University of Science and Technology of China
第十九章
氨基酸、多肽、蛋白质和核酸
Amino Acids,Peptides
and Nucleic acids




Organic Chem
蛋白质:
含氮的天然高聚物,生物体内一切组织的基本组成部分
除水外,细胞内 80%都是蛋白质,人类的主要营养物质之一。
酶(球蛋白) —— 机体内起催化作用
激素(蛋白质及其衍生物) —— 调节代谢
血红蛋白 —— 运输 O2和 CO2
抗原抗体 —— 免疫作用
蛋白质 → 氨基酸
在生命现象中起重要的作用:
Organic Chem
§ 一、氨基酸
一、简介:
蛋白质水解 → α -氨基酸
天然 --有旋光性,L-构型。
( S)
半光 氨 酸例外
( R )型。
H 2 N
C O O H
R
C H
C O O H
C H 3
HH O
C O O H
R
HH 2 N
L - 乳 酸 L - 氨 基 酸
C O O H
C H 2 S H
HH 2 N
Organic Chem
20种常见氨基酸:
结构 名称 缩写 等电点
甘氨酸 Gly 5.97
丙氨酸 Ala 6.00
*颉氨酸 Val 5.96
*异亮氨酸 Ile 5.98
I、中性
N H
2
C
H
C O O H
N H
2
C H( H
3
C )
2
H C C O O H
N H
2
C HC
2
H
5
H C C O O H
C H
3
N H
2
C H
2
C O O H
C H
3
Organic Chem
结构 名称 缩写 等电点
*亮氨酸 Leu 6.02
*苯丙氨酸 Phe 5.48
半光氨酸 Cys 5.07
*苏氨酸 Thr 5.6
N H
2
C H C O O H( H
3
C )
2
H C H
2
C
N H
2
C H C O O HC
6
H
5
H
2
C
N H
2
C H C O O HH S H
2
C
N H
2
C H C O O HH
3
C H C
O H
Organic Chem
谷酰胺 Gln 5.56
天冬酰胺 Asn 5.07
结构 名称 缩写 等电点
*蛋氨酸 Met 5.74
丝氨酸 Ser 5.68
O
H
2
N C ( C H
2
)
2
C H C O O H
N H
2
O
H
2
N C C H
2
C H C O O H
N H
2
C H
3
S ( C H
2
)
2
C H C O O H
N H
2
H O C H
2
C H C O O H
N H
2
Organic Chem
结构 名称 缩写 等电点
脯氨酸 pro 6.30
酪氨酸 Tyr 5.66
*色氨酸 Trp 5.89
天冬氨酸 Asp 2.77
II 酸性
N
H
C O O H
C H
2
C HH O C O O H
N H
2
N
H
C H
2
C H C O O H
N H
2
H O O C C H
2
C H C O O H
N H
2
Organic Chem
结构 名称 缩写 等电点
谷氨酸 Glu 3.22
III 碱性
*赖氨酸 Lys 9.74
精氨酸 Arg 10.76
组氨酸 His 7.59
(*为必要氨基酸,人体内不能合成,只能从食物中得到)
H O O C ( C H
2
)
2
C H C O O H
N H
2
H
2
N ( C H
2
)
4
C H C O O H
N H
2
C - N H ( C H
2
)
3
C H C O O H
N H
2
H
2
N
N H
N
H N
C H
2
C H
N H
2
C O O H
Organic Chem
二、氨基酸的性质:
1、两性
离子型化合物,熔点高(分解)
难溶于有机溶剂
通常以内盐形式存在:
H 2 N HC C O O H
R
H C l
H 3 N HC C O O H
R
H 2 N HC C O O - N a +
R
N a O H
H 3 N
H
C C O O
R
Organic Chem
等电点
中性氨基酸 5~ 6.3
酸性氨基酸 2.8~ 3.2
碱性氨基酸 7.6~ 10.8
溶解度最小
控制 PH值,可得不同电荷
形式的离子 — 电泳分离
可以分别起氨基和酸基的反应:
2、与亚硝酸的反应:
定量分析伯氨基
H 3 N C H C O O
R
O
C C lC 6 H 5
酰 基 化
N H
H
C C O O H
R
C 6 H 5 C
O R ' O H
酯 化
H 2 N
H
C C O O R '
R
R C H
N H 2
C O O H
H N O 2
R C H
O H
C O O H + N 2 + H 2 O
Organic Chem
紫色物质,用于 α-氨基酸
的比色测定和纸层析显色
3、与水含茚三酮的反应:
R C H
N H
2
C O O H
O
O
O H
O H
+
- 2 H
2
O
O
O
O
O
N
H
C H
R
