骨 髓 细 胞 学 检 查
(Bone Marrow Examination)
主要内容
? 血细胞的生成与发育
? 正常血细胞形态
? 常用血细胞化学染色
? 骨髓细胞检查的临床意义
? 常见血液病血细胞特征
? 急性白血病的 MICM分型
一、血细胞生成与发育
T 淋 巴 系
祖 细 胞
B 淋 巴 系
祖 细 胞
淋 巴 系 干 细 胞
红系
祖 细 胞
粒 － 单 系
祖 细 胞
嗜 酸 粒
祖 细 胞
嗜 碱 粒
祖 细 胞
巨 核 系
祖 细 胞
骨 髓 系 干 细 胞
全 能 干 细 胞
T o t i p o t e n t i a l S t e m C e l l
T S C
血细胞发育规律
(原 始 → 成 熟 )
[ 胞 体 ] 大 →小 (巨核细胞相反,早幼粒较原粒大 )
[ 胞 浆 ] 量,少 → 多
颜 色：深蓝 →浅蓝 →浅红
颗 粒：无 →有,非特异性 →特异性
[ 胞 核 ] 大 →小 (巨核细胞相反 )
核 型,规则 →不规则
染色质,细致疏松 →粗糙密集 →紧缩成块
核 仁,有 →无
核 膜,不明显 →明显
[ 核浆比 ] 大 →小 (巨核细胞相反 )
二、正常血细胞形态
红细胞系 (Erythrocyte Series)
粒细胞系 (Granulocytic Series)
单核细胞系 (Monocytic Series)
淋巴细胞系 (Lymphocytic Series)
巨核细胞系
(Megakaryocytic Series)
浆细胞系统
(Plasmacytic Series)
? 原浆细胞
? 幼浆细胞
? 成熟浆细胞
三、常用血细胞化学染色
细胞化学染色
?过氧化物酶 ( POX)
?非特异性酯酶 ( NSE)
?特异性酯酶 (SE)
?糖原染色 (PAS)
?中性粒细胞碱性磷酶
( NAP)
过氧化物酶染色
(Peroxidase,POX)
? 原理,H2O2 H2O ＋ O2 ↑
POX
联苯胺 联苯胺兰＋亚硝基铁氰化钠
O2 ↓
暗蓝色的颗粒 ↓
? 结果：粒细胞 (+)；单核细胞 ( ± )；
淋巴细胞 ( –)
非特异性脂酶
(Non specific esterase,NSE)
?原理,NSE水解
α－醋 酸 奈 酚 奈 酚
＋
有色沉淀 ↓ 重氮染料偶联
?临床意义,
单核、巨噬 (+++)
特异性脂酶
(Specific esterase,SE)
? 原理,SE水解
氯醋酸奈酚 AS－ D 奈酚 AS－ D
＋
红色沉淀 ↓ 重氮盐偶联
? 临床意义,
粒 (+++)；单 ( ± )；淋 (－ )
中性粒细胞碱性磷酸酶染色
Neutrophil alkaline phosphatase,
NAP
原理,NAP
β－甘油磷酸钠 磷酸钠＋甘油
PH 9.2
磷酸钠＋氯化钙 磷酸钙 ↓＋硝酸钴
硫化钴 ↓ 硫化铵 + 磷酸钴
NAP临床意义
? 慢粒 NAP↓，类白 NAP↑
? 急粒 NAP↓，急淋 NAP↑，急单正常或 ↓
? 再障 NAP↑,PNH者 NAP↓
? 化脓感染 NAP↑,病毒感染 NAP↓
糖原染色
(Periodic-schiff,PAS)
?原理,过碘酸氧化
1.2乙二醇 双 醛 基
＋
Schiff
红色品红 紫红色 ↓
?临床意义,
淋－－粗颗粒或团块状阳性
粒－－弥漫均匀状阳性
单－－细颗粒状阳性
四、骨髓细胞学检查的临床意义
[适 应 症 ]
