第五节 分离条件的选择
一, 分离度 （ 分辨率 ） 及影响因素
二, 实验条件的选择
一、分离度（分辨率）及影响因素
1．分离度定义式
2．影响分离的因素（分离方程，分离度计算式）
1．分离度定义式
? 分离度, 相临两组分间峰顶间距离是峰底宽平均值的几倍
（衡量色谱分离条件优劣的参数）
讨论：
2
21
12
WW
ttR RR
?
???
峰宽和之半
）保留值之差（峰顶间距
)2(21)1(21
12
21
12 )(1 7 7.1)(2
WW
tt
WW
ttR RRRR
?
??
?
??
完全未分开
完全分离
基本分离
??
?????
?????
0.1
65.1
40.1
R
tR
tR
R
R
?
?
2．影响分离的因素（计算式）
前提 —— 定义式基础上，相邻两组分的 n一致（假设）
2
2
1
1
4 k
knR
??
???
?
?
柱选择项
柱容量项柱效项
理
理 H
Ln ? uCuBAH ???? /
'
1
'
2
1
2
1
2
R
R
t
t
k
k
K
K ????
a．柱效项及其影响因素：
影响色谱峰的宽窄
主要取决于色谱柱性能及载气流速
nR ?因为 ??? Rn所以
HnLn
1?? 或已知 ????? RnHL,或所以
nR ??
HRLR
1??? 或
续前
? 讨论：
? 增加柱效是提高分离度的一个直接有效手段
? 提高柱效, 改善分离的途径：增加柱长；降低板高
? 根据速率理论, 降低板高, 提高柱效的方法是：
1） 采用粒度较小, 均匀填充的固定相 （ A项 ↓ ）
2） 分配色谱应控制固定液液膜厚度 （ C项 ↓ ）
3） 适宜的操作条件：
流动相的性质和流速, 柱温等等 （ B项 ↓ ）
? 选用分子量较大、线速度较小的载气 —— N2气，
? 控制较低的柱温
b．柱选择项及其影响因素：
影响峰的间距
主要受固定相性质，以及柱温影响
?
? 1??R因为 ????? R，所以
?
?? 1
，无法分离01 ??? R?
的影响都很大微小变化对 R?
一倍???? R2.11.1?
续前
? 讨论：
? 增大柱选择性是改善分离度的最有力手段
? 气相色谱中, 柱选择性取决于固定相性质和柱温
? 选择合适的固定相使与不同组分的作用产生差别
才能实现分离
? 一般说, 降低柱温可以增大柱的选择性
c．柱容量项及其影响因素：
影响峰位
主要受固定相用量、柱温和载气流速的影响
k
kR
?? 1?
00 ??? Rk
????? Rkkk,1
???
?????
，峰扩张
，的影响对时
Rt
Rk
变慢时,???? Rkk 5
?????? RtRkk 很少，时，10
续前
? 讨论：
? 综合考虑分离度, 分离时间和峰检测几项因素
控制 k的最佳范围 2~5
? GC中, 增加固定液用量和降低柱温可以增加 k
图示
k 影响峰位
n 影响峰宽窄
α影响两峰间距
练习 如何根据具体情况改进分离度？
? α太小，两组分未分开
? 应改变固定相极性，降低柱温
? k 太小,n 也太小，
? 应增大固定液用量，降低柱温
? n 太小，许多组分未分开
? 应设法降低板高，提高柱效
二、实验条件的选择：
? 色谱条件包括分离条件和操作条件
? 分离条件是指色谱柱
? 操作条件是指载气流速, 进样条件及检测器
1,色谱柱的选择
2,柱温的选择
3,载气与流速的选择
4,进样条件的选择
1．色谱柱的选择（以气液分配色谱为主）
（ 1） 固定相的选择
（ 2）柱长的选择
（ 1）固定相的选择
? 固定液的选择：
1） 按, 相似相溶, 原则：极性相似或官能团相似
2） 按组分性质主要差别：
沸点相差大的选非极性固定液
沸点相差小的选极性固定液
3） 柱温 < 固定液最高使用温度 —— 防止固定液流失
? 载体的选择,种类，粒度，分布
续前
? 固定液配比的选择：
? 高沸点组分 →比表面积小的载体
低固定液配比 （ 1%~3%）
低柱温
? 低沸点组分 →高固定液配比 （ 5%~25%）
加大 k值, 达到良好分离
? 难分离组分 →毛细管柱
（ 2）柱长的选择
? 注：根据 R>1.5选择 L,一般较短 (0.6~6m)
不可以无限延长柱子
??????,柱压，峰宽,RnL
LnH
k
??不变
不变不变,?
