十、常用蛋白质分子量标准参照物
高分子量标准参照 中分子量标准参物 低分子量标准参照
蛋白质
Mr
蛋白质
Mr
蛋白质
Mr
肌球蛋白
β-半乳糖苷酶
磷酸化酶B
牛血清清蛋白
过氧化氢酶
醛缩酶
212 000
116 000
97 400
66 200
57 000
40 000
磷酸化酶B
牛血清清蛋白
谷氨酸脱氢酶
卵清蛋白
醛缩酶
碳酸酐酶
大豆胰蛋白酶抑制剂
溶菌酶
97 400
66 200
55 000
42 700
40 000
31 000
21 500
14 400
碳酸酐酶
大豆胰蛋白酶制剂
马心肌球蛋白
溶菌酶
肌球蛋白(F1)
肌球蛋白(F2)
肌球蛋白(F3)
31 000
21 500
16 900
14 400
8 100
6 200
2 500
十一、层析法常用数据表及性质
离子交换纤维素
目前常用的离子交换纤维素列于下表
DEAE-
纤维素
形状
长度
(微米)
交换当量
(毫克当量/克)
蛋白吸附容量 (毫克/克)
床体积(毫升/克)
胰岛素(pH8.5)
牛血清清蛋白(pH8.5)
pH6.0
pH7.5
DE-22
DE-23
DE-32
DE-52
CM-纤维素
CM-22
CM-23
CM-32
CM-52
改良纤维性 *
同上(除细粒)
微粒性(干粉)
同上(溶胀)
改良纤维性
同上(除细粒)
微粒性(干粉)
同上(溶胀)
12~400
18~400
24~63
24~63
12~400
18~400
24~63
24~63
1.0±0.1
1.0±0.1
1.0±0.1
1.0±0.1
0.6±0.06
0.6±0.06
1.0±0.1
1.0±0.1
750
750
850
850
溶菌酶
(pH5.0)
600
600
1,260
1,260
450
450
660
660
7S-γ球蛋白(pH5.0)
150
150
400
400
7.7
8.3
6.0
6.0
pH5.0
7.7
9.1
6.8
6.8
7.7
9.1
6.3
6.3
pH7.5
7.7
9.1
6.7
6.7
*:英国Whatman厂的型号,原来有旧型号如DE-1,为长纤维性,长度1000微米。还有DE-11,纤维性,50~250微米,对牛血清清蛋白的吸附容量仅为130毫克/克。
(二)聚丙烯酰胺凝胶的技术数据
型号
排阻的下限
(Mr)
分级分离的范围
(Mr)
膨胀后的床体积
(mL/g干凝胶)
膨胀所需最少时间
(室温,小时)
Bio-gel-P-2
Bio-gel-P-4
Bio-gel-P-6
Bio-gel-P-10
Bio-gel-P-30
Bio-gel-P-60
Bio-gel-P-100
Bio-gel-P-150
Bio-gel-P-200
Bio-gel-P-300
1 600
3 600
4 600
10 000
30 000
60 000
100 000
150 000
200 000
300 000
200~2 000
500~4 000
1 000~5 000
5 000~17 000
20 000~50 000
30 000~70 000
40 000~100 000
50 000~150 000
80 000~300 000
100 000~400 000
3.8
5.8
8.8
12.4
14.9
19.0
19.0
24.0
34.0
40.0
2~4
2~4
2~4
2~4
10~12
10~12
24
24
48
48
注:上述各种型号的凝胶都是亲水性的多孔颗粒,在水和缓冲溶液中很容易膨胀,生产厂为Bio-Rad Laboratories,Rich-mond, California, U. S. A.
(三)琼脂糖凝胶的技术数据
(琼脂糖是琼脂内非离子型的组分,它在0 ~ 4℃,pH 4~9范围内是稳定的。)
名称、型号
凝胶内琼脂糖百分
含量(W/W)
排阻的下限(Mr)
分级分离的范围(Mr)
生产厂商
Sagavac 10
Sagavac 8
Sagavac6
Sagavac4
Sagavac2
10
8
6
4
2
2.5×105
7×105
2×106
15×106
150×106
1×104~2.5×105
2.5×104~7×105
5×104~2×106
2×105~15×106
5×105~15×107
Seravac Laboratories,
Maidenhead, England
Bio-GelA-0.5M
Bio-GelA-1.5M
Bio-GelA-5M
Bio-GelA-15M
Bio-GelA-50M
Bio-GelA-150M
10
8
6
4
2
1
0.5×105
1.5×106
5×106
15×105
50×106
150×106
<1×104~2.5×106
<1×104~1.5×106
1×104~5×106
4×104~15×106
1×105~50×106
1×106~150×106
Bio-Rad Laboratories,
California,U.S.A.