? 诊 断 造 血 系 统 疾 病, 白 血 病
贫 血
血小板减少性紫癜
? 诊 断 非 造 血 系 统 疾 病,原 虫 感 染
代 谢 性 疾 病
转 移 性 癌 肿
? 原因不明,发热、恶病质
肝、脾、淋巴结肿大
血细胞单项或多项减少、增多
周围血出现幼稚细胞、可疑细胞
[禁 忌 症 ]
明显出血倾向：血友病
结果分析
? 骨髓增生程度,有核细胞
巨核细胞
? 有核细胞分类
? 计算粒／红比值
骨髓增生程度
增生程度 成熟 RBC/有核细胞 有核细胞 (%)
极度活跃 1, 1 ＞ 50
明显活跃 10, 1 10～ 20
增生活跃 20, 1 2～ 7
增生减低 50, 1 < 1
极度减低 300, 1 < 0.5
正 常 骨 髓 象
1,增 生 活 跃
2,粒 红 比 正 常（ 2－ 4/1）
3,粒 系 (约 40－ 60％ )、红 系 (约 20％ ),
增 生 良 好,各 阶 段 比 例 适 当
细 胞 形 态 无 明 显 异 常
4,巨 核 细 胞, 易见、产 板 巨 多 见
5,淋 巴（约 20％）、单 核（ 约 4％）
6.可 见 少 量 非 造 血 细 胞
7,无 特 殊 细 胞 及 寄 生 虫
骨髓象检查的临床意义
? 增生程度
? 极度活跃－亢进：白血病
? 明显活跃－旺盛：白血病、增贫
? 增生活跃－正常
? 增生减低－减低, 慢性再障
? 极度减低－衰竭：急性再障
粒 / 红 ( 有 核 红 细 胞 ),2－ 4/1
〔 临 床 意 义 〕
? 正 常,正常骨髓象
粒,红两系以外造血系统疾病
粒,红两系平行增高或减低
? 增 高：粒系增高
红系减低
? 减 低：红系增高
粒系减低
五、常见血液病血细胞特征
再生障碍性贫血 (aplastic anemia,AA)
特 征,全 血 细 胞 减 少
〔 血 象 〕
1,全血细胞减少,淋巴细
胞相对增高
2,网织红细胞减少
〔 骨 髓 象 〕
1,增生低下
2,红系 (晚幼红多见 ),粒
系,巨系减 低
3,非造血细胞增高,浆细
胞,淋巴细胞多见
急 性 白 血 病 (Acute Leukemia)
〔 血 象 〕
1,血红蛋白、红细 胞
减少,可见幼红细胞
2,白细胞计数不定,以
原幼稚为主
3,血小板减少
急 性 白 血 病
(Acute leukemia)
〔 骨髓 象 〕
1,增生活跃
2,原幼稚细胞异常
增生 ≥30％ (非红系 )
3,巨核细胞相对受抑
急性淋巴细胞白血病 (L1)
急性淋巴细胞白血病 (L2)
急性淋巴细胞白血病 (L3)
急粒未分化型 (M1)
急粒部分分化型（ M2）
急性早幼粒细胞白血病（ M3）
急性粒－单细胞白血病（ M4）
急性单核细胞白血病（ M5）
急性红白血病（ M6）
巨核细胞白血病（ M7）
慢 性 白 血 病
(Chronic Leukemia)
〔 血 象 〕
1.白细胞增高,分类以
成熟细胞为主
(慢粒,嗜酸,嗜碱增高 )
2,血小板早期正常,晚
期降低
慢 性 白 血 病 (Chronic Leukemia)
〔 骨 髓 象 〕
1.增生明显活跃
2.粒 (淋 )系极度增
生,以成熟为主
3.其它系统受抑
原发性血小板减少性紫癜
Idiopathic Thrombocytopenic Purpura
〔 血象 〕
1.血小板减少,可见异
形、巨大血小板
2.血色素、红、白细
胞正常
〔 骨髓象 〕
1.增生活跃
