教学目标熟悉紫外可见光谱法的定性分析方法。
熟练应用单组分定量分析方法。
熟练应用双波长法和系数倍率法。
熟悉导数光谱法，了解褶合光谱法。
单组份的定量例 1 维生素 B12的水溶液在 361nm处的 值为 207,盛于 1cm的吸收池中，
测得溶液的 A值为 0.414,求溶液浓度。
%1
1cmE
例 2 称取维生素 C 0.0500g,
溶于 100ml的 0.005mol/L的硫酸溶液中，再量取此溶液 5.0ml稀释至 250ml，取此溶液于 1cm吸收池中，在?max245nm处测得 A值为 0.551,求样品中维生素 C的百分质量分数。 245nm=560%11cmE
校正曲线法
0 50 100 150
0.2
A
0.4
C(?g/ml)
200
0.6
0.8
Ax
Cx
1.配制标准溶液与样品溶液
2.分别测定上述溶液的吸光度
3.作标准曲线
4.从图中求出样品浓度一元弱酸离解常数的测定例：维生素 B6的 Ka测定溶液
VitB6储备液体积
(ml)
0.1mol/L
HCl体积
(ml)
0.05mol/L
NaAc体积
(ml)
pH7磷酸盐缓冲液体积 (ml)
总体积
(ml)
A 10.0 10 0 0 100.0
B 10.0 6 25 0 100.0
C 10.0 4 25 0 100.0
D 10.0 2 25 0 100.0
E 10.0 0 0 50 100.0
A
1?2
a
b
混合组分吸收光谱相互重叠情况示意图
A
1?2
a
b
混合组分吸收光谱相互重叠情况示意图
A
1?2
a
b
混合组分吸收光谱相互重叠情况示意图
A
1?2
a
等吸收双波长消去法示意图
b
ΔA
A
1?2
a
等吸收双波长消去法示意图
b
ΔA
A
1?2
系数倍率法示意图
ab
bA2
bA1
bb AAK 21 /?
K：掩蔽系数，
以 5～ 7为宜。
导数光谱法定义一阶二阶三阶零阶 将吸光度信号转化为对波长的导数信号的方法。导数光谱是解决干扰物质与被测物光谱重叠，消除胶体等散射影响和背景吸收，提高光谱分辨率的一种数据处理技术。
导数光谱法特点
10ppm苯的乙醇液
1ppm苯的乙醇液纯乙醇
1ppm苯的乙醇溶液,
二阶导数光谱
1ppm苯的乙醇溶液,
四阶导数光谱选择性及灵敏度均提高导数光谱法定量分析定量分析的依据：
A=CE=C f(λ)
dA/dλ=C dE/dλ
d2A/dλ2=C d2E/dλ2
… … … …
定量方法：工作曲线法或标准对照法导数光谱法 峰高测定方法
正切法：相邻峰
(极大或极小 )切线中点至相邻峰切线
(极小或极大 )的距离 d。
峰谷法：两相邻峰值 (极大或极小 )间的距离 p1或 p2。
峰零法：极值峰至零线间的距离 z。
小 结紫外可见分光光度法定性方法定性鉴别：对比法纯度检查杂质检查杂质限量检查定量方法单组分法多组分法吸光系数法校正曲线法对照法解方程组法双波长法系数倍率法导数光谱法
熟练应用单组分定量分析方法。
熟练应用双波长法和系数倍率法。
熟悉导数光谱法，了解褶合光谱法。
单组份的定量例 1 维生素 B12的水溶液在 361nm处的 值为 207,盛于 1cm的吸收池中，
测得溶液的 A值为 0.414,求溶液浓度。
%1
1cmE
例 2 称取维生素 C 0.0500g,
溶于 100ml的 0.005mol/L的硫酸溶液中，再量取此溶液 5.0ml稀释至 250ml，取此溶液于 1cm吸收池中，在?max245nm处测得 A值为 0.551,求样品中维生素 C的百分质量分数。 245nm=560%11cmE
校正曲线法
0 50 100 150
0.2
A
0.4
C(?g/ml)
200
0.6
0.8
Ax
Cx
1.配制标准溶液与样品溶液
2.分别测定上述溶液的吸光度
3.作标准曲线
4.从图中求出样品浓度一元弱酸离解常数的测定例：维生素 B6的 Ka测定溶液
VitB6储备液体积
(ml)
0.1mol/L
HCl体积
(ml)
0.05mol/L
NaAc体积
(ml)
pH7磷酸盐缓冲液体积 (ml)
总体积
(ml)
A 10.0 10 0 0 100.0
B 10.0 6 25 0 100.0
C 10.0 4 25 0 100.0
D 10.0 2 25 0 100.0
E 10.0 0 0 50 100.0
A
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a
b
混合组分吸收光谱相互重叠情况示意图
A
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a
b
混合组分吸收光谱相互重叠情况示意图
A
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a
b
混合组分吸收光谱相互重叠情况示意图
A
1?2
a
等吸收双波长消去法示意图
b
ΔA
A
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a
等吸收双波长消去法示意图
b
ΔA
A
1?2
系数倍率法示意图
ab
bA2
bA1
bb AAK 21 /?
K：掩蔽系数，
以 5～ 7为宜。
导数光谱法定义一阶二阶三阶零阶 将吸光度信号转化为对波长的导数信号的方法。导数光谱是解决干扰物质与被测物光谱重叠，消除胶体等散射影响和背景吸收，提高光谱分辨率的一种数据处理技术。
导数光谱法特点
10ppm苯的乙醇液
1ppm苯的乙醇液纯乙醇
1ppm苯的乙醇溶液,
二阶导数光谱
1ppm苯的乙醇溶液,
四阶导数光谱选择性及灵敏度均提高导数光谱法定量分析定量分析的依据：
A=CE=C f(λ)
dA/dλ=C dE/dλ
d2A/dλ2=C d2E/dλ2
… … … …
定量方法：工作曲线法或标准对照法导数光谱法 峰高测定方法
正切法：相邻峰
(极大或极小 )切线中点至相邻峰切线
(极小或极大 )的距离 d。
峰谷法：两相邻峰值 (极大或极小 )间的距离 p1或 p2。
峰零法：极值峰至零线间的距离 z。
小 结紫外可见分光光度法定性方法定性鉴别：对比法纯度检查杂质检查杂质限量检查定量方法单组分法多组分法吸光系数法校正曲线法对照法解方程组法双波长法系数倍率法导数光谱法
