十、常用蛋白质分子量标准参照物 高分子量标准参照 中分子量标准参物 低分子量标准参照 蛋白质 Mr 蛋白质 Mr 蛋白质 Mr  肌球蛋白 β-半乳糖苷酶 磷酸化酶B 牛血清清蛋白 过氧化氢酶 醛缩酶 212 000 116 000 97 400 66 200 57 000 40 000 磷酸化酶B 牛血清清蛋白 谷氨酸脱氢酶 卵清蛋白 醛缩酶 碳酸酐酶 大豆胰蛋白酶抑制剂 溶菌酶 97 400 66 200 55 000 42 700 40 000 31 000 21 500 14 400 碳酸酐酶 大豆胰蛋白酶制剂 马心肌球蛋白 溶菌酶 肌球蛋白(F1) 肌球蛋白(F2) 肌球蛋白(F3) 31 000 21 500 16 900 14 400 8 100 6 200 2 500  十一、层析法常用数据表及性质 离子交换纤维素 目前常用的离子交换纤维素列于下表 DEAE- 纤维素 形状 长度 (微米) 交换当量 (毫克当量/克) 蛋白吸附容量 (毫克/克) 床体积(毫升/克)      胰岛素(pH8.5) 牛血清清蛋白(pH8.5) pH6.0 pH7.5  DE-22 DE-23 DE-32 DE-52 CM-纤维素 CM-22 CM-23 CM-32 CM-52 改良纤维性 * 同上(除细粒) 微粒性(干粉) 同上(溶胀) 改良纤维性 同上(除细粒) 微粒性(干粉) 同上(溶胀) 12~400 18~400 24~63 24~63 12~400 18~400 24~63 24~63 1.0±0.1 1.0±0.1 1.0±0.1 1.0±0.1 0.6±0.06 0.6±0.06 1.0±0.1 1.0±0.1 750 750 850 850 溶菌酶 (pH5.0) 600 600 1,260 1,260 450 450 660 660 7S-γ球蛋白(pH5.0) 150 150 400 400 7.7 8.3 6.0 6.0 pH5.0 7.7 9.1 6.8 6.8 7.7 9.1 6.3 6.3 pH7.5 7.7 9.1 6.7 6.7  *:英国Whatman厂的型号,原来有旧型号如DE-1,为长纤维性,长度1000微米。还有DE-11,纤维性,50~250微米,对牛血清清蛋白的吸附容量仅为130毫克/克。 (二)聚丙烯酰胺凝胶的技术数据 型号 排阻的下限 (Mr) 分级分离的范围 (Mr) 膨胀后的床体积 (mL/g干凝胶) 膨胀所需最少时间 (室温,小时)  Bio-gel-P-2 Bio-gel-P-4 Bio-gel-P-6 Bio-gel-P-10 Bio-gel-P-30 Bio-gel-P-60 Bio-gel-P-100 Bio-gel-P-150 Bio-gel-P-200 Bio-gel-P-300 1 600 3 600 4 600 10 000 30 000 60 000 100 000 150 000 200 000 300 000 200~2 000 500~4 000 1 000~5 000 5 000~17 000 20 000~50 000 30 000~70 000 40 000~100 000 50 000~150 000 80 000~300 000 100 000~400 000 3.8 5.8 8.8 12.4 14.9 19.0 19.0 24.0 34.0 40.0 2~4 2~4 2~4 2~4 10~12 10~12 24 24 48 48  注:上述各种型号的凝胶都是亲水性的多孔颗粒,在水和缓冲溶液中很容易膨胀,生产厂为Bio-Rad Laboratories,Rich-mond, California, U. S. A. (三)琼脂糖凝胶的技术数据 (琼脂糖是琼脂内非离子型的组分,它在0 ~ 4℃,pH 4~9范围内是稳定的。) 名称、型号 凝胶内琼脂糖百分 含量(W/W) 排阻的下限(Mr) 分级分离的范围(Mr) 生产厂商  Sagavac 10 Sagavac 8 Sagavac6 Sagavac4 Sagavac2 10 8 6 4 2 2.5×105 7×105 2×106 15×106 150×106 1×104~2.5×105 2.5×104~7×105 5×104~2×106 2×105~15×106 5×105~15×107 Seravac Laboratories, Maidenhead, England  Bio-GelA-0.5M Bio-GelA-1.5M Bio-GelA-5M Bio-GelA-15M Bio-GelA-50M Bio-GelA-150M 10 8 6 4 2 1 0.5×105 1.5×106 5×106 15×105 50×106 150×106 <1×104~2.5×106 <1×104~1.5×106 1×104~5×106 4×104~15×106 1×105~50×106 1×106~150×106 Bio-Rad Laboratories, California,U.S.A.  (四)凝胶过滤层析介质的技术数据 凝胶过滤介质名称  分离范围 颗粒 大小 (μm)  特性/应用 pH稳定性工作 耐压(Mpa) 最 快 流 速 (cm/h)  Superdex 30 Superdex 75 Superdex200 Superose 6 Superose 12 Sephacryl S-100 HR Sephacryl S-200 HR Sephacryl S-300 HR Sephacryl S-400 HR Sepharose 6 Fast Flow Sepharose 4 Fast Flow Sepharose 2B Sepharose 4B Sepharose 6B Sepharose CL-2B Sepharose CL-4B Sepharose CL-6B <10000 3000~70000 3 000 10000~600000 5000~5×106 1000~300000 1000~ 100000 5000~250000 10000~1.5×106 20000~8×106 10000~4×106 