2.粒系、红系正常
3.巨核,增生、产板巨
减少,成熟障碍
六, 急性白血病的 MICM分型
细胞形态学分型 (FAB分型 )
? 急淋 L 1 － 小细胞
L 2 － 大细胞
L 3 － 空泡
? 急髓 M 0－ 7
急髓白血病 FAB 分 型
M1 急粒未分化型 原粒 ≥90％ ( 非红系 )
M2 急粒部分分化型 原粒 ≥30-89％
M3 急早粒 早幼粒 >30％
M4 急粒 -单 粒单两系细胞均增生
M5 急单 原幼单 >30%
M6 红白血病 红系 >50％且形态异常
原粒 (原单 )＋早幼粒 (幼单 )>30％
M7 巨核白 原幼巨 >30％
SE:, 粒系阳性
单核阴性
阳性,急粒
急单
POX NSE,粒系阴性
PAS
单核阳性
阴性,急淋 (NAP)
急粒 (NAP)
急单
粒,片状
淋,粗颗粒,环核
单,细颗粒
免疫学分型
? 急淋
? T细胞 ---CD1,CD2,CD3,CD4,CD7,CD8
? B细胞 ---CD9,CD10,CD19,CD20
? 急髓
? CD11b,CD13,CD14,CD15,CD33,CD34
细胞遗传学和分子生物学分型
? M2 t ( 8 ; 21 ) AML1-ETO
? M3 t ( 15 ; 17 ) PML-RAR?
? CML t ( 9 ; 22 ) BCR-ABL
复习题
? 骨髓检查应用于哪些方面？
? 血细胞发育演变的一般规律？
? 正常骨髓象各系统各阶段的正常范围？
? 骨髓增生程度分级？
? 粒红比例正常、增高、减少见于哪些情况？
? 再障的骨髓象与血象特征？
? 急性白血病的分类、骨髓象及血象特征？
? 慢粒、慢淋骨髓象及血象特征？
? 常用细胞化学染色的鉴别？
(Bone Marrow Examination)
主要内容
? 血细胞的生成与发育
? 正常血细胞形态
? 常用血细胞化学染色
? 骨髓细胞检查的临床意义
? 常见血液病血细胞特征
? 急性白血病的 MICM分型
一、血细胞生成与发育
T 淋 巴 系
祖 细 胞
B 淋 巴 系
祖 细 胞
淋 巴 系 干 细 胞
红系
祖 细 胞
粒 － 单 系
祖 细 胞
嗜 酸 粒
祖 细 胞
嗜 碱 粒
祖 细 胞
巨 核 系
祖 细 胞
骨 髓 系 干 细 胞
全 能 干 细 胞
T o t i p o t e n t i a l S t e m C e l l
T S C
血细胞发育规律
(原 始 → 成 熟 )
[ 胞 体 ] 大 →小 (巨核细胞相反,早幼粒较原粒大 )
[ 胞 浆 ] 量,少 → 多
颜 色：深蓝 →浅蓝 →浅红
颗 粒：无 →有,非特异性 →特异性
[ 胞 核 ] 大 →小 (巨核细胞相反 )
核 型,规则 →不规则
染色质,细致疏松 →粗糙密集 →紧缩成块
核 仁,有 →无
核 膜,不明显 →明显
[ 核浆比 ] 大 →小 (巨核细胞相反 )
二、正常血细胞形态
红细胞系 (Erythrocyte Series)
粒细胞系 (Granulocytic Series)
单核细胞系 (Monocytic Series)
淋巴细胞系 (Lymphocytic Series)
巨核细胞系
(Megakaryocytic Series)
浆细胞系统
(Plasmacytic Series)
? 原浆细胞
? 幼浆细胞
? 成熟浆细胞
三、常用血细胞化学染色
细胞化学染色
?过氧化物酶 ( POX)
