第十二章 气相色谱法
第一节 概述
气相色谱法, 以气体为流动相的柱色谱分离技术
一, GC分类
1,按固定相分 气 -固色谱
气 -液色谱
2,按分离原理分 吸附色谱
分配色谱
3,按柱子粗细分 填充柱色谱
毛细管柱色谱
二、气相色谱仪的组成
载气 → 减压 → 净化 → 稳压 → → 色谱柱 → 检测器 → 记录仪
进样
载气系统
进样系统
分离系统
检测系统
记录系统
续前
三, 气相色谱法的特点和应用
“三高,, 一快,, 一广,
占有机物 20%
适于分析气体, 易挥发的液体及固体
不适合分析不易气化或不稳定性物质
样品的衍生化使应用范围进一步扩大
第二节 气相色谱法的基本原理
一, 基本概念
二, 等温线
三, 塔板理论 ( 平衡理论 )
四, 速率理论
热力学理论:塔板理论 ——平衡理论 基础
动力学理论:速率理论 ——Vander方程
理论基础
一、基本概念
1,流出曲线和色谱峰
2,基线, 噪音和漂移
3,保留值:色谱定性参数
4,色谱峰的区域宽度:色谱柱效参数
1.流出曲线和色谱峰
流出曲线 ( 色谱图 ), 电信号强度随时间变化曲线
色谱峰, 流出曲线上突起部分
续前
不对称因子
正常峰 ( 对称 )
非正常峰 前沿峰
拖尾峰
色谱峰
ABAAWf hs 2)(205.0 ???
——fs在 0.95~1.05之间
——fs小于 0.95
——fs大于 1.05
2.基线、噪音和漂移
基线, 当没有待测组分进入检测器
时, 反映检测器噪音随时间
变化的曲线 ( 稳定 —平直直线 )
噪音, 仪器本身所固有的, 以噪音
带 表示 ( 仪器越好, 噪音越小 )
漂移, 基线向某个方向稳定移动
( 仪器未稳定造成 )
3.保留值:色谱定性参数
? 保留时间 tR:从进样开始到组分出现浓度极大点时
所需时间, 即组分通过色谱柱所需要的时间
? 死时间 tm:不被固定相溶解或吸附的组分的保留时
间 ( 即组分在流动相中的所消耗的时间 ), 或流动
相充满柱内空隙体积占据的空间所需要的时间, 又
称流动相保留时间
? 调整保留时间 tR’:组分的保留时间与死时间之差值,
即组分在固定相中滞留的时间
mRR ttt ??' 0' ttt RR ??或
图示
续前
保留体积 VR:从进样开始到组分出现浓度极大点时
所消耗的流动相的体积
死体积 Vm:不被保留的组分通过色谱柱所消耗的流
动相的体积,又指色谱柱中未被固定相所占据的空
隙体积,即色谱柱的流动相体积(包括色谱仪中的
管路、连接头的空间、以及进样器和检测器的空间)
cRR FtV ??
C
RcR FtFV
1?无关;为定值,与注:
321 VVVV m ??? Cmm FtV ??
C
mcm FtFV
1?无关;为定值,与注:
差,峰形,色谱峰扩展 ???mV
续前
调整保留体积 VR’:保留体积与死体积之差, 即组分
停留在固定相时所消耗流动相的体积
相对保留值 ri,s( 选择性系数 α),调整保留值之比
CRmRR FtVVV ???? ''
c
RcR FtFV
1'' ?无关;与注:
1
2
'
1
'
2
'
1
'
2
12 k
k
V
V
t
tr
R
R
R
R ???