(四)凝胶过滤层析介质的技术数据
凝胶过滤介质名称
分离范围
颗粒
大小
(μm)
特性/应用
pH稳定性工作
耐压(Mpa)
最 快
流 速
(cm/h)
Superdex 30
Superdex 75
Superdex200
Superose 6
Superose 12
Sephacryl
S-100 HR
Sephacryl
S-200 HR
Sephacryl
S-300 HR
Sephacryl
S-400 HR
Sepharose 6
Fast Flow
Sepharose 4
Fast Flow
Sepharose 2B
Sepharose 4B
Sepharose 6B
Sepharose
CL-2B
Sepharose
CL-4B
Sepharose
CL-6B
<10000
3000~70000
3 000 10000~600000
5000~5×106
1000~300000
1000~ 100000
5000~250000
10000~1.5×106
20000~8×106
10000~4×106
60000~20×106
70000~40×106
60000~20×106
10000~4×106
70000~40×106
60000~20×105
10000~4×106
24~44
24~44
24~44
20~40
20~40
25~75
25~75
25~75
25~75
平均90
平均90
60~200
45~165
45~165
60~200
45~165
45~165
肽类、寡糖、小蛋白等
重组蛋白、细胞色素
单抗、大蛋白
蛋白、肽类、多糖、核酸
蛋白、肽类、寡糖、多糖
肽类、小蛋白
蛋白,如清蛋白
蛋白、抗体
多糖、具延伸结构的大分
子如蛋白多糖、脂质体
巨大分子
巨大分子如重组乙型肝
炎表面抗原
蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子如核酸和多糖(蛋白多糖)
蛋白、多糖
蛋白、多糖
蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子如核酸和多糖(蛋白多糖)
蛋白、多糖
蛋白、多糖
3~12
3~12
3~12
3~12
3~12
3~11
3~11
3~11
3~11
2~12
2~12
4~9
4~9
4~9
3~13
3~13
0.3
0.3
0.3
0.4
0.7
0.2
0.2
0.2
0.2
0.1
0.1
0.004
0.008
0.02
0.005
0.012
0.02
100
100
100
30
30
20~39
20~39
20~39
20~39
300
250
10
11.5
14
15
26
30
凝胶过滤介质名称
分离
范围
颗粒
大小
(μm)
特性/应用
pH
稳定性
工作
干凝胶
溶胀体积
(mL/g)
溶胀最少
平衡时间(h)
最快
流速
(cm/h)
室温
沸水
SephadexG-10
SephadexG-15
SephadexG-25 Coarse
SephadexG-25Medium
SephadexG-25 Fine
SephadexG-25 Superfine
SephadexG-50
Coarse
SephadexG-50 Medium
SephadexG-50 Fine
SephadexG-50 Superfine
SephadexG-75
SephadexG-75 Superfine
SephadexG-100
SephadexG-100
Superfine
SephadexG-150
SephadexG-150
Superfine
SephadexG-200
SephadexG-200
Superfine
<700
<1500
1000~5000
1000~5 000
1000~5000
1000~5000
1500~30000
1500~30000
1500~30000
1500~30000
3000~80000
3000~70000
4000~1.5×105
4000~1×105
5000~3×105
5000~1.5×105
5000~6×105
5000~2.5×105
干粉40~120
干粉40~120
干粉100~300
干粉50~150
干粉20~80
干粉10~40
干粉100~300
干粉50~150
干粉20~80
干粉10~40
干粉40~120
干粉10~40
干粉40~120
干粉10~40
干粉40~120
干粉10~40
干粉40~120
干粉10~40
脱盐及交换缓冲液用
脱盐及交换缓冲液用
脱盐及交换缓冲液用
脱盐及交换缓冲液用
小分子蛋白质分离
小分子蛋白质分离
小分子蛋白质分离
小分子蛋白质分离
中等蛋白质分离
中等蛋白质分离
中等蛋白质分离
中等蛋白质分离
稍大蛋白质分离
稍大蛋白质分离
较大蛋白质分离
较大蛋白质分离
2~13
2~13
2~13
2~13
2~13
2~13
2~10
2~10
2~10
2~10
2~10
2~10
2~10
2~10
2~10
2~10
2~10
2~10
2~3
2.5~3.5
4~6
4~6
4~6
4~6
9~11
9~11
9~11
9~11
12~15
12~15
15~20
15~20
20~30
18~22
30~40
20~25
3
3
6
6
6
6
6
6
6
6
24
24
48
48
72
72
72
72
1
1
2
2
2
2
2
2
2
2
3
3
5
5
5
5
5
5
2~5
2~5
2~5
2~5
2~5
2~5
2~5
2~5
2~5
2~5
72
16
47
11
21
5.6
11
2.8
SephadexLH20
( 嗜脂性 )
100~
4 000
干粉
25~106
特别为使用有机溶剂而设计。适合分离脂类、胆固醇、脂肪酸、激素、维生素及其他小生物分子。此分离范围指以酒精为溶剂的分离
(五)离子交换层析介质的技术数据
离子交换介质名称
最高载量
颗粒大小(μm)
特性/应用
pH稳定性工作
耐压
(MPa)
最快
流速
(cm/h)
SOURCE 15 Q
25mg
蛋白
15
2~12
4
1800
SOURCE 15 S
25mg
蛋白
15
2~12
4
1800
Q Sepharose
H.P.
