《中国水产,2007 年第 7 期 65
责任编辑 叶佳林渔药 · 饲料在全世界范围内水产养殖业蓬勃发展的同时,由于养殖密度的不断加大,人工饵料的投喂量不断增多等原因,
从而造成了水环境的不断恶化,导致了各类细菌病,病毒病的频繁发生,严重阻碍了水产养殖业的持续健康发展。
目前已从生理,病理,种质,营养,生态,流行特点等方面进行了大量研究,以使用抗生素为代表的传统治疗方法,因其易导致养殖动物产生抗药性,易有残留等局限性,在各国逐渐被禁用和取代,免疫机制的研究是合理有效防治各类病害的根本和依据,近来免疫学研究已成为水产动物病害研究的热点之一。
免疫增强剂,又称为免疫促进剂,是指具有促进或诱发宿主防御反应,增强生物机体抗病能力的一类物质。 免疫增强剂在水产养殖中的应用起步较晚,但发展迅速,发现的种类逐渐增多,应用范围也随之扩大。 水产动物的非特异性免疫机制受多种因素的影响,在养殖生产中应用免疫增强剂提高机体的免疫水平,增强先天性的抵抗力无疑具重大意义。 壳聚糖作为新型免疫增强剂,越来越受到学者的重视。
一,壳聚糖介绍提到壳聚糖,首先要提甲壳素,甲壳素是一种天然高分子聚合物,广泛存在于虾蟹等甲壳类动物的外壳,乌贼等软体动物的骨骼,微生物的细胞壁以及昆虫的表皮或蛹壳中。 我国内河,湖泊多,海域大,甲壳动物资源非常丰富,每年废弃的虾,蟹壳就有数千万吨,这是生产甲壳素的重要来源。 甲壳素分子脱乙酰基后,称为壳聚糖
(chitosan,CS),是迄今为止唯一发现的阳离子动物纤维和碱性多糖。 壳聚糖因本身具有优良的生物相容性,可被新型免疫增强剂
——壳聚糖在鱼类抗病力中的应用研究史春路 刘小玲 华中农业大学水产学院 430070
溶菌酶溶解,可生物降解,其代谢产物无毒,且能被生物体完全吸收等独特的理化特性,又具有抗微生物活性、
激活淋巴细胞,提高免疫力,调节脂肪代谢和降低血脂、
胆固醇等多种生理功能,因此,在医药,食品,化妆品、
纺织,造纸,农业及环保等许多领域有着极其广泛的用途。
二,壳聚糖对鱼类非特异性免疫机能影响的研究
1,壳聚糖对鱼类细胞免疫的影响壳聚糖对很多鱼体的吞噬细胞的吞噬活性都有很好的促进作用。 常青等经过研究认为,在饲料中添加壳聚糖可以提高花鲈吞噬细胞的吞噬率 ; 王树芹等也报道,壳聚糖可以促进异育银鲫的吞噬细胞活性,真鲷的呼吸爆发和吞噬细胞的吞噬活性 ; Kolman 等用壳聚糖浸泡俄罗斯鲟,其淋巴细胞增多,中性粒细胞的吞噬活性提高,通过注射或浸泡壳聚糖也可以提高鲮 ( Labeo rohita ) 的非特异免疫细胞的吞噬功能。
2,壳聚糖对鱼类体液免疫的影响鱼类的体液免疫因子主要发挥作用的是溶菌酶和补体系统。 溶菌酶是由淋巴细胞分泌的碱性溶解酶,主要作用于革兰氏阳性菌及某些特定的细菌,还可以溶解细菌胞壁上的粘多糖。 王树芹等在对鲫鱼研究中证实在饲料中添加适量壳聚糖能使鱼体各组织溶菌酶活性和白细胞吞噬的提高基本一致,说明壳聚糖能够激活水解酶的活性,增强机体的抗感染能力。 而在 Ayyaru 等的报道中,通过投喂壳聚糖,溶菌酶水平在第 30 天后达到最高,其水平为 ( 4797 ± 24 ) IU,而对照组仅为 ( 927
± 75 ) IU,说明壳聚糖可以显著提高鱼的溶菌酶水新型免疫增强剂
——壳聚糖在鱼类抗病力中的应用研究
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责任编辑 叶佳林水产品加工平。
壳聚糖对鱼类的体液免疫系统有多方面的免疫调节作用,如可通过激活补体系统,介导补体的系列生物学效应,增强机体非特异性免疫系统功能,同时能分泌多种免疫因子,调节细胞免疫与体液免疫,从而增强机体的抗感染能力。 Esteban 等在金头鲷饲料中添加 25g/kg 或 50g/kg 的甲壳素,可以明显提高补体活性。 常青等研究报道,通过在饲料中添加壳聚糖饲喂花鲈,能够显著提高补体活性,而且最高水平可达到对照组活性的两倍。