N C H C O O H
R
- C O
2
O
O
N C H
2
R
O
O
N H
2
H
R C H O +
O
O
O H
O H O
O
N
H
O
O
O
O
N
O
O
H
H
2
O
Organic Chem
三、氨基酸的制备,
蛋白质水解 —————— 20种常见氨基酸
有机合成:
1、由醛(或酮)制备:
R C H O
O H
R H C C N
N H 3 N H 2
R H C C N
H 2 O N H 2
R H C C O O HN H
4 C l
K C N
Organic Chem
盖布瑞尔法可得比较纯产品:
3、由丙二酸酯合成:
例,
N K
O
O
+
R
C H C O O R 'X N
O
O
C H C O O R '
R
N a O H / H 2 O
C O O H
C O O H
+
R
C H C O O HH 2 N + R ' O H
O r N H 2 N H 2
C O O E t
C H 2
C O O E t
+ H N O 2
C O O E t
C
C O O E t
N O H
① H 2 / P t
② 醋 酐
C O O E t
H C
C O O E t
N H C C H 3
O
Organic Chem
H C H O
O H
C O O E t
C
C O O E t
N H C C H
3
O
H O H
2
C
H
3
O
- C O
2
C O O H
C H N H
2
H O H
2
C
C O O E t
H C
C O O E t
N H C C H
3
O
N
H
C H
2
N ( C H
3
)
2
N
H
C H
2
C O O E t
C
C O O E t
N H C C H
3
O
1 ) H
2
O
2 ) - C O
2
N
H
C H
2
C H
N H
2
C O O H
色 胺 酸
C O O E t
H C
C O O E t
N H C C H
3
O
丝 胺 酸
O H
-
Organic Chem
溴代丙二酸酯结合盖布瑞尔法亦可
例:
N K
O
O
N
O
O
C H
C O O E t
C O O E t
C l C H
2
C H
2
S C H
3
N
O
O
C
C O O E t
C O O E t
C H
2
C H
2
S C H
3
N a O H H C l
C H C H
2
O O H
N H
2
C H
3
S C H
2
C H
2
5 0 % 蛋 胺 酸
B r C H ( C O O E t )
2
Organic Chem
四、氨基酸的拆分:
合成外消旋氨基酸,用酶拆分是重要的方法一。
例,D L - ( C H 3 ) 2 C H C H 2 C H C O O H
N H 2
O
H 3 C C O
2
D L - C H 3 ) 2 C H C H 2 C H C O O H
N H C C H
3
O
水 解 酶
D - 亮 胺 酸 乙 酰 胺 L - 亮 胺 酸
Organic Chem
§ 二、多肽
氨基酸 A的羧基与 B的氨基缩合成酰胺,
2个氨基酸形成肽 —— 二肽 肽键
3个氨基酸形成肽 —— 三肽
…………………………
分子量 < 10000---多肽 → 组成蛋白质
许多多肽本身有重要的生理作用
后叶催产素 —— 八肽
胰岛素 —— 五十一肽
O
C N H
一、多肽的结构测定,
基本问题 由哪些氨基酸组成的,每种有多少个?这些氨基酸按照什么次序结合成肽键?
Organic Chem
做法:
① 多 肽
6 N H C l
1 1 0 ℃ ( 1 1 h )
各 种 氨 基 酸
层 析
分 离
种 类
含 量
分 子 量
每 种 数 目
② 连 接 顺 序, a 氮 端 分 析
H
2
N C H C
O
R
H N C H C
O
R
1
H N C H C
O
R
2
H N C H C
O
R
3
H N C H C O O H
O
R
n
N 端
碳 端
Organic Chem
测 N 端, ( 1)桑格试剂法
缺点:只能测 N 端的一个氨基酸
FO
2
N
N O
2
+ H
2
N C H
R
C
O
N H C H C
O
R '
O
2
N
N O
2
H N C H
R
C
O
N H C H C
O
R '
H
2
O
H
O
2
N
N O
2
N H C H
R
C O O H
O
+ N H
2
C H C O O H
O
R '
+ … …
黄 色, 分 开 鉴 定
Organic Chem
( 2),Edman 水解:
异硫睛酸苯酯 ( )N C SC 6 H 5
N C SC
6
H
5
+ H
2
N C H
R
C
O
N H C H C
O
R '
N HC
6
H
5
C
S
H N C H
R
C
O
N H C H C
O
R '
H C l
N
C C H
N H
C
O
C
6
H
5
S
R
+ N H
2
C H C