70mg
BSA
24~44
2~12
0.3
150
SP Sepharose
H.P.
55mg
核糖核酸酶
24~44
3~12
0.3
150
Q Sepharose
F.F.
120mg
HSA
45~165
2~12
0.2
400
SP Sepharose
F.F.
75mg
BSA
45~165
4~13
0.2
400
DEAE Sepharose
F.F.
110mg
HSA
45~165
2~9
0.2
300
CM Sepharose
F.F.
50mg
核糖核酸酶
100~300
6~13
0.2
300
Q Sepharose
Big Beads
100~300
2~12
0.3
1200~1800
SP Sepharose
Big Beads
60mg
BSA
干粉
40~120
4~12
0.3
1200~1800
离子交换
介质名称
最高
载量
颗粒
大小
(μm)
特性/应用
pH稳定性
工作
耐压
(MPa)
最快
流速
(cm/h)
QAE Sephadex
A-25
1.2mg甲状腺球蛋白
80mgHSA
干粉
40~120
纯化低分子量蛋白、多肽、核苷以及巨大分子(Mr>200000),在工业传统应用上具有重要作用
2~10
0.11
475
QAE Sephadex
A-50
1.2mg甲状腺球蛋白
80mgHSA
干粉
40~120
批量生产和预处理用,分离中等大小的生物分子
(30~200000)
2~11
0.01
45
SP Sephadex
C-25
1.1mg IgG
70mg牛羰合血红蛋白230mg核糖核酸酶
干粉
40~120
纯化低分子量蛋白、多肽、核苷以及巨大分子(Mr>200000),在工业传统应用上具有重要作用
2~10
0.13
475
SP Sephadex
C-50
8mg IgG
110mg牛羰合
血红蛋白
干粉
40~120
批量生产和预处理用,分离中等大小的生物分子
(30~200000)
2~10
0.01
45
DEAE Sephadex
A-25
1mg甲状
腺球蛋白
30mg HAS
140mg a-乳清
蛋白
干粉
40~120
纯化低分子量蛋白、多肽、核苷以及巨大分子(Mr>200 000),在工业传统应用上具有重要作用
2~9
0.11
475
DEAE Sephadex
A-50
2mg 甲状
腺球蛋白
110mg HSA
干粉
40~120
批量生产和预处理用,分离中等大小的生物分子(Mr>200 000),在工作传统应用上具有重要作用
2~9
0.11
45
CM Sephadex
C-25
1.6mg IgG
70mg牛羰合血红蛋白190mg核糖核酸酶
干粉
40~120
纯化低分子量蛋白、多肽、核苷以及巨大分子(Mr>200 000),在工业传统应用上具有重要作用
6~13
0.13
475
CM Sephadex
C-50
7mg IgG
140mg牛羰合
血红蛋白120mg核糖核酸酶
干粉
40~120
批量生产和预处理用,分离中等大小的生物分子
(30~200000)
6~10
0.01
45
十二、常用缓冲溶液的配制方法
甘氨酸–盐酸缓冲液(0.05mol/L)
X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI,再加水稀释至200毫升
pH
X
Y
pH
X
Y
2.0
2.4
2.6
2.8
50
50
50
50
44.0
32.4
24.2
16.8
3.0
3.2
3.4
3.6
50
50
50
50
11.4
8.2
6.4
5.0
甘氨酸分子量 = 75.07,0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2.邻苯二甲酸–盐酸缓冲液(0.05 mol/L)
X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl,再加水稀释到20毫升
pH(20℃)
X
Y
pH(20℃)
X
Y
2.2
2.4
2.6
2.8
3.0
5
5
5
5
5
4.070
3.960
3.295
2.642
2.022
3.2
3.4
3.6
3.8
5
5
5
5
1.470
0.990
0.597
0.263
邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23,0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升
3.磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液
pH
0.2mol/L Na2HPO4
(毫升)
0.1mol/L
柠檬酸
(毫升)
pH
0.2mol/L Na2HPO4
(毫升)
0.1mol/L
柠檬酸
(毫升)
2.2
2.4
2.6
2.8
3.0
3.2
3.4
3.6
3.8
4.0
4.24.4
4.6
4.8
5.0
0.40
1.24
2.18
3.17
4.11
4.94
5.70
6.44
7.10
7.71
8.28
8.82
9.35
9.86
10.30
10.60
18.76
17.82
16.83
15.89
15.06
14.30
13.56
12.90
12.29
11.72
11.18
10.65
10.14
9.70
5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
6.2
6.4
6.6
6.87.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0
10.72
11.15
11.60
12.09
12.63
13.22
13.85
14.55
15.45
16.47
17.39
18.17
18.73
19.15
19.45
9.28
8.85
8.40
7.91
7.37
6.78
6.15
5.45
4.55
3.53
2.61
