第十四章 中药及其制剂分析概论基本要求概 述中药及其制剂分析中待测成分的提取分离与纯化方法中药及其制剂分析的一般程序练习与思考基本要求
一、掌握中药及其制剂测定前的提取纯化方法。
二、熟悉中药及其制剂分析的一般程序与方法。
三、了解中药及其制剂的分类。
一、概 述
（一）中药及其制剂定义
1,中药,以中医药学理论体系的术语表述其性能、功效和使用规律，并且只有当按中医药学理论指导其临床应用的传统药物，才可称之谓中药。
2,中药制剂（中成药）,用中药为原料，按中医药学理论谴药、配伍和组方，以一定制备工艺和方法制成一定剂型的药物制剂。
（二）中药及其制剂的质量标准
1．现状：中国药典已收载中药品种 992种，其中中药材 532种，中药制剂 460种。中药及其制剂的质量控制主要包括鉴别、检查和含量测定。
2．进展：如何确定中药制剂质量评价的指标是 关键问题 。只有在天然药物化学、药理学、药剂学、药物分析以及临床和基础医学等方面进行深入的研究，探明中药制剂的作用机理、主要成分及相互的作用关系后，
才能评价其质量的客观指标，制定出比较完善的质量标准。
（ 三）中药制剂分析的特点由于中药制剂的组成十分复杂，因此给分析测试带来一定困难，中药制剂分析的样品一般需要经过提取、纯化等预处理过程，以排除干扰组分的干扰。但过于繁琐预处理不宜作为药品常规检验的方法。中药制剂中有效成分的含量一般较低，因此要求方法有较高的灵敏度。
（四）中药及其制剂的分类与质量分析要点
1．分类中药材及其炮制品液体制剂,合剂与口服液、酒剂和酊剂、
注射剂半固体制剂,煎膏剂、浸膏剂和流浸膏剂固体制剂,丸剂、散剂、颗粒剂、片剂胶囊剂
2．质量分析 要点注射剂：为了确保中药注射剂的质量稳定、可控，
中药注射剂在固体中药材品种、产地和采收期的前提下，需制订中药材、有效部位或中间体、注射剂的 指纹图谱 。
HPLC
色谱指纹图谱 GC
中药指纹图谱 光谱指纹图谱 TLC
脱氧核糖核酸指纹图谱。
二、中药及其制剂分析中待测成分的提取分离与纯化方法
（一）提取方法
1．萃取法
2．冷浸法
3．回流提取法
4．连续回流提取法：使用索氏提取器连续进行提取，
提取效率高。
5,水蒸气蒸馏法,适用于挥发性组分的提取。组分对热应稳定。
6．超声提取法：超声波具有助溶作用，提取较冷浸法速度快，一般仅需数十分钟浸出即可达到平衡。由于超声提取过程中溶剂可能会有一定的损失，所以用作含量测定时,应于 超声振荡前先称定重量，提取完毕后，放冷至室温，再称重，并补足减失的重量，滤过后，取续滤液备用。用于药材粉末的提取时，由于组分是由细胞内逐步扩散出来，速度较慢，
加溶剂后 宜先放置一段时间,再超声振荡提取。
7．超临界流体萃取法
1）超临界流体：是指当压力和温度物质的临界点时，
所形成的单一相态。
常用的超临界流体物质 临界温度 临界压力 优点
（ ℃ ） （ KPa）
CO2 31 7390 较低的临界温度、惰性
、无毒、纯净、价廉
N2O 36 7290
NH3 132 11300
2）超临界流体特点：
①具有与液体相似的密度：具有与液体相似的较强的溶解能力；
②溶质在其中扩散系数与气体相似：具有传质快，提取时间短的优点，提取完全一般仅需数十分钟；
③表面张力为零：很容易渗透到样品的里面，带走测定组分；
④选择性强：通过改变萃取的条件，如温度、压力等，
可以选择性的萃取某些组分；
⑤在通常状态下即成为气体：萃取后溶剂立即变为气体而逸出，容易达到浓集的目的。
装置
影响因素：压力、温度、改性剂、提取时间温度：恒压下温度升高，可提高萃取效率压力：恒温下提高压力，有利于极性组分和高分子量组分的提取；压力降低，有利于非极性组分的提取。
改性剂：甲醇、氯仿
（二）鉴别试验
1．鉴别试验的重要性：中药及其制剂的鉴别可以通过确认其中所含药味的存在或某些特征成分的检出而达到鉴别的目的。目前部分中药尚无含量测定项目，因此，鉴别就成为中药制剂质量控制的一个非常重要的环节。
2．鉴别方法性状鉴别显微鉴别：显微化学反应鉴别法理化法鉴别：微量升华法荧光与光谱鉴别法颜色反应及沉淀反应鉴别法色谱鉴别：纸色谱法毛细管分析法
TLC,GC,HPLC
1） 显微鉴别：
光学显微镜或电子显微镜鉴别：
该法通常在下列情况中应用：药材及炮制品的外形鉴别特征不明显或外形相似难于鉴别而组织构造不同时；
药材破碎或呈粉末不易用肉眼辨认或区分时；含原药材粉末的中药制剂；处方中主要药味及化学成分不清楚或尚无化学鉴别法。