2
12
2
1 )(
L
L
R
R ??
练习
例：两组分在 1 m长柱子上的分离度为 0.75,问使用
多长柱子可以使它们完全分离？
解,LRnR ????
2
1
2
1
L
L
R
R ?
2
1
5.1
75.0
L
??
mL 42 ??
2．柱温的选择
? 原则：
1） 在能保证 R的前提下, 尽量使用低柱温,
但应保证适宜的 tR及峰不拖尾, 减小检测本底
2） 根据样品沸点情况选择合适柱温
柱温应低于组分沸点 50~1000C
宽沸程样品应采用程序升温
??T
?
?
??
??
固定相检测本底
K
D
C
DB
L
g
1
2?
续前
? 程序升温好处：
改善分离效果
缩短分析周期
改善峰形
提高检测灵敏度
3．载气与流速的选择
? 选择载气应与检测器匹配
? TCD→选 H2,He（ u 大, 粘度小 ）
? FID→选 N2（ u小, 粘度大 ）
minHu op ?
CBu op ?
BCAH 2m i n ??
op
op
uu
uu
??
??
分析时间是主要矛盾
分离是主要矛盾
? 选择流速和载气应同时考虑对柱效和分析时间的影响
?????
????
uCHuu
uBNuu
op
op
气选
气选
2
2
4．进样条件的选择
? 气化室温度 —— 一般稍高于样品沸点
? 检测室温度 —— 应高于柱温 30~500C
? 进样量 —— 不可过大，否则造成拖尾峰
? 注：
检测器灵敏度足够 →进样量尽量小
最大允许进样量 —— 使理论塔板数降低 10%的进样量
练习
例：已知物质 A和 B在一根 30.0cm长的柱上的保留时间分别为
16.40和 17.63min，不被保留组分通过该柱的时间为 1.30min，
峰底宽为 1.11和 1.21min，试计算
（ 1）柱的分离度（ 2）柱的平均塔板数（ 3）塔板高度
（ 4）达 1.5分离所需柱长
解：
06.121.111.1 )40.1663.17(2)(2
21
12 ?
?
??
?
??
WW
ttR RR
2)(16
W
tn R??
3 4 9 3)11.1 40.16(16 21 ??? n
3 3 9 7)21.1 63.17(16 22 ??n
3 4 4 52 )3 3 9 73 4 9 3(2 21 ????? nnn
续前
mmnLH 3107.83 4 4 53 0 0 ?????
LRnR ????
cmL 602 ??
2
1
2
1
L
L
R
R ?
2
30
5.1
06.1
L
??
第六节 定性定量分析
一, 定性分析
二, 定量分析
一、定性分析
1,利用保留值定性
1） 已知对照物定性：定性专属性差
? 注：不同组分如在某一色谱条件下保留值相同, 应
更改色谱柱再检测, 粗步推算是否为一个纯物质峰
2） 相对保留值定性
3） 利用保留指数定性：唯一可靠, 准确, 重复性好
2,利用化学反应定性：收集柱后组分, 官能团反应
定性鉴别 （ 非在线 ）
3,利用两谱联用定性,GC-MS,GC-FTIR
二、定量分析：
以峰高或峰面积定量
（一）峰面积的测量
（二）定量校正因子
（ 三 ） 定量方法
（一）峰面积的测量
2．非正常峰（不对称峰）
1．对于正常峰
iii ACm ?? )( 或定量依据
21605.1 WhA ???
)(216 0 5.1 85.015.0 WWhA ?????