1.83
1.27
0.85
0.55
Na2HPO4分子量 = 14.98,0.2 mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4-2H2O分子量 = 178.05,0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量 = 210.14,0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
4.柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液
pH
钠离子浓度
(mol/L)
柠檬酸(克)
C6H8O7·H2O
氢氧化钠(克)
NaOH 97%
盐酸(毫升)
HCl(浓)
最终体积(升)①
2.2
3.1
3.3
4.3
5.3
5.8
6.5
0.20
0.20
0.20
0.20
0.35
0.45
0.38
210
210
210
210
245
285
266
84
83
83
83
144
186
156
160
116
106
45
68
105
126
10
10
10
10
10
1010
①使用时可以每升中加入1克克酚,若最后pH值有变化,再用少量50%?氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。
5.柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液(0.1 mol/L)
pH
mol/L
柠檬酸
(毫升)
mol/L
柠檬酸钠
(毫升)
pH
mol/L
柠檬酸
(毫升)
mol/L
柠檬酸钠
(毫升)
3.0
3.2
3.4
3.6
3.8
4.0
4.2
4.4
4.6
4.8
18.6
17.2
16.0
14.9
14.0
13.1
12.3
11.4
10.3
9.2
1.42.8
4.0
5.1
6.0
6.9
7.7
8.6
9.7
10.8
5.0
5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
6.2
6.4
6.6
8.2
7.3
6.4
5.5
4.7
3.8
2.8
2.0
1.4
11.8
12.7
13.6
14.5
15.3
16.2
17.2
18.0
18.6
柠檬酸C6H8O7·H2O:分子量210.14,0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O:分子量294.12,0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。
6.乙酸–乙酸钠缓冲液(0.2 mol/L)
pH(18℃)
mol/L
NaAc
(毫升)
mol/L
HAc
(毫升)
pH(18℃)
mol/L
NaAc
(毫升)
mol/L
HAc
(毫升)
2.6
3.8
4.0
4.2
4.4
4.6
0.75
1.20
1.80
2.65
3.70
4.90
9.25
8.80
8.20
7.35
6.30
5.10
4.8
5.0
5.2
5.4
5.6
5.8
5.90
7.00
7.90
8.60
9.10
9.40
4.10
3.00
2.10
1.40
0.90
0.60
Na2Ac·3H2O分子量 = 136.09,0.2 mol/L溶液为27.22克/升。
7.磷酸盐缓冲液
(1)磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液(0.2)
pH
mol/L
Na2HPO4
(毫升)
mol/L
NaH2PO4
(毫升)
pH
mol/L
Na2HPO4
(毫升)
mol/L
NaH2PO4
(毫升)
5.8
5.9
6.0
6.1
6.2
6.3
6.4
6.5
6.6
6.7
6.8
6.9
8.0
10.0
12.3
15.0
18.5
22.5
26.5
31.5
37.5
43.5
49.5
55.0
92.0
90.0
87.7
85.0
81.5
77.5
73.5
68.5
62.5
56.5
51.0
45.0
7.0
7.1
7.2
7.3
7.4
7.5
7.6
7.7
7.8
7.9
8.0
61.0
67.0
72.0
77.0
81.0
84.0
87.0
89.5
91.5
93.094.7
39.0
33.0
28.0
23.0
19.0
16.0
13.0
10.5
8.5
7.0
5.3
Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05,0.2 mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量 = 358.22,0.2 mol/L溶液为71.64克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量 = 156.03,0.2 mol/L溶液为31.21克/升。
(2)磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液(1/15 mol/L)
pH
mol/L/15Na2HPO4
(毫升)
mol/L//15KH2PO4
(毫升)
pH
mol/L//15Na2HPO4
(毫升)
mol/L//15KH2PO4
(毫升)
4.92
5.29
5.91
6.24
6.47
6.64
6.81
6.98
0.10
0.50
1.00
2.00
3.00
4.00
5.00
6.00
9.90
9.50
9.00
8.00
7.00
6.00
5.00
4.00
7.17
7.38
7.73
8.04
8.34
8.67
8.18
7.00
8.00
9.00
9.50
9.75
9.90
10.00
3.00
2.00
1.00
0.50
0.25
0.10
0
Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05,1/15M溶液为11.876克/升。
KH2PO4分子量 = 136.09,1/15M溶液为9.078克/升。
8.磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液(0.05M)
X毫升0.2M K2PO4 + Y毫升0.2N NaOH加水稀释至29毫升
pH(20℃)
X (毫升)
Y(毫升)
pH(20℃)
X (毫升)
Y(毫升)
5.8
6.0
6.2
6.4
6.6
6.8
5
5
5
5
5
5
0.372
0.570
0.860
1.260
1.780
2.365
7.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0
5
5
5
5
5
5
2.963
3.500
3.950
4.280
4.520
4.680
9.巴比妥钠-盐酸缓冲液(18℃)
pH
0.04M巴比妥钠溶液
0.2V盐酸
pH
0.04M巴比妥钠溶液(毫升)
0.2N盐酸(毫升)
6.8
7.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0
8.2
100100
100
100
100
100
100
100
18.4
17.8
16.715.3
13.4
11.47
9.39
7.21
8.4
8.6
8.8
9.0
9.2
9.4
9.6
100
100
100
100
100
100
100
100
5.21
3.82
2.52
1.65
1.13
0.70
0.35
巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M溶液为8.25克/升
10.Tris–盐酸缓冲液(0.05M,25℃)
50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后,加水稀释至100毫升。
pH
X(毫升)
pH
X(毫升)
7.10
7.20
7.30
7.40
7.50
7.60
7.70
7.80
7.90
8.00
45.7
44.7
43.4
42.0
40.3
38.5
36.6
34.5
32.029.2
8.10
8.20
8.30
8.40
8.50
8.60
8.70
8.80
8.90
26.2
22.919.9
17.2
14.7
12.4
10.3
8.5
7.0
三羟甲基氨基甲烷(Tris)HOCH2 CH2OH
C
HOCH2 NH2
分子量=121.14;
0.1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳,使用时注意将瓶盖严。
11.硼酸–硼砂缓冲液(0.2M硼酸根)
pH
0.05M硼砂(毫升)
0.2M硼砂(毫升)
pH
0.05M硼砂(毫升)
0.2M硼酸(毫升)
7.4
7.6
7.8
8.0
1.01.5
2.0
3.0
9.0
8.5
8.0
7.0
8.2
8.4
8.7
9.0
3.5
4.5
6.0
8.0
6.5
5.5
4.0
2.0
硼砂Na2B4O7·H2O,分子量=381.43;0.05M溶液(=0.2M硼酸根)含19.07克/升。
硼酸H2BO3,分子量=61.84,0.2M溶液为12.37克/升。
硼砂易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存。
11.硼酸-硼砂缓冲液(0.2M硼酸根)
pH
0.05M硼砂(毫升)
0.2M硼酸(毫升)
pH
0.05M硼砂(毫升)
0.2M硼酸(毫升)
7.4
7.6
7.8
8.0
1.0
1.5
2.0
3.0
9.08.5
8.0
7.0
8.2
8.4
8.7
9.0
3.5
4.5
6.0
8.0
6.5
5.5
4.02.0
硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液(=0.2M硼酸根)含19.07克/升。
硼酸H2BO3,分子量=61.84, 0.2M溶液为12.37克/升。
硼砂 易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存。
12.甘氨酸–氢氧化钠缓冲液(0.05M)
X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升0.2NnaOH加水稀释至200毫升
pH
X
Y
pH
X
Y
8.6
8.8
9.0
9.2
9.4
50
50
50
50
50
4.0
6.0
8.8
12.0
16.8
9.6
9.8
10.0
10.4
10.6
50
50
50
50
50
22.4
27.2
32.0
38.6
45.5
甘氨酸分子量=75.07;0.2M溶液含15.01克/升。
13.硼砂-氢氧化钠缓冲液(0.05M硼酸根)
X毫升0.05M硼砂+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至200毫升
pH
X
Y
pH
X
Y
9.3
9.4
9.6
50
50
50
6.011.0
23.0
9.8
10.0
10.1
50
50
50
34.0
43.0
46.0
硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液为19.07克/升。
14.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1M)
Ca2+、Mg2+存在时不得使用
pH
0.1MNa2CO3(毫升)
0.1MN2HCO3(毫升)
20℃
37℃
9.16
9.40
9.51
9.78
9.90
10.14
10.28
10.53
10.83
8.77
9.12
9.40
9.50
9.72
9.90
10.08
10.28