1
2
1
2
12 k
k
K
Kr ???
,?
续前
保留指数 IX:指将待测物的保留行为换算成相当于
正构烷烃的保留行为 (已知范围内组分的定性参数 )
? 例,见书 334页
]
lglg
lglg
[1 0 0 '
)(
'
)(
'
)(
'
)(
zRnzR
zRxR
x tt
tt
zI
?
?
??
?
之间和应介于
数为一对正构烷烃的含,注:
'
)(
'
)(
'
)( nzRzRxR ttt
Cnzz
?
?
4.色谱峰的区域宽度:色谱柱效参数
峰宽 W:正态分布色谱曲线两拐点切线与基线相交
的截距
标准差 σ:正态分布色谱曲线两拐点距离的一半
σ→对应 0.607h处峰宽的一半
? 注,σ↓小,峰 ↓窄,柱效 ↑高
半峰宽 W1/2:峰高一半处所对应的峰宽
?3 5 5.221 ?W
?4?W
216 9 9.1 WW ?
? 注:除了用于衡量柱效, 还可以计算峰面积
图示
5.相平衡参数
容量因子 ( 容量比, 分配比 ) k:指在一定温度和
压力下, 组分在色谱柱中达分配平衡时, 在固定
相与流动相中的质量比 ——更易测定
分配系数 K,
)1(0
m
S
R V
VKtt ???
m
s
mm
ss
m
s
V
VK
VC
VC
W
Wk ???? )1()1(
00 ktV
VKtt
m
S
R ??????
0' ttt RR ??又
0
'
t
tk R?? 长注,??? Rtk
)(0' BAR kktt ???
不等是分离的前提不等或注,kK
m
S
C
CK ?
二、等温线,指一定温度下, 某组分在两相中分配
达平衡时, 在两相中的浓度关系曲线
1,线性等温线 ( 理想 ) → 对称峰
2,非线性等温线
( 1) 凸形 → 拖尾峰
( 2) 凹形 → 前沿峰
固定相表面活性吸附中心未达饱和,
K一定, 与溶质浓度无关
固定相表面吸附中心活性不均, K不同
先占据强吸附中心再占据弱吸附中心,
K随着溶质浓度的增加而减小
溶质与固定相作用, 改变其表面性质
K随着溶质浓度的增加而增加
斜率 =K
对称峰
前沿峰
拖尾峰
图示
三、塔板理论
色谱柱每个 H高度内有一块塔板, 共有若干块塔板
组分在每块塔板两相间分配达平衡, K小的先出柱
多次分配平衡, K有微小差异组分仍可获较好分离
( 一 ) 塔板理论四个基本假设
( 二 ) 色谱峰的二项式分布
( 三 ) 色谱峰的正态分布
( 四 ) 理论板数和理论塔板高度的计算
假想:
(一)塔板理论的四个基本假设
1,在柱内一小段高度内组分分配瞬间达平衡
( H→理论塔板高度 )
2,载气非连续而是间歇式 ( 脉动式 ) 进入色谱柱,
每次进气一个塔板体积
3,样品和载气均加在第 0号塔板上, 且忽略样品
沿柱方向的纵向扩散
4,分配系数在各塔板上是常数
(二)色谱峰的二项式分布 ( N 较少) → 逆流分布
萃取法 →利用物质在互不相溶两相中溶解度的不同
式分布溶质含量分布服从二项
pq 为,固定相中的溶质含量设载气中溶质含量为
1)( ?? Nqp
的含量号塔板上组分在载气中
分别代表次转移后,展开式各项注:
N
N
~0
32233 33)( qpqqppqp ?????
1037.0222.0444.0297.0)333.0667.0( 3 ??????
图示
图示
(三)色谱峰的正态分布 ( N>50次) → 近似对称分布
? 讨论:
2
2
2
)(
0
2
?
??
Rtt
eCC
??
?
?
?
Rtt ? hCC ?
??? ??2
0
m a x
?355.221 ?W?又 AhWC ????? 210 6 0 5.1
2
2
2
)(
m a x ?
Rtt
eCC
??
??? 流出曲线方程
峰越尖锐

??
????
???
?
m a x
m a x
CCtttt
CCtt
RR
R
(四)理论板数和理论塔板高度的计算
理论塔板高度 H——为使组分在柱内两相间达到
一次分配平衡所需要的柱长
理论塔板数 N——组分流过色谱柱时, 在两相间
进行平衡分配的总次数

理 H
Ln ?
理理或 nLH /?
22
21
2 )(16)(54.5)(
W
t
W
ttn RRR ???
?理
续前
????
?????
??
,但柱压和分析时间一定,;,分离能力,柱效一定,
,讨论:
理理
理理

理理
nLH
nHL
H
nLn
1
不同;组分不同则与所用组分有关,选用注:计算 理理 nn
一致无量纲,上下单位必须理n
续前
2
21
'
2
'
)(54.5)(16
W
t
W
tn RR
e f f ??
effeff nLH /?
0
'
t
tk R?? 2)
1( k
knn
e f f ??? 理
理,
实的反映柱效扣除了死时间,更能真和讨论:
nnk
Hn
e f f
e f fe f f
??
小结
1,塔板理论的贡献:从热力学角度
解释了色谱流出曲线的形状和浓度极大点的位置
阐明了保留值与 K的关系
提出了评价柱效高低的 n和 H的计算式
在比较相似柱的柱效时有用
须在给定条件, 指定组分测定时才有意义
(人为定义),nWt R ?21
2