3．自动求和（自动积分仪或色谱工作站）：
直接给出 A,h,W1/2
注：当色谱操作条件一定时, 在一定进样量范围内
（ 不超载 ）, W1/2与进样量无关
（二）定量校正因子
1,两种表示方法
i
i
iiii A
mfAfm ??? ''
关）分性质、仪器灵敏度有—绝对校正因子（与组—'if
的量或质量—进入检测器中的物质—im
si
is
ss
ii
s
i
mi mA
mA
Am
Am
f
ff ???
'
'
][ giwi
mi
ff
f
，相对重量校正因子相对摩尔校正因子
作条件变化无关）—相对校正因子（与操—
定量）（或不可以直接用
同一检测器响应不同相同量的不同物质对于
不同质对于不同检测器响应前提：相同量的同种物
iii ACm ?
续前
2,相对校正因子的测定
3,注意事项：
? 相对校正因子与待测物, 基准物和检测器类型有关,
与操作条件 （ 进样量 ） 无关
? 基准物,TCD→ 苯； FID→ 丁庚烷
? 以氢气和氦气作载气测的校正因子可通用
以氮气作载气测的校正因子与两者差别大
si AAsi 和测混匀进样基准物纯品过程：精称 ???
保留时间接近与前提,si
s
i
i
s
mi
ss
ii
s
i
m
m
A
Af
Af
Af
m
m ???
?
??
'
'
（三）定量方法
1,归一化法
2．外标法
3．内标法
4．内标对比法
1．归一化法
? 前提：试样中所有组分都产生信号并能检出色谱峰
? 依据：组分含量与峰面积成正比
? 优点：
? 简便, 准确
? 定量结果与进样量, 重复性无关 （ 前提 →柱子不超载 ）
? 色谱条件略有变化对结果几乎无影响
? 缺点：
? 所有组分必须在一定时间内都出峰
? 必须已知所有组分的校正因子
? 不适合微量组分的测定
%100%100%
11
???????? ?
nnii
ii
ii
ii
i fAfAfA
fA
fA
fAC
??
%100%100%
1
??????? ?
ni
i
i
i
i AAA
A
A
AC
??同系物或结构异构体
2．外标法,以待测组分纯品为对照物，与试样中待测
组分的响应信号相比较进行定量的方法
a．工作曲线法,i纯品 → 工作曲线，同体积样品与之比较 c
? 前提：进入检测器样品量与峰面积成正比
b,外标一点法,一种浓度对照物对比样品中待测组分含量
? 前提：截距为 0,对照品浓度与待测组分浓度接近
c,外标两点法：
? 前提：选 取两点对照品的浓度, 需涵盖待测浓度
si
i
si
i
A
A
C
C
)()( ?
? 外标法特点：
1）不需要校正因子，不需要所有组分出峰
2） 结果受进样量, 进样重复性和操作条件影响大
→ 每次进样量应一致, 否则产生误差
图示
back
3．内标法,无待测物纯品，加入样品中不含对照物，
以待测组分和对照物的响应信号对比定量
? 对内标物要求：
a,内标物须为原样品中不含组分
b,内标物与待测物保留时间应接近且 R>1.5
c,内标物为高纯度标准物质, 或含量已知物质
? 内标法优点：
? 进样量不超量时, 重复性及操作条件对结果无影响
? 只需待测组分和内标物出峰, 与其他组分是否出峰无关
? 适合测定微量组分
? 内标法缺点：
制样要求高；找合适内标物困难；已知校正因子
ss
ii
s
i
fA
fA
m
m
?
??? %100%100% ??????
m
m
fA
fA
m
mC s
ss
iii
i
siis AAmmm 和测混匀进样）（含过程,???
4．内标对比法 （已知浓度样品对照法）
配制等量加入内标物的样品溶液和对照品溶液
? 内标对比法特点：
不需要校正因子
进样量对结果影响不大
? 注：对于正常峰, 可以 h代替 A计算含量
对
样
对
样
）（）（ si
si
i
i
AA
AA
C
C )(
%
%)( ?
s
isi
i A
ACfC ???
si
si
mm
mm
?
?
）纯（
）样过程：（ sisi ffAA 和的比值消除利用?
0~ 的截距为前提,sisi AAmm
对
对
样
样 ）（）（
）（）（ %%
i
si
si
i CAA
AAC ???
