支原体属和脲原体属
基 础 医 学 院
病原生物学教研室
支原体( Mycoplasma)
1.能在人工培养基中生长
2.能独立生活
3.最小原核细胞型 微生物
4.无细胞壁
5.二分裂繁殖
6.多形态性,“油煎蛋样, 菌落
分 类
柔膜体纲 (Mollicutes)
支原体目 (MycoPlasmatales)
下分 3个科,
① 支原体科( MycoPlasmataceae);
2个属, 支原体( Mycoplasma)
脲原体( Ureaplasma)
② 无胆甾原体科( Acholeplasma-taceae),
生长时不需要外源性胆固醇;
③ 螺原体科( Spiroplasmataceae),
生长至一定阶段呈螺形。
人体分离, 20种,
其中 8种是致病或条件致病菌,
肺炎支原体 (M.pneumoniae,Mpn)
生殖支原体 (M.geuitalium,Mg)
人型支原体 (M.hominis,Mh)
发酵支原体 (M.fermentants,Mf)
穿透支原体 (M.penetrans,Mpe)
梨支原体 (M.pirum,Mpi)
关节炎支原体 (M.arthritidis,Mart)
解脲脲原体 (U.urealyticum,Uu)
支原体与细菌 L型比较
性状
支原体
细菌 L型
滤过性
有
有
细胞壁
无
无
油煎蛋状菌
落
形成
形成
对青霉素
抵抗
抵抗
对胆固醇需
要
生长需要
不一定需要
来源
自然界, 人与动
物
由细菌在环境条件下诱导
形成
回复变成细
菌
不能
能
遗传性
与细菌无关
与原细菌相同
肺 炎支原体
形态与结构
大 小,可通过滤器,光镜下可观察
细胞壁,无
形 态,球形、球杆形、分枝丝状或念珠状等
细胞膜,
三层,1.蛋白质
2.脂质 (胆固醇较多 )
3.蛋白质
染 色,姬姆萨染色法,淡紫色或蓝色
核 酸,二种 (DNA和 RNA)
生长繁殖
繁殖方式,
二分裂方式
球体延伸, 分节断裂, 出芽, 分枝
繁殖周期,3小时
营养要求,较高,含动物血清, 酵母浸液
酸 碱 度,pH7.8~ 8,0
气体环境,5% CO2或 5% CO2与 95% N2
温度与时间,37℃,3d~ 10d
菌落特征,,油煎蛋, 状菌落
表 25—2
支原体与脲原体的某些生物学特性
抗原构造
主要抗原成分,
1.蛋白质
P1蛋白抗原,表面抗原
致病,粘附
2.脂质中的糖脂
抗体,产生补体结合抗体
生长抑制抗体
代谢抑制抗体
抵抗力
理化因素,比细菌敏感 (因无细胞壁 )
热,弱,50℃ 经 30min死亡
- 20℃ 可长期保存
耐碱
酸和有机溶剂,较敏感 (消毒剂、清洁剂 )
四环素族、红霉素、卡那霉素、氯霉素,
敏感
青霉素,不敏感
致病性
外源性感染
上呼吸道感染,感冒, 咽炎, 气管炎
支原体性肺炎
( Mycoplasmal pneumonia)
(原发性非典型肺炎 )
( primary atypical pneumonia)
临床表现和胸部 X线,
肺炎链球菌引起的典型肺炎不同
类似病毒性肺炎
世界各地,密集人群,儿童及青少年多见
秋冬季发病率高,每隔 3~ 5年出现一次流
行
飞沫传播
潜伏期 2W~ 3W,感染起病缓慢
临床主要症状,发热 ( 约 39℃ ), 头痛,
持续性顽固咳嗽, 胸痛等 。
病人带菌, 排菌状态可持续 6W~ 8W
肺外合并症 ( 神经系统, 消化系统及心脏
等 ) 发病率高, 严重者可致死
致病性,粘附是先决条件
也和超敏反应有关 (共同抗原 )
免疫性
抗体:多种 (CF抗体、生长抑制抗体,
杀支原体抗体等 )
呼吸道 sIgA:有一定作用
非特异冷凝集素,
1.和自身免疫有关
2.患者阳性率为 50%,
常用于辅助诊断。