3,影响壳聚糖对鱼类非特异性免疫作用的因素影响壳聚糖对鱼类非特异性免疫起促进作用的因素主要有给药时间,给药途径和剂量。 Andersin 建议为了减少疾病造成的损失,免疫刺激剂应该在疾病暴发前使用。 常青等研究报道,壳聚糖在 0.5% 的添加水平,在 60 天时能够显著提高补体活性。 Sakai 曾提出给予鱼类免疫刺激物的黄鳍金枪鱼属于大洋性鱼类,一般生活在热带及温带水域中,它的主要栖息活动范围通常在 50m~250m 水深处,其深度也取决于季节和海平面的不同区域。 金枪鱼延绳钓作业的渔获物主要是黄鳍金枪鱼和大目金枪鱼。 这两种鱼占渔获物 80% 以上,具有较高的商业价值,大目金枪鱼通常冷藏保存,加工成生鱼片,而黄鳍金黄鳍金枪鱼的加工技术孙永梅 辽宁省辽东学院农学院 118003
李东占 辽宁省丹东市水产技术推广总站 118002
最有效途径是注射,然而注射途径在水产养殖中并不实用,笔者认为目前实际养殖过程中壳聚糖最可行的给药途径是混饲投喂。 王树芹等通过试验综合壳聚糖对白细胞吞噬功能和溶菌酶活性的影响,认为壳聚糖在饲料中的适宜添加量为 0.5%,但是随着壳聚糖添加量的增加,其刺激免疫提高的效果并未有相同的增长效应,反而有所下降。
因此,对于不同的鱼类,壳聚糖的添加量可能会有不同的最适宜量,过高的添加量不仅不会提高鱼类的免疫机能,
反而会起到相反的效果。 而不同的时间也会用不同的效果,不是壳聚糖投喂的时间越长,其免疫效果就越好,王树芹等通过对鲫鱼研究证实,在 30 天时,添加壳聚糖的各组溶菌酶活性都显著高于对照组,但是 60 天时则与对照组相比没有差异,似乎出现免疫,疲劳” 现象。
三,壳聚糖在鱼类中的抗菌活性因壳聚糖带正电荷及其聚合分子的结构,使其具有较枪鱼则冷冻保存在冷冻船上,卖到水产公司加工成鱼片销售。 黄鳍金枪鱼肉呈鲜红色,味道好,营养价值高,
在国际市场尤其是美国市场颇受欢迎。 关于它的加工技术国内未见报道,笔者曾从事过这方面的技术工作,现介绍如下,
一,原料鱼的采购金枪鱼购于海上冷冻船,要求鱼的皮肤完整,光亮,没有大面积鱼鳞脱落,鱼皮色为自然本色,不能有黄色出现。 原料入库按 5kg~10kg,
10kg~20kg,20kg~30kg 及 30kg 以上分级入箱进冷冻库,速冻库的温度宜在
- 15 ℃左右,鱼类销售过程中轻拿轻放,避免阳光直射和长时间暴露在室外空间,操作过程要快,尽量缩短入库运输距离。
黄鳍金枪鱼的加工技术
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责任编辑 叶佳林
④壳聚糖上的氨基起抑菌作用 ; ⑤壳聚糖与细胞质发生作用。
综上所述,免疫增强剂的研究,也是免疫生物学,中药免疫药理学,微生物学,分子生物学,胃肠道微生态学,动物营养学,动物生产学和人类健康学等学科相互融合,相互促进的过程,代表着饲料添加剂的发展趋势,孕育着饲料工业的再次革命,一旦养殖业不再像今天这样顾及抗生素的存在所带来的报酬,抗生素将完全被新型制剂取代,其现实意义,将促使饲料免疫增强剂的研究不断进入崭新的阶段。
壳聚糖在提高鱼类免疫力和抗菌方面都具有良好的效果,且其原料丰富,降解产物无毒无害,解决了使用抗生素带来的药物残留和抗药性问题。 因此,其在无公害水产品的养殖上有很大的应用前景,有望成为近年最有发展潜力的饲料添加剂之一。
二,鱼块加工工艺
1,原料鱼的切割 将金枪鱼从冷库取出,放在大型平台上 ( 7m ×
7m ) 通过滚轮输送带运至大型电锯平台上,将鱼去头,锯尾,沿侧线及被腹中线切成 4 半,去掉大部分肚子,放入盛鱼架。
2,剥皮去骨 将锯好的鱼块放在去骨架上,用刀去皮去骨,皮要去的尽量薄,骨要处理干净,不要带去太多的鱼肉。 去骨架用不锈钢管制成,管径 3m,形似一张没有台面的大桌子,上框长 3.2m,宽 1.8m,
腿高 0.8m,下框同上框,离地面有
0.2m,在 长面距左端及右端 1/4 处各安装一个放鱼的支架,此支架用方形钢制成,与水平面成 60 度角,每个架各容纳 4 个人进行加工操作。