60000~20×106 70000~40×106 60000~20×106 10000~4×106 70000~40×106 60000~20×105 10000~4×106 24~44 24~44 24~44 20~40 20~40 25~75 25~75 25~75 25~75 平均90 平均90 60~200 45~165 45~165 60~200 45~165 45~165 肽类、寡糖、小蛋白等 重组蛋白、细胞色素 单抗、大蛋白 蛋白、肽类、多糖、核酸 蛋白、肽类、寡糖、多糖 肽类、小蛋白 蛋白,如清蛋白 蛋白、抗体 多糖、具延伸结构的大分 子如蛋白多糖、脂质体 巨大分子 巨大分子如重组乙型肝 炎表面抗原 蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子如核酸和多糖(蛋白多糖) 蛋白、多糖 蛋白、多糖 蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子如核酸和多糖(蛋白多糖) 蛋白、多糖 蛋白、多糖 3~12 3~12 3~12 3~12 3~12 3~11 3~11 3~11 3~11 2~12 2~12 4~9 4~9 4~9 3~13 3~13 0.3 0.3 0.3 0.4 0.7 0.2 0.2 0.2 0.2 0.1 0.1 0.004 0.008 0.02 0.005 0.012 0.02 100 100 100 30 30 20~39 20~39 20~39 20~39 300 250 10 11.5 14 15 26 30   凝胶过滤介质名称  分离 范围 颗粒 大小 (μm)  特性/应用 pH 稳定性 工作 干凝胶 溶胀体积 (mL/g) 溶胀最少 平衡时间(h) 最快 流速 (cm/h)        室温 沸水    SephadexG-10 SephadexG-15 SephadexG-25 Coarse SephadexG-25Medium SephadexG-25 Fine SephadexG-25 Superfine SephadexG-50 Coarse SephadexG-50 Medium SephadexG-50 Fine SephadexG-50 Superfine SephadexG-75 SephadexG-75 Superfine SephadexG-100 SephadexG-100 Superfine SephadexG-150 SephadexG-150 Superfine SephadexG-200 SephadexG-200 Superfine  <700 <1500 1000~5000 1000~5 000 1000~5000 1000~5000 1500~30000 1500~30000 1500~30000 1500~30000 3000~80000 3000~70000 4000~1.5×105 4000~1×105 5000~3×105 5000~1.5×105 5000~6×105 5000~2.5×105  干粉40~120 干粉40~120 干粉100~300 干粉50~150 干粉20~80 干粉10~40 干粉100~300 干粉50~150 干粉20~80 干粉10~40 干粉40~120 干粉10~40 干粉40~120 干粉10~40 干粉40~120 干粉10~40 干粉40~120 干粉10~40  脱盐及交换缓冲液用 脱盐及交换缓冲液用 脱盐及交换缓冲液用 脱盐及交换缓冲液用 小分子蛋白质分离 小分子蛋白质分离 小分子蛋白质分离 小分子蛋白质分离 中等蛋白质分离 中等蛋白质分离 中等蛋白质分离 中等蛋白质分离 稍大蛋白质分离 稍大蛋白质分离 较大蛋白质分离 较大蛋白质分离  2~13 2~13 2~13 2~13 2~13 2~13 2~10 2~10 2~10 2~10 2~10 2~10 2~10 2~10 2~10 2~10 2~10 2~10  2~3 2.5~3.5 4~6 4~6 4~6 4~6 9~11 9~11 9~11 9~11 12~15 12~15 15~20 15~20 20~30 18~22 30~40 20~25  3 3 6 6 6 6 6 6 6 6 24 24 48 48 72 72 72 72  1 1 2 2 2 2 2 2 2 2 3 3 5 5 5 5 5 5  2~5 2~5 2~5 2~5 2~5 2~5 2~5 2~5 2~5 2~5 72 16 47 11 21 5.6 11 2.8  SephadexLH20 ( 嗜脂性 ) 100~ 4 000 干粉 25~106 特别为使用有机溶剂而设计。适合分离脂类、胆固醇、脂肪酸、激素、维生素及其他小生物分子。此分离范围指以酒精为溶剂的分离  (五)离子交换层析介质的技术数据 离子交换介质名称  最高载量  颗粒大小(μm)  特性/应用  pH稳定性工作  耐压 (MPa)  最快 流速 (cm/h)  SOURCE 15 Q 25mg 蛋白 15  2~12  4 1800  SOURCE 15 S 25mg 蛋白 15  2~12  4 1800  Q Sepharose H.P. 70mg BSA 24~44  2~12  0.3 150  SP Sepharose H.P. 55mg 核糖核酸酶 24~44  3~12  0.3 150  Q Sepharose F.F. 120mg HSA 45~165  2~12  0.2 400  SP Sepharose F.F. 75mg BSA 45~165  4~13  0.2 400  DEAE Sepharose F.F. 110mg HSA 45~165  2~9  0.2 300  CM Sepharose F.F. 50mg 核糖核酸酶 100~300  6~13  0.2 300  Q Sepharose Big Beads  100~300  2~12  0.3 1200~1800  SP Sepharose Big Beads 