10.57
1
2
3
4
5
6
7
8
9
9
8
7
6
5
4
3
2
1
Na2CO2·10H2O分子量=286.2;0.1M溶液为28.62克/升。
N2HCO3分子量=84.0;0.1M溶液为8.40克/升。
15.“PBS”缓冲液
PH
7.6
7.4
7.2
7.0
H2O
NaCl
Na2HPO4
NaH2PO4
1000
8.5
2.2
0.1
1000
8.5
2.2
0.2
1000
8.5
2.2
0.3
100ml
8.5g
2.2g
0.4g
十三、实验室中常用酸碱的比重和浓度
名称
分子式
分子量
比重
面分浓度
%(W/W)
当量浓度
(粗略)N
配1升1N溶液所需毫升数
盐酸
HCl
36.47
1.19
37.2
12.0
84
1.18
35.4
11.8
1.10
20.0
6.0
硫酸
H2SO4
98.09
1.84
95.6
36.0
28
1.18
24.8
6.0
硝酸
HNO2
63.02
1.42
70.98
16.0
63
1.40
65.3
14.5
1.20
32.36
6.1
冰乙酸
CH3COOH
60.05
1.05
99.5
17.4
59
乙酸
CH3COOH
98.06
36
6.0
磷酸
H2PO4
35.05
1.71
85.0
15,30,45
(依反应而定)
67(以15N计)
氨水
NH4OH
0.90
15
67
0.904
27.0
14.3
70
0.91
25.0
13.4
0.96
10.0
5.6
氢氧化
钠溶液
NaOH
40.0
1.5
50.0
19
53
十四、硫酸铵饱和度的常用表
1.调整硫酸铵溶液饱和度计算表(25℃)
硫整硫酸铵终浓度,%饱和度
10
20
25
30
33
35
40
45
50
55
60
65
70
75
80
90
100
每1升溶液加固体硫酸铵的克数①
硫
酸铵
初
浓
度
,
%
饱和
度
0
56
114
144
176
196
209
243
277
313
351
390
430
472
516
561
662
767
10
57
86
118
137
150
183
216
251
288
326
365
406
449
494
592
694
20
29
59
78
91
123
155
190
225
262
300
340
382
424
520
619
25
30
49
61
93
125
158
193
230
267
307
348
390
485
583
30
19
30
62
94
127
162
198
235
273
314
356
449
546
33
12
43
74
107
142
177
214
252
292
333
426
522
35
31
63
94
129
164
200
238
178
319
411
506
40
31
63
97
132
168
205
245
285
375
469
45
32
65
99
134
171
210
250
339
431
50
33
66
101
137
176
214
302
392
55
33
67
103
141
179
264
353
60
34
69
105
143
227
314
65
34
70
107
190
275
70
35
72
153
237
75
36
115
198
80
77
157
90
79
①在25℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每升溶液所加固体硫酸铵的克数。
调整硫酸铵溶液饱和度计算表(0℃)
在0℃硫酸铵终浓度,%饱和度
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
70
75
80
85
90
95
100
每100毫升溶液加固体硫酸铵的克数①
硫酸铵初浓度
,
%
饱和度
0
10.6
13.4
16.4
19.4
22.6
25.8
29.1
32.6
36.1
39.8
43.6
47.6
51.6
55.9
60.3
65.0
69.7
5
7.9
10.8
13.7
16.6
19.7
22.9
26.2
29.6
33.1
36.8
40.5
44.4
48.4
52.6
57.0
61.5
66.2
10
5.3
8.1
10.9
13.9
16.9
20.0
23.3
26.6
30.1
33.7
37.4
41.2
45.2
49.3
53.6
58.1
62.7
15
2.6
5.4
8.2
11.1
14.1
17.2
20.4
23.7
27.1
30.6
34.3
38.1
42.0
45.0
50.3
54.7
59.2
20
0
2.7
5.5
8.3
11.3
14.3
17.5
20.7
24.1
27.6
31.2
34.9
38.7
42.7
46.9
51.2
55.7
25
0
2.7
5.6
8.4
11.5
14.6
17.9
21.1
24.5
28.0
31.7
35.5
39.5
43.6
47.8
52.2
30
0
2.8
5.6
8.6
11.7
14.8
18.1
21.4
24.9
28.5
32.3
36.2
40.2
44.5
48.8
35
0
2.8
5.7
8.7
11.8
15.1
18.4
21.8
25.4
29.1
32.9
36.9
41.0
45.3
40
0
2.9
5.8
8.9
12.0
15.3
18.7
22.2
25.8
29.6
33.5
37.6
41.8
45
0
2.9
5.9
9.0
12.3
15.5
19.0
22.6
26.3
30.2
34.2
38.3
50
0
3.0
6.0
9.2
12.5
15.9
19.4
23.0
26.8
30.8
34.8
55
0
3.1
6.2
9.5
12.9
16.4
19.7
23.5
27.3
31.3
60
0
3.1
6.3
9.7
13.2
16.8
20.1
23.1
27.9
65
0
3.1
6.3
9.7