微生物学检查法
病原分离
特异核酸的检测
血清学诊断
抗原检测
冷凝集试验
病原分离
标 本:咽拭子或痰液
培养基:双相培养基(含马血清、酵母浸液)
SP-4培养基(提高分离率 30%~ 40%)
气体环境,5%~ 10% CO2
温度与时间,37℃, l~ 2W
可疑菌落,
1.糖发酵
2.溶血性
3.血细胞吸附
4.特异抗血清生长抑制试验等
特异核酸的检测
( 1) 聚合酶链反应 (PCR),
优点:特异性好
敏感性高
快速, 简便
靶基因,16S RNA基因
P1蛋白基因
方法:套式 PCR(nPCR)
复合 PCR
限制性片段长度多态性分析 (RFLP)
随机引物 PCR(RAPD)
( 2)基因探针
根据碱基严格互补配对的特性
特异性强,敏感性不如 PCR技术
血清学诊断
( 1) 补体结合试验 ( CFT),
双份抗体效价升高 4倍以上 ?诊断
( 2) 间接血凝试验 ( IHA),
测抗体,2— 3周高峰
( 3) 酶联免疫吸附试验 (ELISA),
测 IgM,IgG和 IgA
敏感性高
( 4) 间接免疫荧光试验,
检测 IgM,IgG
特异性较强
抗原检测
方法 1:间接法或直接法
抗体,荧光标记多克隆抗体或单克隆抗体
检测标本,呼吸道分泌物中抗原
86%可阳性
方法 2:双抗体夹心酶联免疫吸附试验
检测标本,呼吸道分泌物中抗原
可检出 105 CFU /ml
方法 3:酶联免疫吸附试验捕获法
抗体,抗 P1单克隆抗体
检测标本,P1蛋白
可检出 104CFU/ml
特异性强,3小时即可
冷凝集试验
辅助诊断非典型肺炎
针对红细胞膜 Ⅰ 抗原
冷凝集素属 IgM
5d~ 10d出现,2W~ 3W高峰
辅助诊断效价, 64~ 128倍以上
双份效价升高 4倍以上
特异性和敏感性较低
防 冶
?药物,四环素类 (近年来耐药性增加 )
大环内酯类,首选
(红霉素、克拉霉素、阿奇霉素 )
喹诺酮类
?疫苗,减毒活疫苗
基因工程疫苗
其它支原体
寄生部位,鼻咽腔及泌尿生殖道粘膜
属于正常菌群,引起条件性感染
口腔支原体,慢性呼吸道感染
唾液支原体,齿槽溢脓
生殖支原体,生殖道、呼吸道和关节腔的炎症,
流产、早产和新生儿肺炎
发酵支原体,类风湿性关节炎
AIDS相关 (分离率明显升高 )
人型支原体,渗出性咽炎,非淋菌性尿道炎
(nongonococcal urithritis,NGU),
卵巢脓肿,产褥败血症
脲原体属 (Ureaplasma)
从支原体分出的独立的新属
正常菌群,绝大多数
有致病性,解脲脲原体
( U.urealyticum,Uu)
1954年从 NGU患者的病灶处分离
类似肺炎支原体
能水解尿素
生物学性状
形态,圆形或球杆状
染色,革兰染色阴性
温度和酸碱度, 37℃,pH 6.0
菌落,很小 (15μ m~ 60μ m,放大 200倍 ),
称 T株( Tiny colony strain)
敏感性,
敏感, 四环素、氯霉素、庆大霉素,
卡那霉素,0.05% 醋酸铊,
125μ g/ml 5-碘 -2’脱氧尿苷
不敏感,青霉素
生化特性,水解尿素产氨
致病性
存 在, 人和动物的口腔, 呼吸道,
泌尿生殖道
血清型, 解脲脲原体 (Uu)有 14个血清型
传播途径, 性接触传播, 母婴传播
所致疾病 (STD)
泌尿生殖道感染, NGU, 盆腔感染, 宫颈
炎, 阴道炎, 输卵管炎, 慢性前列腺
炎, 附睾炎, 男女不孕症, 反复流产,
早产, 死胎
新生儿疾病,呼吸道病变, 肺炎, 脑膜炎
引起男性不孕的原因,
① Uu吸附于精子表面,
使其运动受阻,
并蔽盖了精子识别卵细胞的部位
② Uu产生神经氨酸样物质,
干扰精子与卵细胞结合 。
③ Uu与精子膜有共同抗原,