?非特异性酯酶 ( NSE)
?特异性酯酶 (SE)
?糖原染色 (PAS)
?中性粒细胞碱性磷酶
( NAP)
过氧化物酶染色
(Peroxidase,POX)
? 原理,H2O2 H2O ＋ O2 ↑
POX
联苯胺 联苯胺兰＋亚硝基铁氰化钠
O2 ↓
暗蓝色的颗粒 ↓
? 结果：粒细胞 (+)；单核细胞 ( ± )；
淋巴细胞 ( –)
非特异性脂酶
(Non specific esterase,NSE)
?原理,NSE水解
α－醋 酸 奈 酚 奈 酚
＋
有色沉淀 ↓ 重氮染料偶联
?临床意义,
单核、巨噬 (+++)
特异性脂酶
(Specific esterase,SE)
? 原理,SE水解
氯醋酸奈酚 AS－ D 奈酚 AS－ D
＋
红色沉淀 ↓ 重氮盐偶联
? 临床意义,
粒 (+++)；单 ( ± )；淋 (－ )
中性粒细胞碱性磷酸酶染色
Neutrophil alkaline phosphatase,
NAP
原理,NAP
β－甘油磷酸钠 磷酸钠＋甘油
PH 9.2
磷酸钠＋氯化钙 磷酸钙 ↓＋硝酸钴
硫化钴 ↓ 硫化铵 + 磷酸钴
NAP临床意义
? 慢粒 NAP↓，类白 NAP↑
? 急粒 NAP↓，急淋 NAP↑，急单正常或 ↓
? 再障 NAP↑,PNH者 NAP↓
? 化脓感染 NAP↑,病毒感染 NAP↓
糖原染色
(Periodic-schiff,PAS)
?原理,过碘酸氧化
1.2乙二醇 双 醛 基
＋
Schiff
红色品红 紫红色 ↓
?临床意义,
淋－－粗颗粒或团块状阳性
粒－－弥漫均匀状阳性
单－－细颗粒状阳性
四、骨髓细胞学检查的临床意义
[适 应 症 ]
? 诊 断 造 血 系 统 疾 病, 白 血 病
贫 血
血小板减少性紫癜
? 诊 断 非 造 血 系 统 疾 病,原 虫 感 染
代 谢 性 疾 病
转 移 性 癌 肿
? 原因不明,发热、恶病质
肝、脾、淋巴结肿大
血细胞单项或多项减少、增多
周围血出现幼稚细胞、可疑细胞
[禁 忌 症 ]
明显出血倾向：血友病
结果分析
? 骨髓增生程度,有核细胞
巨核细胞
? 有核细胞分类
? 计算粒／红比值
骨髓增生程度
增生程度 成熟 RBC/有核细胞 有核细胞 (%)
极度活跃 1, 1 ＞ 50
明显活跃 10, 1 10～ 20
增生活跃 20, 1 2～ 7
增生减低 50, 1 < 1
极度减低 300, 1 < 0.5
正 常 骨 髓 象
1,增 生 活 跃
2,粒 红 比 正 常（ 2－ 4/1）
3,粒 系 (约 40－ 60％ )、红 系 (约 20％ ),
增 生 良 好,各 阶 段 比 例 适 当
细 胞 形 态 无 明 显 异 常
4,巨 核 细 胞, 易见、产 板 巨 多 见
5,淋 巴（约 20％）、单 核（ 约 4％）
6.可 见 少 量 非 造 血 细 胞
7,无 特 殊 细 胞 及 寄 生 虫
骨髓象检查的临床意义
? 增生程度
? 极度活跃－亢进：白血病
? 明显活跃－旺盛：白血病、增贫
? 增生活跃－正常
? 增生减低－减低, 慢性再障
? 极度减低－衰竭：急性再障
粒 / 红 ( 有 核 红 细 胞 ),2－ 4/1
〔 临 床 意 义 〕
? 正 常,正常骨髓象
粒,红两系以外造血系统疾病
粒,红两系平行增高或减低
? 增 高：粒系增高
红系减低
? 减 低：红系增高
粒系减低
五、常见血液病血细胞特征