60mg BSA 干粉 40~120  4~12  0.3 1200~1800   离子交换 介质名称 最高 载量 颗粒 大小 (μm) 特性/应用  pH稳定性 工作 耐压 (MPa) 最快 流速 (cm/h)   QAE Sephadex A-25  1.2mg甲状腺球蛋白 80mgHSA  干粉 40~120 纯化低分子量蛋白、多肽、核苷以及巨大分子(Mr>200000),在工业传统应用上具有重要作用  2~10  0.11  475   QAE Sephadex A-50  1.2mg甲状腺球蛋白 80mgHSA  干粉 40~120 批量生产和预处理用,分离中等大小的生物分子 (30~200000)  2~11  0.01  45  SP Sephadex C-25 1.1mg IgG 70mg牛羰合血红蛋白230mg核糖核酸酶 干粉 40~120 纯化低分子量蛋白、多肽、核苷以及巨大分子(Mr>200000),在工业传统应用上具有重要作用 2~10  0.13 475  SP Sephadex C-50 8mg IgG 110mg牛羰合 血红蛋白 干粉 40~120 批量生产和预处理用,分离中等大小的生物分子 (30~200000) 2~10  0.01 45  DEAE Sephadex A-25 1mg甲状 腺球蛋白 30mg HAS 140mg a-乳清 蛋白 干粉 40~120 纯化低分子量蛋白、多肽、核苷以及巨大分子(Mr>200 000),在工业传统应用上具有重要作用 2~9  0.11 475  DEAE Sephadex A-50 2mg 甲状 腺球蛋白 110mg HSA 干粉 40~120 批量生产和预处理用,分离中等大小的生物分子(Mr>200 000),在工作传统应用上具有重要作用 2~9  0.11 45  CM Sephadex C-25 1.6mg IgG 70mg牛羰合血红蛋白190mg核糖核酸酶 干粉 40~120 纯化低分子量蛋白、多肽、核苷以及巨大分子(Mr>200 000),在工业传统应用上具有重要作用 6~13  0.13 475  CM Sephadex C-50 7mg IgG 140mg牛羰合 血红蛋白120mg核糖核酸酶 干粉 40~120 批量生产和预处理用,分离中等大小的生物分子 (30~200000) 6~10  0.01 45   十二、常用缓冲溶液的配制方法 甘氨酸–盐酸缓冲液(0.05mol/L) X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI,再加水稀释至200毫升 pH X Y pH X Y  2.0 2.4 2.6 2.8 50 50 50 50 44.0 32.4 24.2 16.8 3.0 3.2 3.4 3.6 50 50 50 50 11.4 8.2 6.4 5.0  甘氨酸分子量 = 75.07,0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。 2.邻苯二甲酸–盐酸缓冲液(0.05 mol/L) X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl,再加水稀释到20毫升 pH(20℃) X Y pH(20℃) X Y  2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 5 5 5 5 5 4.070 3.960 3.295 2.642 2.022 3.2 3.4 3.6 3.8 5 5 5 5 1.470 0.990 0.597 0.263  邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23,0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升 3.磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 pH 0.2mol/L Na2HPO4 (毫升) 0.1mol/L 柠檬酸 (毫升) pH 0.2mol/L Na2HPO4 (毫升) 0.1mol/L 柠檬酸 (毫升)  2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.8 5.0 0.40 1.24 2.18 3.17 4.11 4.94 5.70 6.44 7.10 7.71 8.28 8.82 9.35 9.86 10.30 10.60 18.76 17.82 16.83 15.89 15.06 14.30 13.56 12.90 12.29 11.72 11.18 10.65 10.14 9.70 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 10.72 11.15 11.60 12.09 12.63 13.22 13.85 14.55 15.45 16.47 17.39 18.17 18.73 19.15 19.45 9.28 8.85 8.40 7.91 7.37 6.78 6.15 5.45 4.55 3.53 2.61 1.83 1.27 0.85 0.55  Na2HPO4分子量 = 14.98,0.2 mol/L溶液为28.40克/升。 Na2HPO4-2H2O分子量 = 178.05,0.2 mol/L溶液含35.01克/升。 C4H2O7·H2O分子量 = 210.14,0.1 mol/L溶液为21.01克/升。 4.柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液 pH 钠离子浓度 (mol/L) 柠檬酸(克) C6H8O7·H2O 氢氧化钠(克) NaOH 97% 盐酸(毫升) HCl(浓) 最终体积(升)①  2.2 3.1 3.3 4.3 5.3 5.8 6.5 0.20 0.20 0.20 0.20 0.35 0.45 0.38 210 210 210 210 245 285 266 84 83 83 83 144 186 156 160 116 106 45 68 105 126 10 10 10 10 10 10 10  ①使用时可以每升中加入1克克酚,若最后pH值有变化,再用少量50%?氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。 5.柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液(0.1 mol/L) pH mol/L 柠檬酸 (毫升) mol/L 柠檬酸钠 (毫升) pH mol/L 柠檬酸 (毫升) mol/L 柠檬酸钠 (毫升)  3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.8 18.6 17.2 16.0 14.9 14.0 13.1 12.3 11.4 10.3 9.2 1.4 2.8 4.0 5.1 6.0 6.9 7.7 8.6 9.7 10.8 5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 8.2 7.3 6.4 5.5 4.7 3.8 2.8 2.0 1.4 11.8 12.7 13.6 14.5 15.3 16.2 17.2 18.0 18.6  柠檬酸C6H8O7·H2O:分子量210.14,0.1 mol/L溶液为21.01克/升。 柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O:分子量294.12,0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。 6.乙酸–乙酸钠缓冲液(0.2 mol/L) pH(18℃) mol/L NaAc (毫升) mol/L HAc (毫升)  pH(18℃) mol/L NaAc (毫升) mol/L HAc (毫升)  2.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 0.75 1.20 1.80 2.65 3.70 4.90 9.25 8.80 8.20 7.35 6.30 5.10 4.8 5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 5.90 7.00 7.90 8.60 9.10 9.40 4.10 3.00 2.10 1.40 0.90 0.60  Na2Ac·3H2O分子量 = 136.09,0.2 mol/L溶液为27.22克/升。 7.磷酸盐缓冲液 (1)磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液(0.2) pH mol/L Na2HPO4 (毫升) mol/L NaH2PO4 (毫升)  pH mol/L Na2HPO4 (毫升) mol/L NaH2PO4 (毫升)  5.8 5.9 6.0 6.1 6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 6.7 6.8 6.9 8.0 10.0 12.3 15.0 18.5 22.5 26.5 31.5 37.5 43.5 49.5 55.0 92.0 90.0 87.7 85.0 81.5 77.5 73.5 68.5 62.5 56.5 51.0 45.0 7.0 7.1 7.2 7.3 7.4 7.5 7.6 7.7 7.8 7.9 8.0 61.0 67.0 72.0 77.0 81.0 84.0 87.0 89.5 91.5 93.0 94.7 39.0 33.0 28.0 23.0 19.0 16.0 13.0 10.5 8.5 7.0 5.3  Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05,0.2 mol/L溶液为85.61克/升。 Na2HPO4·2H2O分子量 = 358.22,0.2 mol/L溶液为71.64克/升。 Na2HPO4·2H2O分子量 = 156.03,0.2 mol/L溶液为31.21克/升。 (2)磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液(1/15 mol/L) pH mol/L/15Na2HPO4 (毫升) mol/L//15KH2PO4 (毫升) pH mol/L//15Na2HPO4 (毫升) mol/L//15KH2PO4 (毫升)  4.92 5.29 5.91 6.24 6.47 6.64 6.81 6.98 0.10 0.50 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 9.90 9.50 9.00 8.00 7.00 6.00 5.00 4.00 7.17 7.38 7.73 8.04 8.34 8.67 8.18 7.00 8.00 9.00 9.50 9.75 9.90 10.00 3.00 2.00 1.00 0.50 0.25 0.10 0  Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05,1/15M溶液为11.876克/升。 KH2PO4分子量 = 136.09,1/15M溶液为9.078克/升。 8.磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液(0.05M) X毫升0.2M K2PO4 + Y毫升0.2N NaOH加水稀释至29毫升 pH(20℃) X (毫升) Y(毫升) pH(20℃) X (毫升) Y(毫升)  5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 5 5 5 5 5 5 0.372 0.570 0.860 1.260 1.780 2.365 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 5 5 5 5 5 5 2.963 3.500 3.950 4.280 4.520 4.680  9.