课 时 授 课 计 划 审签 编号28 授课时间及单元     授课专业及班级      组织教学：考勤、填写教学日志 1  基本课题：实验八 其他微生物及病毒试验  教学目标： 1．能初步辨认并画出示教病毒及其它微生物的镜下形态。  2．简述血凝及血凝凝集试验原理、方法及结果分析  （重点、难点）  3．了解ELISA双抗体测乙型肝炎病毒的方法。    教学内容 教学设计 时间（分）   复习旧课： 9  与实验有关的知识。  实验八 其他微生物及病毒试验  一、实验目的  二、实验内容  （一）观察螺旋体、立克次体、 1．同学边画图边观察。30  沙眼衣原体、肺炎支原体、真菌形 2．仔细巡视，解答疑难。  态及培养物观察  （二）病毒包涵体形态观察 示教。 5  （三）细菌培养结果观察 示教。 5  （四）鸡胚接种  （五）血凝及血凝抑制试验 1. 提问原理，演示过程。 20   2．师生共同分析结果。   （六）ELISA双抗体测乙型 20  肝炎病毒表面抗原 1．利用板图复习其原理。   2．教师演示过程。   3．师生共同分析结果。          小结 ：总结试验中的问题。 9      布置作业与预习 1   作业：实验报告。   预习：第十五章 人类寄生虫概述  课后分析           实验八 其他微生物及病毒试验 一、实验目的 1. 了解病毒包涵体形态特点及在细胞内的位置。 2. 了解单层细胞生长特点及现象。 3. 了解立克次体、螺旋体、衣原体及真菌形态及染色特点。 4. 了解乙型肝炎病毒表面抗原的检查方法和结果判定。 二、实验内容 （一）观察螺旋体、立克次体、沙眼衣原体、肺炎支原体、真菌形态及培养物观察 注意各自的形态特征，染色性等。 （二）病毒包涵体形态观察 狂犬病病毒包涵体标本片显微镜下观察，注意包涵体位于神经细胞浆内，红色、圆形或卵圆形，大小不等。 （三）细胞培养结果观察 将单层细胞培养管置显微镜下观察细胞的生长现象及细胞病变。 （四）鸡胚接种 1．尿囊腔接种法 2．卵黄囊接种法 3．绒毛尿囊膜接种法 4．羊水囊接种法 （五）血凝剂血凝抑制试验 1．血凝试验 （1）原理：某些病毒表面的血凝素能与人“O”型、豚鼠和鸡等的红细胞上的血凝素受体结合，引起红细胞凝集。 （2）方法：取9支小试管，按下表顺序加样。 1 2 3 4 5 6 7 8 9  生理盐水 0.9 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25  病毒液 0.1 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25   病毒液稀释度 1：10 1：20 1：40 1：80 1：160 1：320 1：640 1：1280 对照  0.5%鸡红细胞  各管加0.25ml   摇匀，室温静置45min  2．血凝抑制试验 （1）原理：某些病毒加入特异性抗血清后，再加入人的人“O”型、豚鼠和鸡等的红细胞则不再发生凝集现象。 （2）方法 1）取小试管10支，每管加入0.25ml生理盐水。 2）取经处理的1：5稀释的病人血清0.25ml，加入第一管内作1：10稀释，吹打3次，混匀后取0.25ml加至第2管，并依次作倍比稀释，至第8管为止，第9管为病毒对照，第10管为血清对照。 3）每管加入0.25ml含4个血凝单位的新分离病毒液，第10管不加。 4）摇匀后每管加入0.5%鸡红细胞0.5ml，置室温30min、45min各观察一次结果，以45min的结果为准。 （七）ELISA双抗体测乙型肝炎病毒表面抗原 1. 原理：ELISA法 2. 方法：加样、洗涤、加底物、加终止液。 3. 结果判断：阳性-蓝色，阴性-无色。