示例
? 例 1：内标法测定无水乙醇中微量水分（见书 P358）
60.4130.0065.1)(065.1 21 ?????? ii hWA
30.4187.0065.1)(065.1 21 ?????? ss hWA
%23.0
%100
37.79
2 5 7 2.0
58.030.4187.0065.1
55.060.4130.0065.1
%100%
2
?
??
???
???
?
??
?
?
?
m
m
fA
fA
OH
s
ss
ii
比较
补充概念
? 相比, 流动相与固定相体积比
s
m
V
V??
?
K
V
VKk
m
s ???
练习
? 见书后 P361题 11
? 解：
m in0.160.10.17
m in0.130.10.14
'
2
'
1
???
???
R
R
t
t
mm
n
L
H
W
t
n
e f f
e f f
R
e f f
73.0
4 0 9 6
3 0 0 0
4 0 9 6)
1
0.16
(16)(16
22
2
'
2
???
???
0.16
1
0.16
0.13
1
0.13
0
'
2
2
0
'
1
1
???
???
t
t
k
t
t
k
R
R
续前
2.10.13 0.16
1
2 ???
k
k?
4 6 2 4)0.1 0.17(16)(16 22
2
2 ????
W
tn R
0.3114
2
2 ?
??
???
k
knR
?
?
cmL
LL
L
R
R 75.03
5.1
3
2
22
1
2
1 ?????
练习
? 见书后 P362题 12
? 解：
mlFtV c 5.1075.4324.000 ?????
m in94.324.018.4
m in43.224.067.2
m in17.124.041.1
'
'
'
???
???
???
RC
RB
RA
t
t
t
s
mR
s
m
m
s
V
V
t
t
V
Vk
C
CK ????
0
'
? 0VVm ?
2.12
1.14
5.10
24.0
93.3
54.7
1.14
5.10
24.0
43.2
63.3
1.14
5.10
24.0
17.1
???
???
???
C
B
A
K
K
K
62.1
54.7
2.12
08.2
63.3
54.7
,
,
???
???
B
C
BC
A
B
AB
K
K
K
K
?
?
一, 分离度 （ 分辨率 ） 及影响因素
二, 实验条件的选择
一、分离度（分辨率）及影响因素
1．分离度定义式
2．影响分离的因素（分离方程，分离度计算式）
1．分离度定义式
? 分离度, 相临两组分间峰顶间距离是峰底宽平均值的几倍
（衡量色谱分离条件优劣的参数）
讨论：
2
21
12
WW
ttR RR
?
???
峰宽和之半
）保留值之差（峰顶间距
)2(21)1(21
12
21
12 )(1 7 7.1)(2
WW
tt
WW
ttR RRRR
?
??
?
??
完全未分开
完全分离
基本分离
??
?????
?????
0.1
65.1
40.1
R
tR
tR
R
R
?
?
2．影响分离的因素（计算式）
前提 —— 定义式基础上，相邻两组分的 n一致（假设）
2
2
1
1
4 k
knR
??
???
?
?
柱选择项
柱容量项柱效项
理
理 H
Ln ? uCuBAH ???? /
'
1
'
2
1
2
1
2
R
R
t
t
k
k
K
K ????
a．柱效项及其影响因素：
影响色谱峰的宽窄
主要取决于色谱柱性能及载气流速
nR ?因为 ??? Rn所以
HnLn
1?? 或已知 ????? RnHL,或所以
nR ??
HRLR
1??? 或
续前
? 讨论：
? 增加柱效是提高分离度的一个直接有效手段
? 提高柱效, 改善分离的途径：增加柱长；降低板高
? 根据速率理论, 降低板高, 提高柱效的方法是：
1） 采用粒度较小, 均匀填充的固定相 （ A项 ↓ ）
2） 分配色谱应控制固定液液膜厚度 （ C项 ↓ ）
3） 适宜的操作条件：
流动相的性质和流速, 柱温等等 （ B项 ↓ ）
? 选用分子量较大、线速度较小的载气 —— N2气，
? 控制较低的柱温
b．柱选择项及其影响因素：
影响峰的间距
主要受固定相性质，以及柱温影响
?