巴比妥钠-盐酸缓冲液(18℃) pH 0.04M巴比妥钠溶液 0.2V盐酸 pH 0.04M巴比妥钠溶液(毫升) 0.2N盐酸(毫升)  6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 8.2 100 100 100 100 100 100 100 100 18.4 17.8 16.7 15.3 13.4 11.47 9.39 7.21 8.4 8.6 8.8 9.0 9.2 9.4 9.6 100 100 100 100 100 100 100 100 5.21 3.82 2.52 1.65 1.13 0.70 0.35  巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M溶液为8.25克/升 10.Tris–盐酸缓冲液(0.05M,25℃) 50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后,加水稀释至100毫升。 pH X(毫升) pH X(毫升)  7.10 7.20 7.30 7.40 7.50 7.60 7.70 7.80 7.90 8.00 45.7 44.7 43.4 42.0 40.3 38.5 36.6 34.5 32.0 29.2 8.10 8.20 8.30 8.40 8.50 8.60 8.70 8.80 8.90 26.2 22.9 19.9 17.2 14.7 12.4 10.3 8.5 7.0  三羟甲基氨基甲烷(Tris)HOCH2 CH2OH C HOCH2 NH2 分子量=121.14; 0.1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳,使用时注意将瓶盖严。 11.硼酸–硼砂缓冲液(0.2M硼酸根) pH 0.05M硼砂(毫升) 0.2M硼砂(毫升) pH 0.05M硼砂(毫升) 0.2M硼酸(毫升)  7.4 7.6 7.8 8.0 1.0 1.5 2.0 3.0 9.0 8.5 8.0 7.0 8.2 8.4 8.7 9.0 3.5 4.5 6.0 8.0 6.5 5.5 4.0 2.0  硼砂Na2B4O7·H2O,分子量=381.43;0.05M溶液(=0.2M硼酸根)含19.07克/升。 硼酸H2BO3,分子量=61.84,0.2M溶液为12.37克/升。 硼砂易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存。 11.硼酸-硼砂缓冲液(0.2M硼酸根) pH 0.05M硼砂(毫升) 0.2M硼酸(毫升) pH 0.05M硼砂(毫升) 0.2M硼酸(毫升)  7.4 7.6 7.8 8.0 1.0 1.5 2.0 3.0 9.0 8.5 8.0 7.0 8.2 8.4 8.7 9.0 3.5 4.5 6.0 8.0 6.5 5.5 4.0 2.0  硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液(=0.2M硼酸根)含19.07克/升。 硼酸H2BO3,分子量=61.84, 0.2M溶液为12.37克/升。 硼砂 易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存。 12.甘氨酸–氢氧化钠缓冲液(0.05M) X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升0.2NnaOH加水稀释至200毫升 pH X Y pH X Y  8.6 8.8 9.0 9.2 9.4 50 50 50 50 50 4.0 6.0 8.8 12.0 16.8 9.6 9.8 10.0 10.4 10.6 50 50 50 50 50 22.4 27.2 32.0 38.6 45.5  甘氨酸分子量=75.07;0.2M溶液含15.01克/升。 13.硼砂-氢氧化钠缓冲液(0.05M硼酸根) X毫升0.05M硼砂+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至200毫升 pH X Y pH X Y  9.3 9.4 9.6 50 50 50 6.0 11.0 23.0 9.8 10.0 10.1 50 50 50 34.0 43.0 46.0  硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液为19.07克/升。 14.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1M) Ca2+、Mg2+存在时不得使用 pH 0.1MNa2CO3(毫升) 0.1MN2HCO3(毫升)  20℃ 37℃    9.16 9.40 9.51 9.78 9.90 10.14 10.28 10.53 10.83 8.77 9.12 9.40 9.50 9.72 9.90 10.08 10.28 10.57 1 2 3 4 5 6 7 8 9 9 8 7 6 5 4 3 2 1  Na2CO2·10H2O分子量=286.2;0.1M溶液为28.62克/升。 N2HCO3分子量=84.0;0.1M溶液为8.40克/升。 15.