132
16.8
20.5
24.4
70
0
3.2
6.5
9.9
13.4
17.1
20.9
75
0
3.2
6.6
10.1
13.7
17.4
80
0
3.3
6.7
10.3
13.9
85
0
3.4
6.8
10.5
90
0
3.4
7.0
95
0
3.5
100
0
①在0℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每100毫升溶液所加固体硫酸铵的克数。
十五、常见蛋白质分子量参考值 (单位:dalton)
蛋白质
分子量
肌球蛋白[myosin]
甲状腺球蛋白[thyroglobulin]
β-半乳糖苷酶[β-galactosidase]
副肌球蛋白[paramyosin]
磷酸化酶a[phosphorylase a]
血清白蛋白[serum albumin]
L-氨基酸氧化酶[L-amino acid oxidase]
地氧化氢酶[catalase]
丙酮酸激活酶[pyruvate kinase]
谷氨酸脱氢酶[glutamate dehydrogenase]
亮氨酸氨肽酶[glutamae dehydrogenase]
γ-球蛋白,H链[γ-globulin, H chain]
延胡索酸酶(反丁烯二酸酶)[fumarase]
卵白蛋白[ovalbumin]
醇脱氢酶(肝)[alcohol dehydrogenase (liver)]
烯醇酶[enolase]
醛缩酶[aldolase]
肌酸激酶[creatine kinase]
胃蛋白酶原[pepsinogen]
D-氨基酸氧化酶[D-amino acid oxidase]
醇脱氢酶(酵母)[alcohol dehydrogenase (yeast)]
甘油醛磷酸脱氢酶[dlyceraldehyde phosphate dehydrogenase]
原肌球蛋白[tropomyosin]
乳酸脱氢酶[lactate dehydrgenase]
胃蛋白酶[pepsin]
转磷酸核糖基酶[phosphoribosyl transferase]
天冬氨酸氨甲酰转移酶,C链[aspertate transcarbamylase, C chain]
羧肽酶 A[carboxypeptidase A]
碳酸酐酶[carbonic anhydrase]
枯草杆菌蛋白酶[subtilisin]
γ-球蛋白,L链γ-blobulin,L chain[]
糜蛋白酶原(胰凝乳蛋白酶原)[chymotrypsinogen
胰蛋白酶[trypsin]
木瓜蛋白酶(羧甲基)[papain (carboxymethyl)]
β-乳球蛋白[β-lactoglobulin]
烟草花叶病毒外壳蛋白(TWV外壳蛋白)[TWV coat protein
肌红蛋白[myoglobin]
天门冬氨酸氨甲酰转移酶,R链[aspartate transcarbamylase, R chain]
血红蛋白[h(a)emoglobin]
Qβ外壳蛋白[Qβ coat protein]
溶菌酶[lysozyme]
R17外壳蛋白[R17 coat protein]
核糖核酸酶[ribonuclease或RNase]
细胞色素C[cytochrome C]
糜蛋白酶(胰凝乳蛋白酶)[chymotrypsin]
220,000
165,000
130,000
100,000
94,000
68,000
63,000
60,000
57,000
53,000
53,000
50,000
49,000
43,000
41,000
41,000
40,000
40,000
40,000
37,000
37,000
36,000
36,000
36,000
35,000
35,000
34,000
34,000
29,000
27,600
23,500
25,700
23,300
23,000
18,400
17,500
17,200
17,000
15,500
15,000
14,300
13,750
13,700
11,700
11,000或13,000
十六、常见蛋白质等电点参考值 (单位:pH)
蛋白质
等电点
鲑精蛋白[salmine]
鲱精蛋白[clupeine]
鲟精蛋白[sturline]
胸腺组蛋白[thymohistone]
珠蛋白(人)[globin(human)]
卵白蛋白[ovalbuin]
伴清蛋白[conal bumin]
血清白蛋白[serum albumin]
肌清蛋白[myoal bumin]
肌浆蛋白[myogen A]
β-乳球蛋白[β-lactoglobulin]
卵黄蛋白[livetin]
γ1—球蛋白(人)[γ1-globulin(human)]
γ2—球蛋白(人)[γ2-globulin(human)]
肌球蛋白A[myosin A]
原肌球蛋白[myosin A]
铁传递蛋白[siderophilin]
胎球蛋白[fetuin]
血纤蛋白原[fibrinogen]
α-眼晶体蛋白[α-crystallin]
β-眼晶体蛋白[β-crystallin]
花生球蛋白[arachin]
伴花生球蛋白[conarrachin]
角蛋白类[keratins]
还原角蛋白[keratein]
胶原蛋白[collagen]
鱼胶[ichthyocol]
白明胶[gelatin]
α-酷蛋白[α-casein]
β-酷蛋白[β-casein]
γ-酷蛋白[γ-casein]
α-卵清粘蛋白[α-ovomucoid]
α1-粘蛋白[α1-mucoprotein]
卵黄类粘蛋白[vitellomucoid]
尿促性腺激素[urinary gonadotropin]
溶菌酶[lyso zyme]
肌红蛋白[myoglobin]
血红蛋白(人)[hemoglobin(human)]
血红蛋白(鸡)[hemoglobin(hen)]
血红蛋白(马)[hemoglobin(horse)]
血蓝蛋白[hemerythrin]
蚯蚓血红蛋白[chlorocruorin]