? 1??R因为 ????? R，所以
?
?? 1
，无法分离01 ??? R?
的影响都很大微小变化对 R?
一倍???? R2.11.1?
续前
? 讨论：
? 增大柱选择性是改善分离度的最有力手段
? 气相色谱中, 柱选择性取决于固定相性质和柱温
? 选择合适的固定相使与不同组分的作用产生差别
才能实现分离
? 一般说, 降低柱温可以增大柱的选择性
c．柱容量项及其影响因素：
影响峰位
主要受固定相用量、柱温和载气流速的影响
k
kR
?? 1?
00 ??? Rk
????? Rkkk,1
???
?????
，峰扩张
，的影响对时
Rt
Rk
变慢时,???? Rkk 5
?????? RtRkk 很少，时，10
续前
? 讨论：
? 综合考虑分离度, 分离时间和峰检测几项因素
控制 k的最佳范围 2~5
? GC中, 增加固定液用量和降低柱温可以增加 k
图示
k 影响峰位
n 影响峰宽窄
α影响两峰间距
练习 如何根据具体情况改进分离度？
? α太小，两组分未分开
? 应改变固定相极性，降低柱温
? k 太小,n 也太小，
? 应增大固定液用量，降低柱温
? n 太小，许多组分未分开
? 应设法降低板高，提高柱效
二、实验条件的选择：
? 色谱条件包括分离条件和操作条件
? 分离条件是指色谱柱
? 操作条件是指载气流速, 进样条件及检测器
1,色谱柱的选择
2,柱温的选择
3,载气与流速的选择
4,进样条件的选择
1．色谱柱的选择（以气液分配色谱为主）
（ 1） 固定相的选择
（ 2）柱长的选择
（ 1）固定相的选择
? 固定液的选择：
1） 按, 相似相溶, 原则：极性相似或官能团相似
2） 按组分性质主要差别：
沸点相差大的选非极性固定液
沸点相差小的选极性固定液
3） 柱温 < 固定液最高使用温度 —— 防止固定液流失
? 载体的选择,种类，粒度，分布
续前
? 固定液配比的选择：
? 高沸点组分 →比表面积小的载体
低固定液配比 （ 1%~3%）
低柱温
? 低沸点组分 →高固定液配比 （ 5%~25%）
加大 k值, 达到良好分离
? 难分离组分 →毛细管柱
（ 2）柱长的选择
? 注：根据 R>1.5选择 L,一般较短 (0.6~6m)
不可以无限延长柱子
??????,柱压，峰宽,RnL
LnH
k
??不变
不变不变,?
2
12
2
1 )(
L
L
R
R ??
练习
例：两组分在 1 m长柱子上的分离度为 0.75,问使用
多长柱子可以使它们完全分离？
解,LRnR ????
2
1
2
1
L
L
R
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2
1
5.1
75.0
L
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2．柱温的选择
? 原则：
1） 在能保证 R的前提下, 尽量使用低柱温,
但应保证适宜的 tR及峰不拖尾, 减小检测本底
2） 根据样品沸点情况选择合适柱温
柱温应低于组分沸点 50~1000C
宽沸程样品应采用程序升温
??T
?
?
??
??
固定相检测本底
K
D
C
DB
L
g
1
2?
续前
? 程序升温好处：
改善分离效果
缩短分析周期
改善峰形
提高检测灵敏度
3．载气与流速的选择
? 选择载气应与检测器匹配
? TCD→选 H2,He（ u 大, 粘度小 ）
? FID→选 N2（ u小, 粘度大 ）
minHu op ?
CBu op ?
BCAH 2m i n ??
op
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分析时间是主要矛盾
分离是主要矛盾
? 选择流速和载气应同时考虑对柱效和分析时间的影响
?????