O
R '
层 析 分 离, 与 标 准
样 品 对 照, 确 定
C H
R
C O O H
继 续 降 解 … … 自 动 化 分 析
( 多 肽 不 太 长 时 可 靠 )
只 能 测 几 十 个 氨 基 酸 的 顺 序
Organic Chem
测 C端, ( 1)、羧基多肽酶法:
( 2)、部分水解法:
各种蛋白水解酶能水解特定的肽键:
多肽 ?小肽,然后分析,
H N C H
R '
C
O
N H C H C O O H
O
R
H
2
O
羧 基 多 肽 酶
H N C H
R '
C O O H
O
+ N H
2
C H C O O H
O
R
多 次 重 复, 连 续 检 验
断 下 来 的 氨 基 酸
只 能 靠 近 游 离 羧 基 一 端
的 肽 键 被 水 解
Organic Chem
如,
H N C H
R
C
O
N H C H C
O
R '
精, 赖 氨 酸
胰 岛 酶 O
H N C H
R '
C
O
N H C H C
O
R
色, 酪, 苯 丙
麋 蛋 白 酶
H N C H
R '
C
O
N H C H C
O
R
色, 酪, 苯 丙
胃 蛋 白 酶
Organic Chem
二、多肽的合成:
要求,氨基酸按一定的次序连接起来达到一定分子量
不外消旋化
COOH的保护
比酰胺
易水解
氨 基 酸 A 和 B A - A, B - B, A - B 和 B - A
要 得 到 A - B, 保 护 A 的 N H 2 和 B 的 C O O H
C O O C H
3
H
2
O, O H H
C O O H
C O O C
2
H
5
H
2
O, O H H
C O O H
C O O C H
2
C
6
H
5
H
2
O, O H H
( 更 常 用 )
H
2
/ P d,C
C O O H + C
6
H
5
C H
3
Organic Chem
NH2的保护:
N H
2
O
CC
6
H
5
C H
2
O C l
O
C( H
3
C )
3
C O N
3
O
CC
6
H
5
C H
2
O N H
O
C( H
3
C )
3
C O N H
H
2
/ P d
C
6
H
5
C H
3+
R
C H C O O HH O O C N H
H C l
C ( C H
3
)
3
R
C H C O O H +H O O C N H
- C O
2
- C O
2
N H
2
N H
2
Organic Chem
§ 三、蛋白质
分类
纤维蛋白, 丝、毛、皮、角、爪和甲等
球蛋白, 酶和蛋白激素(溶于水、盐水等
结合蛋白,与核酸、糖、脂肪及血红素等结合
一、结构:四级结构
1、氨基酸组成和顺序、
2、肽链按, ① α-螺旋方式卷曲而成的空间结构(通常)
②平行或非平行排列的折叠状
3、同一根多肽链形成螺旋状,某些部分还折叠起来,链
的形状、距离与特定的生理作用有关。
4、若干分子堆叠形成 n根 纤维蛋白链扭成股,n股又扭成绳状
n根链累在一起形成球状
Organic Chem
二、蛋白质的性质:
1、
等电点, ( 分子中仍存在游离 NH2,COOH,OH、
SH及其他酸性或碱性的基团)
胶体性质, 分子颗粒直径在 0.1- 0.001um(胶粒幅度内 )
表面带电,同电排斥,隔开不粘合。
2、蛋白质的变性,
一、二级结构、氢键的破坏 —— 不可逆变性
三级结构 - S- S- 的破坏 —— 可逆变性
Organic Chem
§ 四、核酸
一、组成:
核 苷 酸
缩 水
核 酸
核 杂 环 磷
糖 碱 基 酸
C H O
HH
C H
2
O H
C H
2
O H O H
O H
O
C H
2
O H B
O H
H ( O H )
O
胸 腺 嘧 啶
C H
2
O H
O H
O
N
N H
O
O
H
3
C
2 - 脱 氧 核 糖 2 - 脱 氧 胸 苷
核 苷
Organic Chem
C H O
C H
2
O H
C H
2
O H O H
O H
O H
O 腺


尿


C H
2
O H
O H
O H
O
N
N
N
N
N H
2
C H
2
O H
O H
O H
O
N
N H
O
O
D - 核 糖
腺 苷
尿 苷
Organic Chem
杂 环 碱 基
嘌 呤
嘧 啶
腺 嘌 呤
鸟 嘌 呤
胞 嘧 啶
鸟 嘧 啶
胸 腺 嘧 啶
N
N H
N
N
H
O
N
N
N
N
H
N H
2
N H
2
N
H
N
O
N H
2
N H
H N
O
O
N H
H N
O
O
H
3
C
R N A
Organic Chem
N
N
N
N
N H
2
C H
2
O H
O HO
O
PO O H
O H
3 - 腺 嘌 呤 核 苷 酸
( 3 - 腺 苷 酸 )
C H
2
O HO H
O
O
P O H
O
H O
N
N H
O
O
5 - 尿 嘧 啶 核 苷 酸
( 5 - 尿 苷 酸 )
Organic Chem