从而产生抗精子抗体
基 础 医 学 院
病原生物学教研室
支原体( Mycoplasma)
1.能在人工培养基中生长
2.能独立生活
3.最小原核细胞型 微生物
4.无细胞壁
5.二分裂繁殖
6.多形态性,“油煎蛋样, 菌落
分 类
柔膜体纲 (Mollicutes)
支原体目 (MycoPlasmatales)
下分 3个科,
① 支原体科( MycoPlasmataceae);
2个属, 支原体( Mycoplasma)
脲原体( Ureaplasma)
② 无胆甾原体科( Acholeplasma-taceae),
生长时不需要外源性胆固醇;
③ 螺原体科( Spiroplasmataceae),
生长至一定阶段呈螺形。
人体分离, 20种,
其中 8种是致病或条件致病菌,
肺炎支原体 (M.pneumoniae,Mpn)
生殖支原体 (M.geuitalium,Mg)
人型支原体 (M.hominis,Mh)
发酵支原体 (M.fermentants,Mf)
穿透支原体 (M.penetrans,Mpe)
梨支原体 (M.pirum,Mpi)
关节炎支原体 (M.arthritidis,Mart)
解脲脲原体 (U.urealyticum,Uu)
支原体与细菌 L型比较
性状
支原体
细菌 L型
滤过性
有
有
细胞壁
无
无
油煎蛋状菌
落
形成
形成
对青霉素
抵抗
抵抗
对胆固醇需
要
生长需要
不一定需要
来源
自然界, 人与动
物
由细菌在环境条件下诱导
形成
回复变成细
菌
不能
能
遗传性
与细菌无关
与原细菌相同
肺 炎支原体
形态与结构
大 小,可通过滤器,光镜下可观察
细胞壁,无
形 态,球形、球杆形、分枝丝状或念珠状等
细胞膜,
三层,1.蛋白质
2.脂质 (胆固醇较多 )
3.蛋白质
染 色,姬姆萨染色法,淡紫色或蓝色
核 酸,二种 (DNA和 RNA)
生长繁殖
繁殖方式,
二分裂方式
球体延伸, 分节断裂, 出芽, 分枝
繁殖周期,3小时
营养要求,较高,含动物血清, 酵母浸液
酸 碱 度,pH7.8~ 8,0
气体环境,5% CO2或 5% CO2与 95% N2
温度与时间,37℃,3d~ 10d
菌落特征,,油煎蛋, 状菌落
表 25—2
支原体与脲原体的某些生物学特性
抗原构造
主要抗原成分,
1.蛋白质
P1蛋白抗原,表面抗原
致病,粘附
2.脂质中的糖脂
抗体,产生补体结合抗体
生长抑制抗体
代谢抑制抗体
抵抗力
理化因素,比细菌敏感 (因无细胞壁 )
热,弱,50℃ 经 30min死亡
- 20℃ 可长期保存
耐碱
酸和有机溶剂,较敏感 (消毒剂、清洁剂 )
四环素族、红霉素、卡那霉素、氯霉素,
敏感
青霉素,不敏感
致病性
外源性感染
上呼吸道感染,感冒, 咽炎, 气管炎
支原体性肺炎
( Mycoplasmal pneumonia)
(原发性非典型肺炎 )
( primary atypical pneumonia)
临床表现和胸部 X线,
肺炎链球菌引起的典型肺炎不同
类似病毒性肺炎
世界各地,密集人群,儿童及青少年多见
秋冬季发病率高,每隔 3~ 5年出现一次流
行
飞沫传播
潜伏期 2W~ 3W,感染起病缓慢
临床主要症状,发热 ( 约 39℃ ), 头痛,
持续性顽固咳嗽, 胸痛等 。
病人带菌, 排菌状态可持续 6W~ 8W
肺外合并症 ( 神经系统, 消化系统及心脏
等 ) 发病率高, 严重者可致死
致病性,粘附是先决条件
也和超敏反应有关 (共同抗原 )
免疫性
抗体:多种 (CF抗体、生长抑制抗体,
杀支原体抗体等 )
呼吸道 sIgA:有一定作用
非特异冷凝集素,
1.和自身免疫有关
2.患者阳性率为 50%,
常用于辅助诊断。
微生物学检查法