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uCHuu
uBNuu
op
op
气选
气选
2
2
4．进样条件的选择
? 气化室温度 —— 一般稍高于样品沸点
? 检测室温度 —— 应高于柱温 30~500C
? 进样量 —— 不可过大，否则造成拖尾峰
? 注：
检测器灵敏度足够 →进样量尽量小
最大允许进样量 —— 使理论塔板数降低 10%的进样量
练习
例：已知物质 A和 B在一根 30.0cm长的柱上的保留时间分别为
16.40和 17.63min，不被保留组分通过该柱的时间为 1.30min，
峰底宽为 1.11和 1.21min，试计算
（ 1）柱的分离度（ 2）柱的平均塔板数（ 3）塔板高度
（ 4）达 1.5分离所需柱长
解：
06.121.111.1 )40.1663.17(2)(2
21
12 ?
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WW
ttR RR
2)(16
W
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3 3 9 7)21.1 63.17(16 22 ??n
3 4 4 52 )3 3 9 73 4 9 3(2 21 ????? nnn
续前
mmnLH 3107.83 4 4 53 0 0 ?????
LRnR ????
cmL 602 ??
2
1
2
1
L
L
R
R ?
2
30
5.1
06.1
L
??
第六节 定性定量分析
一, 定性分析
二, 定量分析
一、定性分析
1,利用保留值定性
1） 已知对照物定性：定性专属性差
? 注：不同组分如在某一色谱条件下保留值相同, 应
更改色谱柱再检测, 粗步推算是否为一个纯物质峰
2） 相对保留值定性
3） 利用保留指数定性：唯一可靠, 准确, 重复性好
2,利用化学反应定性：收集柱后组分, 官能团反应
定性鉴别 （ 非在线 ）
3,利用两谱联用定性,GC-MS,GC-FTIR
二、定量分析：
以峰高或峰面积定量
（一）峰面积的测量
（二）定量校正因子
（ 三 ） 定量方法
（一）峰面积的测量
2．非正常峰（不对称峰）
1．对于正常峰
iii ACm ?? )( 或定量依据
21605.1 WhA ???
)(216 0 5.1 85.015.0 WWhA ?????
3．自动求和（自动积分仪或色谱工作站）：
直接给出 A,h,W1/2
注：当色谱操作条件一定时, 在一定进样量范围内
（ 不超载 ）, W1/2与进样量无关
（二）定量校正因子
1,两种表示方法
i
i
iiii A
mfAfm ??? ''
关）分性质、仪器灵敏度有—绝对校正因子（与组—'if
的量或质量—进入检测器中的物质—im
si
is
ss
ii
s
i
mi mA
mA
Am
Am
f
ff ???
'
'
][ giwi
mi
ff
f
，相对重量校正因子相对摩尔校正因子
作条件变化无关）—相对校正因子（与操—
定量）（或不可以直接用
同一检测器响应不同相同量的不同物质对于
不同质对于不同检测器响应前提：相同量的同种物
iii ACm ?
续前
2,相对校正因子的测定
3,注意事项：
? 相对校正因子与待测物, 基准物和检测器类型有关,
与操作条件 （ 进样量 ） 无关
? 基准物,TCD→ 苯； FID→ 丁庚烷
? 以氢气和氦气作载气测的校正因子可通用
以氮气作载气测的校正因子与两者差别大
si AAsi 和测混匀进样基准物纯品过程：精称 ???
保留时间接近与前提,si
s
i
i
s
mi
ss
ii
s
i
m
m
A
Af
Af
Af
m
m ???
?
??
'
'
（三）定量方法
1,归一化法
2．外标法
3．内标法
4．内标对比法
1．归一化法
? 前提：试样中所有组分都产生信号并能检出色谱峰
? 依据：组分含量与峰面积成正比
? 优点：
? 简便, 准确
? 定量结果与进样量, 重复性无关 （ 前提 →柱子不超载 ）
? 色谱条件略有变化对结果几乎无影响
? 缺点：
? 所有组分必须在一定时间内都出峰
? 必须已知所有组分的校正因子
? 不适合微量组分的测定
%100%100%
11
???????? ?
nnii
ii
ii
ii
i fAfAfA
fA
fA
fAC
??