再生障碍性贫血 (aplastic anemia,AA)
特 征,全 血 细 胞 减 少
〔 血 象 〕
1,全血细胞减少,淋巴细
胞相对增高
2,网织红细胞减少
〔 骨 髓 象 〕
1,增生低下
2,红系 (晚幼红多见 ),粒
系,巨系减 低
3,非造血细胞增高,浆细
胞,淋巴细胞多见
急 性 白 血 病 (Acute Leukemia)
〔 血 象 〕
1,血红蛋白、红细 胞
减少,可见幼红细胞
2,白细胞计数不定,以
原幼稚为主
3,血小板减少
急 性 白 血 病
(Acute leukemia)
〔 骨髓 象 〕
1,增生活跃
2,原幼稚细胞异常
增生 ≥30％ (非红系 )
3,巨核细胞相对受抑
急性淋巴细胞白血病 (L1)
急性淋巴细胞白血病 (L2)
急性淋巴细胞白血病 (L3)
急粒未分化型 (M1)
急粒部分分化型（ M2）
急性早幼粒细胞白血病（ M3）
急性粒－单细胞白血病（ M4）
急性单核细胞白血病（ M5）
急性红白血病（ M6）
巨核细胞白血病（ M7）
慢 性 白 血 病
(Chronic Leukemia)
〔 血 象 〕
1.白细胞增高,分类以
成熟细胞为主
(慢粒,嗜酸,嗜碱增高 )
2,血小板早期正常,晚
期降低
慢 性 白 血 病 (Chronic Leukemia)
〔 骨 髓 象 〕
1.增生明显活跃
2.粒 (淋 )系极度增
生,以成熟为主
3.其它系统受抑
原发性血小板减少性紫癜
Idiopathic Thrombocytopenic Purpura
〔 血象 〕
1.血小板减少,可见异
形、巨大血小板
2.血色素、红、白细
胞正常
〔 骨髓象 〕
1.增生活跃
2.粒系、红系正常
3.巨核,增生、产板巨
减少,成熟障碍
六, 急性白血病的 MICM分型
细胞形态学分型 (FAB分型 )
? 急淋 L 1 － 小细胞
L 2 － 大细胞
L 3 － 空泡
? 急髓 M 0－ 7
急髓白血病 FAB 分 型
M1 急粒未分化型 原粒 ≥90％ ( 非红系 )
M2 急粒部分分化型 原粒 ≥30-89％
M3 急早粒 早幼粒 >30％
M4 急粒 -单 粒单两系细胞均增生
M5 急单 原幼单 >30%
M6 红白血病 红系 >50％且形态异常
原粒 (原单 )＋早幼粒 (幼单 )>30％
M7 巨核白 原幼巨 >30％
SE:, 粒系阳性
单核阴性
阳性,急粒
急单
POX NSE,粒系阴性
PAS
单核阳性
阴性,急淋 (NAP)
急粒 (NAP)
急单
粒,片状
淋,粗颗粒,环核
单,细颗粒
免疫学分型
? 急淋
? T细胞 ---CD1,CD2,CD3,CD4,CD7,CD8
? B细胞 ---CD9,CD10,CD19,CD20
? 急髓
? CD11b,CD13,CD14,CD15,CD33,CD34
细胞遗传学和分子生物学分型
? M2 t ( 8 ; 21 ) AML1-ETO
? M3 t ( 15 ; 17 ) PML-RAR?
? CML t ( 9 ; 22 ) BCR-ABL
复习题
? 骨髓检查应用于哪些方面？
? 血细胞发育演变的一般规律？
? 正常骨髓象各系统各阶段的正常范围？
? 骨髓增生程度分级？
? 粒红比例正常、增高、减少见于哪些情况？
? 再障的骨髓象与血象特征？
? 急性白血病的分类、骨髓象及血象特征？
? 慢粒、慢淋骨髓象及血象特征？
? 常用细胞化学染色的鉴别？
