第七章
吸 光 光 度 法
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主要内容
概述
吸光光度法的基本原理
显色反应及显色条件的选择
测量条件的选择
分光光度计
吸光光度法的应用
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§ 7-1 概述
分析方法的比较
§ 7-2 吸光光度法的基本原理
一、物质的颜色对光的选择性吸收
吸光光度法是基于被测物质的分子对光具有
选择性吸收 的特性而建立起来的分析方法。
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当一束光照射到某物质的溶液时,物质对光的吸
收具有选择性,只有当照射光的光子能量与被照射物
质的分子、原子或离子由基态到激发态之间的能量之
差相等时，这个波长的光才被吸收。
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吸收曲线
将不同波长的光照射某一固定浓度和液层厚度的
溶液，并测量每一波长下溶液对光的吸收程度
（吸光度），以 吸光度为纵坐标，相应波长为横
坐标,所得曲线，称为 吸收曲线 。如图为高锰酸
钾和重铬酸钾的吸收曲线。
吸收曲线是吸光光度法选择测定波长的重要
依据。
300 400 500 600 700
?/nm
350
525 545
Cr2O72- MnO4
-
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
Ab
so
rb
an
ce
350
Cr2O72-,MnO4-的吸收曲线
二,光吸收基本定律, Lambert-Beer定律
A=lg(I0/It)= lg1/T = kbc
It
I0
b dx
I I-dI
s
吸光度 介质厚
度 (cm)
朗伯 -比尔定律公式：
透光率
入射光强度
透射光强度
T－透光率（透射比）
（ Transmittance）
0
t
I
T=
I
A = lg (I0/It) = lg(1/T) = -lgT = kbc
0 1 2 3 4 mg/ml
A
*
0.8
0.6
0.4
0.2
0
k 吸光系数 Absorptivity
a的单位, L·g-1·cm-1
当 c的单位用 g·L-1表示时，用 a表示，
A＝ abc
?的单位, L·mol-1·cm-1
当 c的单位用 mol·L-1表示时，用 ?表示,
?－摩尔吸光系数 Molar Absorptivity
A＝ ?bc
11
0 1 2 3 4 mg/ml
A
*
0.8
0.6
0.4
0.2
0
溶液浓度的测定
A＝ ?bc
工作曲线法：测定某物质浓
度时，先配制一系列标准溶
液，按所需条件显色后，分
别测定它们的吸光度 A。 以 A
为纵坐标，浓度 C为横坐标,
绘制的曲线为工作曲线（或
标准曲线）。
朗伯 -比尔定律的分析应
用 —