%100%100%
1
??????? ?
ni
i
i
i
i AAA
A
A
AC
??同系物或结构异构体
2．外标法,以待测组分纯品为对照物，与试样中待测
组分的响应信号相比较进行定量的方法
a．工作曲线法,i纯品 → 工作曲线，同体积样品与之比较 c
? 前提：进入检测器样品量与峰面积成正比
b,外标一点法,一种浓度对照物对比样品中待测组分含量
? 前提：截距为 0,对照品浓度与待测组分浓度接近
c,外标两点法：
? 前提：选 取两点对照品的浓度, 需涵盖待测浓度
si
i
si
i
A
A
C
C
)()( ?
? 外标法特点：
1）不需要校正因子，不需要所有组分出峰
2） 结果受进样量, 进样重复性和操作条件影响大
→ 每次进样量应一致, 否则产生误差
图示
back
3．内标法,无待测物纯品，加入样品中不含对照物，
以待测组分和对照物的响应信号对比定量
? 对内标物要求：
a,内标物须为原样品中不含组分
b,内标物与待测物保留时间应接近且 R>1.5
c,内标物为高纯度标准物质, 或含量已知物质
? 内标法优点：
? 进样量不超量时, 重复性及操作条件对结果无影响
? 只需待测组分和内标物出峰, 与其他组分是否出峰无关
? 适合测定微量组分
? 内标法缺点：
制样要求高；找合适内标物困难；已知校正因子
ss
ii
s
i
fA
fA
m
m
?
??? %100%100% ??????
m
m
fA
fA
m
mC s
ss
iii
i
siis AAmmm 和测混匀进样）（含过程,???
4．内标对比法 （已知浓度样品对照法）
配制等量加入内标物的样品溶液和对照品溶液
? 内标对比法特点：
不需要校正因子
进样量对结果影响不大
? 注：对于正常峰, 可以 h代替 A计算含量
对
样
对
样
）（）（ si
si
i
i
AA
AA
C
C )(
%
%)( ?
s
isi
i A
ACfC ???
si
si
mm
mm
?
?
）纯（
）样过程：（ sisi ffAA 和的比值消除利用?
0~ 的截距为前提,sisi AAmm
对
对
样
样 ）（）（
）（）（ %%
i
si
si
i CAA
AAC ???
示例
? 例 1：内标法测定无水乙醇中微量水分（见书 P358）
60.4130.0065.1)(065.1 21 ?????? ii hWA
30.4187.0065.1)(065.1 21 ?????? ss hWA
%23.0
%100
37.79
2 5 7 2.0
58.030.4187.0065.1
55.060.4130.0065.1
%100%
2
?
??
???
???
?
??
?
?
?
m
m
fA
fA
OH
s
ss
ii
比较
补充概念
? 相比, 流动相与固定相体积比
s
m
V
V??
?
K
V
VKk
m
s ???
练习
? 见书后 P361题 11
? 解：
m in0.160.10.17
m in0.130.10.14
'
2
'
1
???
???
R
R
t
t
mm
n
L
H
W
t
n
e f f
e f f
R
e f f
73.0
4 0 9 6
3 0 0 0
4 0 9 6)
1
0.16
(16)(16
22
2
'
2
???
???
0.16
1
0.16
0.13
1
0.13
0
'
2
2
0
'
1
1
???
???
t
t
k
t
t
k
R
R
续前
2.10.13 0.16
1
2 ???
k
k?
4 6 2 4)0.1 0.17(16)(16 22
2
2 ????
W
tn R
0.3114
2
2 ?
??
???
k
knR
?
?
cmL
LL
L
R
R 75.03
5.1
3
2
22
1
2
1 ?????
练习
? 见书后 P362题 12
? 解：
mlFtV c 5.1075.4324.000 ?????
m in94.324.018.4
m in43.224.067.2
m in17.124.041.1
'
'
'
???
???
???
RC
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RA
t
t
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s
mR
s
m
m
s
V
V
t
t
V
Vk
C
CK ????
0
'
? 0VVm ?
2.12
1.14
5.10
24.0
93.3
54.7
1.14
5.10
24.0
43.2
63.3
1.14
5.10
24.0
17.1
???
???
???
C
B
A
K
K
K
62.1
54.7
2.12
08.2
63.3
54.7
,
,
???
???
B
C
BC
A
B
AB
K
K
K
K
?
?