“PBS”缓冲液 PH 7.6 7.4 7.2 7.0  H2O NaCl Na2HPO4 NaH2PO4 1000 8.5 2.2 0.1 1000 8.5 2.2 0.2 1000 8.5 2.2 0.3 100ml 8.5g 2.2g 0.4g   十三、实验室中常用酸碱的比重和浓度 名称 分子式 分子量 比重 面分浓度 %(W/W) 当量浓度 (粗略)N 配1升1N溶液所需毫升数  盐酸 HCl 36.47 1.19 37.2 12.0 84     1.18 35.4 11.8      1.10 20.0 6.0   硫酸 H2SO4 98.09 1.84 95.6 36.0 28     1.18 24.8 6.0   硝酸 HNO2 63.02 1.42 70.98 16.0 63     1.40 65.3 14.5      1.20 32.36 6.1   冰乙酸 CH3COOH 60.05 1.05 99.5 17.4 59  乙酸 CH3COOH 98.06  36 6.0   磷酸 H2PO4 35.05 1.71 85.0 15,30,45 (依反应而定) 67(以15N计)  氨水 NH4OH  0.90  15 67     0.904 27.0 14.3 70     0.91 25.0 13.4      0.96 10.0 5.6   氢氧化 钠溶液 NaOH 40.0 1.5 50.0 19 53   十四、硫酸铵饱和度的常用表 1.调整硫酸铵溶液饱和度计算表(25℃) 硫整硫酸铵终浓度,%饱和度    10 20 25 30 33 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 90 100  每1升溶液加固体硫酸铵的克数①  硫 酸铵 初 浓 度 , % 饱和 度 0 56 114 144 176 196 209 243 277 313 351 390 430 472 516 561 662 767   10  57 86 118 137 150 183 216 251 288 326 365 406 449 494 592 694   20   29 59 78 91 123 155 190 225 262 300 340 382 424 520 619   25    30 49 61 93 125 158 193 230 267 307 348 390 485 583   30     19 30 62 94 127 162 198 235 273 314 356 449 546   33      12 43 74 107 142 177 214 252 292 333 426 522   35       31 63 94 129 164 200 238 178 319 411 506   40        31 63 97 132 168 205 245 285 375 469   45         32 65 99 134 171 210 250 339 431   50          33 66 101 137 176 214 302 392   55           33 67 103 141 179 264 353   60            34 69 105 143 227 314   65             34 70 107 190 275   70              35 72 153 237   75               36 115 198   80                77 157   90                 79  ①在25℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每升溶液所加固体硫酸铵的克数。 调整硫酸铵溶液饱和度计算表(0℃) 在0℃硫酸铵终浓度,%饱和度    20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100   每100毫升溶液加固体硫酸铵的克数①  硫酸铵初浓度 , % 饱和度 0 10.6 13.4 16.4 19.4 22.6 25.8 29.1 32.6 36.1 39.8 43.6 47.6 51.6 55.9 60.3 65.0 69.7   5 7.9 10.8 13.7 16.6 19.7 22.9 26.2 29.6 33.1 36.8 40.5 44.4 48.4 52.6 57.0 61.5 66.2   10 5.3 8.1 10.9 13.9 16.9 20.0 23.3 26.6 30.1 33.7 37.4 41.2 45.2 49.3 53.6 58.1 62.7   15 2.6 5.4 8.2 11.1 14.1 17.2 20.4 23.7 27.1 30.6 34.3 38.1 42.0 45.0 50.3 54.7 59.2   20 0 2.7 5.5 8.3 11.3 14.3 17.5 20.7 24.1 27.6 31.2 34.9 38.7 42.7 46.9 51.2 55.7   25  0 2.7 5.6 8.4 11.5 14.6 17.9 21.1 24.5 28.0 31.7 35.5 39.5 43.6 47.8 52.2   30   0 2.8 5.6 8.6 11.7 14.8 18.1 21.4 24.9 28.5 32.3 36.2 40.2 44.5 48.8   35    0 2.8 5.7 8.7 11.8 15.1 18.4 21.8 25.4 29.1 32.9 36.9 41.0 45.3   40     0 2.9 5.8 8.9 12.0 15.3 18.7 22.2 25.8 29.6 33.5 37.6 41.8   45      0 2.9 5.9 9.0 12.3 15.5 19.0 22.6 26.3 30.2 34.2 38.3   50       0 3.0 6.0 9.2 12.5 15.9 19.4 23.0 26.8 30.8 34.8   55        0 3.1 6.2 9.5 12.9 16.4 19.7 23.5 27.3 31.3   60         0 3.1 6.3 9.7 13.2 16.8 20.1 23.1 27.9   65          0 3.1 6.3 9.7 132 16.8 20.5 24.4   70           0 3.2 6.5 9.9 13.4 17.1 20.9   75            0 3.2 6.6 10.1 13.7 17.4   80             0 3.3 6.7 10.3 13.9   85              0 3.4 6.8 10.5   90               0 3.4 7.0   95                0 3.5   100                 0  ①在0℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每100毫升溶液所加固体硫酸铵的克数。 