刀为长方形,刀刃在窄侧,与刀刃对应的一端安装有一把柄。 刀长为
0.4m,宽 0.16m,刀柄长 0.44m,两端各探出 0.14m 。 将处理好的鱼块放入盛鱼架中,待架中装有一定量的鱼时,迅速运往冷库。
3,去血线和磨肚骨 将去皮去骨的鱼块从冷库中取出,用电动磨鱼机将它表面的血及残留的皮去掉,同时去掉肚中的鱼骨刺,再把鱼块冲洗干净和进一步修整后放入装鱼的铁架中。
4,鱼块的摆放冷冻 放鱼的铁架四周由直径 3.5cm 铁管焊成,用无毒漆油好,隔成 5 层 ~6 层,每层铺有镀锌水产品加工强的抑菌与杀菌能力。 陈云波等通过研究认为,异育银鲫摄食壳聚糖以后,0.5%,1% 壳聚糖组的鱼对嗜水气单胞菌的抵抗能力有显著提高,这二组鱼的半致死量显著高于对照组和 2% 壳聚糖组。 Anderson 等对美洲红点鲑的研究具有相似的报道,美洲红点鲑注射或浸泡壳聚糖后,能增强其对杀鲑气单胞菌的抗感染能力。 Siwicki 等给虹鳟口服壳聚糖也能增强其对杀鲑气单胞菌的抗感染能力。 离体抗菌试验证实了壳聚糖对革兰氏阳性菌,革兰氏阴性菌,气单胞菌和弧菌均有显著的抑菌作用。 肖航曾提出,可能壳聚糖是阳性趋化剂,能够使单核细胞从血管中逸出,并聚集在组织中,形成巨噬细胞,或壳聚糖能够直接刺激局部组织,使细胞增生,继而演变为巨噬细胞。 刘南等认为壳聚糖的抑菌机理可能为,①壳聚糖干扰菌体细胞膜的功能,从而达到抑菌的效果 ; ②壳聚糖直接与菌体 DNA 和
mRNA 作用 ; ③壳聚糖激活几丁质酶,达到抑菌的目的 ;
板,铁架放鱼前,要先在镀锌板上铺上聚乙烯无毒塑料,将修好的鱼块放在铁架上,彼此不要叠加,以免粘连在一起,待架中盛满鱼后,用封胶塑料封好,运往速冻库。
5,包装 将碎冰放入不锈钢槽中
(此槽长 2m,宽 1m,深 0.8m ),
加入自来水,待冰水完全混合后,
将冻鱼块放入槽中,随即捞出,浸鱼时间与包冰厚度成正比,即鱼在水中时间越长,包冰越厚,这主要看客户的喜好。 包好冰的鱼块装入白色透明的聚乙烯无毒塑料袋中,
用封袋机将袋口封好,然后装入黄板纸纸箱,用打包机打好包装,过磅记重后,将鱼箱摆放成排,码好垛后,叉入冷库。
三,鱼片的制作工艺将包装好的鱼块取出,去掉头尾不够尺寸的部分,将鱼锯成 2.5cm 厚度的薄片,送入自动包冰机中包冰,
包好冰后,由输送带运入分拣机称重分拣,按 3 盎司 ~5 盎司,5 盎司 ~7 盎司及 7 盎司 ~9 盎司等不同规格分别装入不同的塑料篮中,再将鱼片送入真空包装机中进行包装,通常单片包装,有时两片包在一起,按客户要求来定。 将真空机包装好的鱼片装进纸壳箱,用胶带纸封好箱口,送进冷冻库。
四,技术关键
1,提高鱼产品的出肉率 鱼类加工要想方设法提高鱼产品的成品率,要想提高鱼的出肉率,就得有一批熟练工人,因此要对工人进行经常培训。
使他们掌握加工环节的关键技术,同时,要教育工人有主人翁态度,珍惜他们加工的原料。
2,保证水产品的质量 水产品质量的好坏直接影响其价格,因而要时刻牢记把质量放在第一位,特别是在鱼类的锯,割,磨等过程要迅速,尽量减少在加工车间停留的时间,加工车间的温度要尽量的低。 加工过程中要尽量少浇水,不使鱼解冻。
3,注意环境卫生 在国际上,食品卫生都实行追溯制,一旦出现影响人们健康的问题,就能找到生产,销售领域的各个厂家。 因此,
食品加工的卫生是非常重要的,要做到加工食品的食用安全,首先要保持加工车间的卫生,保持地面的整洁,干净,工作台面要清洁,使用的刀具要经常消毒,用完后要擦干,以免生锈。
4,注意工人的个人卫生 工人直接与水产品接触,直接影响着水产品的卫生水平。 工人入场前,要进行身体检查,有呼吸道疾病和传染性疾病的工人不得从事水产品的加工工作。 工人要有统一的工作服,且工作服要经常清洗和消毒。 进入加工车间前,工作靴要在车间门口的消毒池中消毒,同时,还要把手洗干净,手套必须消毒,和鱼产品接触时,要带好口罩。 盛鱼的器具及运输工具也要保持洁净。