血绿蛋白[chlorocruorin]
无脊椎血红蛋白[erythrocruorins]
细胞色素C[cytochrome C]
视紫质[rhodopsin]
促凝血酶原激酶[thromboplastin]
α1-脂蛋白[α1-lipoprotein]
β1-脂蛋白[β1-lipoprotein]
β-卵黄脂磷蛋白[β-lipovitellin]
芜菁黄花病毒[turnip yellow vvirus]
牛痘病毒[vaccinia virus]
生长激素[somatotropin]
催乳激素[prolactin]
胰岛素[insulin]
胃蛋白酶[pepsin]
糜蛋白酶(胰凝乳蛋白酶[chymotrypsin]
牛血清白蛋白[bovine serum albumin]
核糖核酸酶(牛胰)[ribonuclease或Rnase(bovine pancreas)]
甲状腺球蛋白[thyroglobulin]
胸腺核组蛋白[thymonucleohistone]
12.1
12.1
11.71
10.8
7.5
4.71; 4.59
6.8;7.1
4.7-4.9
3.5
6.3
5.1-5.3
4.8-5.0
5.8;6.6
7.3;8.2
5.2-5.5
5.1
5.9
3.4-3.5
5.5-5.8
4.8
6.0
5.1
3.9
3.7-5.0
4.6-4.7
6.5-6.8
4.8-5.2
4.7-5.0
4.0-4.1
4.5
5.8-6.0
3.83-4.41
1.8-2.7
5.5
3.2-3.3
11.0-11.2
6.99
7.07
7.23
6.92
4.6-6.4
5.6
4.3-4.5
4.6-6.2
9.8-10.1
4.47-4.57
5.2
5.5
5.4
5.9
3.75
5.3
6.85
5.73
5.35
1.0左右
8.1
4.9
7.8
4.58
4左右
十七、元素的原子量表(录自1997年国际原子量表,并全部取四位有效数字)
元素
符号
原子量
原子序数
锕
银
铝
镅
氩
砷
砹
金
硼
钡
铍
铋
锫
溴
碳
钙
镉
铈
锎
氯
锔
钴
铬
铯
铜
镝
镊
锿
铕
氟
铁
镄
钫
镓
钆
锗
氢
氦
铪
汞
钬
碘
铟
铱
钾
氪
镧
锂
镥
铹
钔
镁
锰
钼
氮
钠
铌
钕
氖
镍
锘
镎
氧
锇
磷
镁
铅
钯
钷
钋
镨
铂
钚
镭
铷
铼
铑
氡
钌
硫
锑
钪
硒
硅
钐
锡
锶
钽
铽
锝
碲
钍
钛
铊
铥
铀
钒
钨
氙
钇
镱
锌
锆
Ac
Ag
Al
Am
Ar
As
At
Au
B
Ba
Be
Bi
Bk
Br
C
Ca
Cd
Ce
Cf
Cl
Cm
Co
Cr
Cs
Cu
Dy
Er
Es
Eu
F
Fe
Fm
Fr
Ga
Gd
Ge
H
He
Hf
Hg
Ho
I
In
Ir
K
Kr
La
Li
Lu
Lr
Md
Mg
Mn
Mo
N
Na
Nb
Nd
Ne
Ni
No
Np
O
OS
P
Pa
Pb
Pd
Pm
Po
Pr
Pt
Pu
Pa
Pb
Pe
Ph
Pn
Pu
S
Sb
Sc
Se
Si
Sm
Sn
Sr
Ta
Tb
Tc
Te
Th
Ti
Tl
Tm
U
V
W
Xe
Y
Yb
Zn
Zr
227.0
107.9
26.98
[243]
39.95
74.92
[210]
197.0
10.81
137.3
9.012
209.0
[247]
79.90
12.01
40.08
112.4
140.1
[251]
35.45
[247]
58.93
52.00
132.9
63.55
162.5
167.3
[254]
152.0
19.00
55.85
[257]
[223]
69.72
157.3
72.59
1.008
4.003
178.5
200.6
164.9
126.9
114.8
192.2
39.10
83.80
138.9
6.941
175.0
[260]
[258]
24.31
54.94
95.94
14.01
22.99
92.91
144.2
20.18
58.70
[259]
237.0
16.00
190.2
30.97
231.0
207.2
106.4
[147]
[209]
140.9
195.1
[244]
226.0
85.47
186.2
102.9
[222]
101.1
32.06
121.8
44.96
78.96
28.09
150.4
118.7
87.62
180.9
158.9
[97]
127.6
232.0
47.90
204.4
168.9
238.0
50.94
183.9
131.3
88.91
173.0
65.38
91.22
89
47
13
95
18
33
85
79
5
56
4
83
97
35
0
20
48
58
98
17
96
27
24
55
29
66
68
99
63
9
26
100
87
31
64
32
1
2
72
80
67
53
49
77
19
36
57
3
71
103
101
12
25
42
7
11
41
60
10
28
102
93
8
76
15
91
82
46
61
84
59
78
94
88
37
75
45
86
44
16
51
21
34
14
62
50
38
73
65
43
52
90
22
81
69
92
23
74
54
39
70
30
40
r为离心机头的半径(角头),或离心管中轴底部内壁到离心机转轴中心的距离(甩平头),单位为厘米。
rpm为离心机每分钟的转速。
RCF为相对离心力,以地心引力即重力加速度的倍数来表示,一般用g(或数字×g)表示。
附图11是由下述公式计算而来的:
RCF = 1.119 × 10-5× r × (rpm)2
将离心机转数换算为离心力时,首先,在r标尺上取已知的半径和rpm标尺上取已知的离心机转数,然后,将这两点间划一条直线,在图中间RCF标尺上的交叉点即为相应离心力数值。注意,若已知转数值处于rpm标尺的右边,则应读取RCF标尺右边的数值。同样,转数值处于rpm标尺左边,则读取RCF标尺左边的数值。