十五、常见蛋白质分子量参考值 (单位:dalton) 蛋白质 分子量  肌球蛋白[myosin] 甲状腺球蛋白[thyroglobulin] β-半乳糖苷酶[β-galactosidase] 副肌球蛋白[paramyosin] 磷酸化酶a[phosphorylase a] 血清白蛋白[serum albumin] L-氨基酸氧化酶[L-amino acid oxidase] 地氧化氢酶[catalase] 丙酮酸激活酶[pyruvate kinase] 谷氨酸脱氢酶[glutamate dehydrogenase] 亮氨酸氨肽酶[glutamae dehydrogenase] γ-球蛋白,H链[γ-globulin, H chain] 延胡索酸酶(反丁烯二酸酶)[fumarase] 卵白蛋白[ovalbumin] 醇脱氢酶(肝)[alcohol dehydrogenase (liver)] 烯醇酶[enolase] 醛缩酶[aldolase] 肌酸激酶[creatine kinase] 胃蛋白酶原[pepsinogen] D-氨基酸氧化酶[D-amino acid oxidase] 醇脱氢酶(酵母)[alcohol dehydrogenase (yeast)] 甘油醛磷酸脱氢酶[dlyceraldehyde phosphate dehydrogenase] 原肌球蛋白[tropomyosin] 乳酸脱氢酶[lactate dehydrgenase] 胃蛋白酶[pepsin] 转磷酸核糖基酶[phosphoribosyl transferase] 天冬氨酸氨甲酰转移酶,C链[aspertate transcarbamylase, C chain] 羧肽酶 A[carboxypeptidase A] 碳酸酐酶[carbonic anhydrase] 枯草杆菌蛋白酶[subtilisin] γ-球蛋白,L链γ-blobulin,L chain[] 糜蛋白酶原(胰凝乳蛋白酶原)[chymotrypsinogen 胰蛋白酶[trypsin] 木瓜蛋白酶(羧甲基)[papain (carboxymethyl)] β-乳球蛋白[β-lactoglobulin] 烟草花叶病毒外壳蛋白(TWV外壳蛋白)[TWV coat protein 肌红蛋白[myoglobin] 天门冬氨酸氨甲酰转移酶,R链[aspartate transcarbamylase, R chain] 血红蛋白[h(a)emoglobin] Qβ外壳蛋白[Qβ coat protein] 溶菌酶[lysozyme] R17外壳蛋白[R17 coat protein] 核糖核酸酶[ribonuclease或RNase] 细胞色素C[cytochrome C] 糜蛋白酶(胰凝乳蛋白酶)[chymotrypsin] 220,000 165,000 130,000 100,000 94,000 68,000 63,000 60,000 57,000 53,000 53,000 50,000 49,000 43,000 41,000 41,000 40,000 40,000 40,000 37,000 37,000 36,000 36,000 36,000 35,000 35,000 34,000 34,000 29,000 27,600 23,500 25,700 23,300 23,000 18,400 17,500 17,200 17,000 15,500 15,000 14,300 13,750 13,700 11,700 11,000或13,000   十六、常见蛋白质等电点参考值 (单位:pH) 蛋白质 等电点  鲑精蛋白[salmine] 鲱精蛋白[clupeine] 鲟精蛋白[sturline] 胸腺组蛋白[thymohistone] 珠蛋白(人)[globin(human)] 卵白蛋白[ovalbuin] 伴清蛋白[conal bumin] 血清白蛋白[serum albumin] 肌清蛋白[myoal bumin] 肌浆蛋白[myogen A] β-乳球蛋白[β-lactoglobulin] 卵黄蛋白[livetin] γ1—球蛋白(人)[γ1-globulin(human)] γ2—球蛋白(人)[γ2-globulin(human)] 肌球蛋白A[myosin A] 原肌球蛋白[myosin A] 铁传递蛋白[siderophilin] 胎球蛋白[fetuin] 血纤蛋白原[fibrinogen] α-眼晶体蛋白[α-crystallin] β-眼晶体蛋白[β-crystallin] 花生球蛋白[arachin] 伴花生球蛋白[conarrachin] 角蛋白类[keratins] 还原角蛋白[keratein] 胶原蛋白[collagen] 鱼胶[ichthyocol] 白明胶[gelatin] α-酷蛋白[α-casein] β-酷蛋白[β-casein] γ-酷蛋白[γ-casein] α-卵清粘蛋白[α-ovomucoid] α1-粘蛋白[α1-mucoprotein] 卵黄类粘蛋白[vitellomucoid] 尿促性腺激素[urinary gonadotropin] 溶菌酶[lyso zyme] 肌红蛋白[myoglobin] 血红蛋白(人)[hemoglobin(human)] 血红蛋白(鸡)[hemoglobin(hen)] 血红蛋白(马)[hemoglobin(horse)] 血蓝蛋白[hemerythrin] 