精3-4滴于标本上,用手轻轻摇动载玻片,直至涂片无红色染液脱下为止,用细流水冲洗,甩干。 (3)复染:滴加吕氏美兰染液2-3滴于标本上,染色0.5-1分钟,用细流水冲洗,甩干。 3. 将染色过的标本玻片置于两层滤纸中间,轻压滤纸、吸去玻片上水分。将标本玻片置于油镜下观察。 (三)厌氧培养法 1. 肉渣培养基法 2. 焦性没食子酸法 3. 厌氧培养箱法:目前培养厌氧菌最好的方法。