练习
? 例,在柱长为 2m的 5%的阿皮松柱, 柱温为
1000C,记录纸速度为 2.0cm/min的色谱条件下,
测定苯的保留时间为 1.5min,半峰宽为 0.20cm,
求理论塔板数 。 ( 见书上 P338例 )
? 解:
32 102.1)
0.220.0
5.1(54.5 ???n
mmH 7.1102.1 2 0 0 0 3 ???
四、速率理论
( 一 ) 塔板理论优缺点
( 二 ) Van Deemteer 方程式
(一)塔板理论优缺点
成功处,
解释了色谱流出曲线的形状和浓度极大值对应的 tR
阐明了保留值与 K的关系
评价柱效 ( n,σ )
存在问题,
1) 做出了四个与实际不相符的假设
忽略了组分在两相中传质和扩散的动力学过程
2) 只定性给出塔板高度的概念, 却无法解释板高的
影响因素
3) 排除了一个重要参数 ——流动相的线速度 u,
因而无法解释柱效与流速关系
更无法提出降低板高的途径
(二) Van Deemteer 方程式
吸收了塔板理论的有效成果 ——H,
并从动力学角度较好地解释了影响柱效的因素
uCuBAH ???? /
涡流扩散项
纵向扩散项
传质阻抗项
流速与柱效的关系
uBAHCuu /???? 项可忽略,最佳
uCAHBuu ????? 项可忽略,最佳
CBuCuBdudH op ????? 2
BCAHscmtLu
m
2)/( m i n ????
(测定)前提下和较短在保证足够大 最佳utR R ?
高,峰越尖锐,柱效,,一定,三个常数注,???? nHu
1,涡流扩散项 (多径扩散项), A
产生原因,载气携样品进柱, 遇到来自固定相颗粒
的阻力 →路径不同 →涡流扩散 next
影响因素,固体颗粒越小,填充越实,A项越小
dpA ?? ?2
填充不规则因子—?
填充颗粒直径—dp
dpA ?? ?
讨论,?????????? 柱效,nHAdp?
????????? 柱效,,nHAdp?
注,颗粒太小, 柱压过高且不易填充均匀
填充柱 ——60~100目
空心毛细管柱 ( 0.1~0.5mm), A=0,n理 较高 next
涡流扩散系数
图示
back
2,纵向扩散项 (分子扩散项), B/u
产生原因,峰在固定相中被流动相推动向前、展开
→两边浓度差
影响因素:
gDB ?? ?2
)弯曲因子(— 1???
1
1
?
?
?
?
空心毛细管柱
填充柱
数(常数)组分在载气中的扩散系—gD
gR DBtuB ??,
讨论:
?????
???
g
R
DMT
tu
)(或 ?
??????? 柱效,nHuB /
纵向扩散系数
M
TDT
g ?? 或?
续前
? 注, 为降低纵向扩散,宜选用分子量较大的载气、
控制较高线速度和较低的柱温
? 选择载气原则, 兼顾分析时间和减小纵向扩散
u 较小时, 选 M较大的 N2气 ( 粘度大 )
u 较大时,选 M较小的 H2气,He气(粘度小)
3,传质阻抗项,C·u
产生原因,样品在气液两相分配,样品未及溶解就
被带走,从而造成峰扩张
影响因素:
传质阻抗系数
l
llg D
df
k
kCCCC 2
2)1(3
2 ?
?
?????
固定液液膜厚度—df
系数组分在固定液中的扩散—lD
l
l D
dfC 2?
?
TD
l ?
2)1( k
kC
l ??
续前
? 讨论:
? 注,固定液应完全覆盖载体表面,不可以太薄,
否则柱子寿命短,k太小;
T不可以超过固定液最佳使用温度
???
?
lDT
df ????????? 柱效,,nHuCC
l
最佳
可用
5~3
10~2
?
?
k
k
小结,范氏方程说明了在色谱分离条件的选择中,填充
均匀程度、填充物的粒度、流动相的种类及流速、
固定相的液膜厚度等对柱效和峰展宽的影响