蚯蚓血红蛋白[chlorocruorin] 血绿蛋白[chlorocruorin] 无脊椎血红蛋白[erythrocruorins] 细胞色素C[cytochrome C] 视紫质[rhodopsin] 促凝血酶原激酶[thromboplastin] α1-脂蛋白[α1-lipoprotein] β1-脂蛋白[β1-lipoprotein] β-卵黄脂磷蛋白[β-lipovitellin] 芜菁黄花病毒[turnip yellow vvirus] 牛痘病毒[vaccinia virus] 生长激素[somatotropin] 催乳激素[prolactin] 胰岛素[insulin] 胃蛋白酶[pepsin] 糜蛋白酶(胰凝乳蛋白酶[chymotrypsin] 牛血清白蛋白[bovine serum albumin] 核糖核酸酶(牛胰)[ribonuclease或Rnase(bovine pancreas)] 甲状腺球蛋白[thyroglobulin] 胸腺核组蛋白[thymonucleohistone] 12.1 12.1 11.71 10.8 7.5 4.71; 4.59 6.8;7.1 4.7-4.9 3.5 6.3 5.1-5.3 4.8-5.0 5.8;6.6 7.3;8.2 5.2-5.5 5.1 5.9 3.4-3.5 5.5-5.8 4.8 6.0 5.1 3.9 3.7-5.0 4.6-4.7 6.5-6.8 4.8-5.2 4.7-5.0 4.0-4.1 4.5 5.8-6.0 3.83-4.41 1.8-2.7 5.5 3.2-3.3 11.0-11.2 6.99 7.07 7.23 6.92 4.6-6.4 5.6 4.3-4.5 4.6-6.2 9.8-10.1 4.47-4.57 5.2 5.5 5.4 5.9 3.75 5.3 6.85 5.73 5.35 1.0左右 8.1 4.9 7.8 4.58 4左右   十七、元素的原子量表(录自1997年国际原子量表,并全部取四位有效数字) 元素 符号 原子量 原子序数  锕 银 铝 镅 氩 砷 砹 金 硼 钡 铍 铋 锫 溴 碳 钙 镉 铈 锎 氯 锔 钴 铬 铯 铜 镝 镊 锿 铕 氟 铁 镄 钫 镓 钆 锗 氢 氦 铪 汞 钬 碘 铟 铱 钾 氪 镧 锂 镥 铹 钔 镁 锰 钼 氮 钠 铌 钕 氖 镍 锘 镎 氧 锇 磷 镁 铅 钯 钷 钋 镨 铂 钚 镭 铷 铼 铑 氡 钌 硫 锑 钪 硒 硅 钐 锡 锶 钽 铽 锝 碲 钍 钛 铊 铥 铀 钒 钨 氙 钇 镱 锌 锆 Ac Ag Al Am Ar As At Au B Ba Be Bi Bk Br C Ca Cd Ce Cf Cl Cm Co Cr Cs Cu Dy Er Es Eu F Fe Fm Fr Ga Gd Ge H He Hf Hg Ho I In Ir K Kr La Li Lu Lr Md Mg Mn Mo N Na Nb Nd Ne Ni No Np O OS P Pa Pb Pd Pm Po Pr Pt Pu Pa Pb Pe Ph Pn Pu S Sb Sc Se Si Sm Sn Sr Ta Tb Tc Te Th Ti Tl Tm U V W Xe Y Yb Zn Zr 227.0 107.9 26.98 [243] 39.95 74.92 [210] 197.0 10.81 137.3 9.012 209.0 [247] 79.90 12.01 40.08 112.4 140.1 [251] 35.45 [247] 58.93 52.00 132.9 63.55 162.5 167.3 [254] 152.0 19.00 55.85 [257] [223] 69.72 157.3 72.59 1.008 4.003 178.5 200.6 164.9 126.9 114.8 192.2 39.10 83.80 138.9 6.941 175.0 [260] [258] 24.31 54.94 95.94 14.01 22.99 92.91 144.2 20.18 58.70 [259] 237.0 16.00 190.2 30.97 231.0 207.2 106.4 [147] [209] 140.9 195.1 [244] 226.0 85.47 186.2 102.9 [222] 101.1 32.06 121.8 44.96 78.96 28.09 150.4 118.7 87.62 180.9 158.9 [97] 127.6 232.0 47.90 204.4 168.9 238.0 50.94 183.9 131.3 88.91 173.0 65.38 91.22 89 47 13 95 18 33 85 79 5 56 4 83 97 35 0 20 48 58 98 17 96 27 24 55 29 66 68 99 63 9 26 100 87 31 64 32 1 2 72 80 67 53 49 77 19 36 57 3 71 103 101 12 25 42 7 11 41 60 10 28 102 93 8 76 15 91 82 46 61 84 59 78 94 88 37 75 45 86 44 16 51 21 34 14 62 50 38 73 65 43 52 90 22 81 69 92 23 74 54 39 70 30 40   r为离心机头的半径(角头),或离心管中轴底部内壁到离心机转轴中心的距离(甩平头),单位为厘米。 rpm为离心机每分钟的转速。 RCF为相对离心力,以地心引力即重力加速度的倍数来表示,一般用g(或数字×g)表示。 附图11是由下述公式计算而来的: RCF = 1.119 × 10-5× r × (rpm)2 将离心机转数换算为离心力时,首先,在r标尺上取已知的半径和rpm标尺上取已知的离心机转数,然后,将这两点间划一条直线,在图中间RCF标尺上的交叉点即为相应离心力数值。注意,若已知转数值处于rpm标尺的右边,则应读取RCF标尺右边的数值。同样,转数值处于rpm标尺左边,则读取RCF标尺左边的数值。