病原分离
特异核酸的检测
血清学诊断
抗原检测
冷凝集试验
病原分离
标 本:咽拭子或痰液
培养基:双相培养基(含马血清、酵母浸液)
SP-4培养基(提高分离率 30%~ 40%)
气体环境,5%~ 10% CO2
温度与时间,37℃, l~ 2W
可疑菌落,
1.糖发酵
2.溶血性
3.血细胞吸附
4.特异抗血清生长抑制试验等
特异核酸的检测
( 1) 聚合酶链反应 (PCR),
优点:特异性好
敏感性高
快速, 简便
靶基因,16S RNA基因
P1蛋白基因
方法:套式 PCR(nPCR)
复合 PCR
限制性片段长度多态性分析 (RFLP)
随机引物 PCR(RAPD)
( 2)基因探针
根据碱基严格互补配对的特性
特异性强,敏感性不如 PCR技术
血清学诊断
( 1) 补体结合试验 ( CFT),
双份抗体效价升高 4倍以上 ?诊断
( 2) 间接血凝试验 ( IHA),
测抗体,2— 3周高峰
( 3) 酶联免疫吸附试验 (ELISA),
测 IgM,IgG和 IgA
敏感性高
( 4) 间接免疫荧光试验,
检测 IgM,IgG
特异性较强
抗原检测
方法 1:间接法或直接法
抗体,荧光标记多克隆抗体或单克隆抗体
检测标本,呼吸道分泌物中抗原
86%可阳性
方法 2:双抗体夹心酶联免疫吸附试验
检测标本,呼吸道分泌物中抗原
可检出 105 CFU /ml
方法 3:酶联免疫吸附试验捕获法
抗体,抗 P1单克隆抗体
检测标本,P1蛋白
可检出 104CFU/ml
特异性强,3小时即可
冷凝集试验
辅助诊断非典型肺炎
针对红细胞膜 Ⅰ 抗原
冷凝集素属 IgM
5d~ 10d出现,2W~ 3W高峰
辅助诊断效价, 64~ 128倍以上
双份效价升高 4倍以上
特异性和敏感性较低
防 冶
?药物,四环素类 (近年来耐药性增加 )
大环内酯类,首选
(红霉素、克拉霉素、阿奇霉素 )
喹诺酮类
?疫苗,减毒活疫苗
基因工程疫苗
其它支原体
寄生部位,鼻咽腔及泌尿生殖道粘膜
属于正常菌群,引起条件性感染
口腔支原体,慢性呼吸道感染
唾液支原体,齿槽溢脓
生殖支原体,生殖道、呼吸道和关节腔的炎症,
流产、早产和新生儿肺炎
发酵支原体,类风湿性关节炎
AIDS相关 (分离率明显升高 )
人型支原体,渗出性咽炎,非淋菌性尿道炎
(nongonococcal urithritis,NGU),
卵巢脓肿,产褥败血症
脲原体属 (Ureaplasma)
从支原体分出的独立的新属
正常菌群,绝大多数
有致病性,解脲脲原体
( U.urealyticum,Uu)
1954年从 NGU患者的病灶处分离
类似肺炎支原体
能水解尿素
生物学性状
形态,圆形或球杆状
染色,革兰染色阴性
温度和酸碱度, 37℃,pH 6.0
菌落,很小 (15μ m~ 60μ m,放大 200倍 ),
称 T株( Tiny colony strain)
敏感性,
敏感, 四环素、氯霉素、庆大霉素,
卡那霉素,0.05% 醋酸铊,
125μ g/ml 5-碘 -2’脱氧尿苷
不敏感,青霉素
生化特性,水解尿素产氨
致病性
存 在, 人和动物的口腔, 呼吸道,
泌尿生殖道
血清型, 解脲脲原体 (Uu)有 14个血清型
传播途径, 性接触传播, 母婴传播
所致疾病 (STD)
泌尿生殖道感染, NGU, 盆腔感染, 宫颈
炎, 阴道炎, 输卵管炎, 慢性前列腺
炎, 附睾炎, 男女不孕症, 反复流产,
早产, 死胎
新生儿疾病,呼吸道病变, 肺炎, 脑膜炎
引起男性不孕的原因,
① Uu吸附于精子表面,
使其运动受阻,
并蔽盖了精子识别卵细胞的部位
② Uu产生神经氨酸样物质,
干扰精子与卵细胞结合 。
③ Uu与精子膜有共同抗原,
从而产生抗精子抗体