注,处方中多味药物共同具有的显微特征不能作为鉴别特征。
多来源药材应选择其共有的显微特征。
显微化学反应鉴别法：
一般可取药材切片或粉末，中成药取粉末，置载玻片上，滴加各种试剂，加盖玻片，在显微镜下观察产生的结晶、沉淀物，以及特殊的颜色变化，
作为鉴别特征。该法可以确定基础品种中特殊化学成分的存在及在组织中的分布。
例：
黄连：纤维素鲜黄色左金丸 均含石细胞：不能采用吴茱萸：腺毛例：黄连粉末 +水 +稀盐酸 黄色结晶槟榔粉末 +水 +稀盐酸滤液 +碘化铋钾 浑浊显微观察：红石榴球形或方形结晶振摇微热过滤载玻片上
2） TLC法薄层板：最多的是硅胶 G板，也可另加 0.2%～ 0.5%的
CMC作为黏合剂，可用软铝笔在板上做标记；能经受一般的化学试剂处理，如用含浓硫酸的显色剂处理后，
可将酸在水中洗去，然后烘干保存。
一般通用的展开剂：无水乙醇 -苯（ 1,4）
苯 -氯仿（ 1,3）
丙酮 -甲醇（ 1,1）
显色方法：紫外灯下观察荧光斑点选用显色剂
供试品溶液的制备：
一份,+盐酸至 pH3
样品 粉末 滤液 +乙醚一份,+碳酸钠至 pH11
提取液残渣 +乙醇供试品溶液粉碎 水煮沸过滤回收乙醚溶解
（三）杂质检查杂质检查项目：水分、灰分、酸不溶性灰分、砷盐、重金属、农药残留量、浸出物、挥发油、总氮测定等。
1．水分检查法中国药典（ 2000年版一部）附录收载以下四种方法,烘干法甲苯法 69.3℃
减压干燥法
GC法。
2．总灰分和酸不溶性灰分总灰分,是指药材或制剂经加热炽灼灰化遗留的无机物，包括药物本身所含无机盐（称为生理灰分）
、泥土、砂石等药材外表黏附的无机杂质。
酸不溶性灰分,主要是外来杂质，如泥土、砂石总灰分 +稀盐酸 残渣滤纸残渣：
外来杂质水浴 过滤水洗滤纸炽灼恒重碳酸盐生理灰分溶解，而泥砂（硅酸盐）不溶
3．砷盐与重金属检查与化学合成药物不同的是，检查前必须对样品进行有机破坏，破坏方法有 干法 和 湿法 两种。
重金属检查方法：二硫腙比色法原子吸收分光光度法砷盐检查方法：古蔡法
Ag-DDC法原子吸收分光光度法
4．农药残留量农药的来源常用的农药：有机氯类：艾氏剂、氯丹、六六六等有机磷类：三硫磷、氯硫磷、蝇毒磷等检查原则：农药不明的样品测定总氯量、总磷量，
已知农药的样品可采用 GC法测定某个农药的量。
总氯量的测定样品细粉 +乙腈 -水 滤液 +石油醚 萃取液
（ 65:35）
搅拌过滤萃取浓缩 氧瓶燃烧吸收液：硫氰酸铵比色法
GC测定取样 萃取农药 柱纯化 GC测定测定有机氯时，使用电子捕获检测器（ ECD）；
测定有机磷时，使用火焰光度检测器（ FPD）。
上法得的石油醚萃取液总磷量的测定洗脱液 吸收液：磷钼酸比色法柱层析 浓缩氧瓶燃烧
（四）含量测定含量测定方法主要有：化学分析法、分光光度法、薄层扫描法和 HPLC法。
1．薄层扫描法
1）对色谱条件的要求：选择性好，组分能完全分离，
斑点对称、均匀、不拖尾。
2)测量方法：多使用 反射法 。
3）扫描方式：
单波长双波长 测定波长 选在被测组分的最大吸收波长，
参比波长 选在组分无吸收的位置上，若背景有均匀污染时，可选择背景光谱中与测定波长的等吸收处。
4） 散射参数 SX,由于薄层板对光的散射，其吸收度和浓度之间的关系不服从比尔定律，
二者不呈直线，但符合 K-M
方程，可以进行校正，使其成为直线。薄层扫描仪均装有线性化器，测定时需输入
SX值，因为吸收度 -浓度曲线的形状与 SX值有关。
5）定量方法：
外标法 若曲线经过原点，可用一点法校正；若曲线不经过原点，用二点法校正；必要时，可采用多点法校正。
内标法 将内标加入供试液中，以组分与内标峰面积比值作为定量依据。
（ 五）检验记录
1,要求,原始资料真实、详细、整洁。
2,内容,送检单位、送检日期、检品名称与规格、
批号、检验项目、检验方法、检验者、审核者及检验日期。对用显微镜或电镜检验所得的图象，
应真实描绘，注明放大倍数或附相片及说明。检验中所用仪器应标明型号。所得到得数局，应详加核对，并进行统计学处理。
练习与思考
1．中药制剂分析有何特点？
2．中药制剂分析中样品的前处理方法有哪些？
3．简述中药制剂分析的一般程序。
一、掌握中药及其制剂测定前的提取纯化方法。
二、熟悉中药及其制剂分析的一般程序与方法。
三、了解中药及其制剂的分类。
一、概 述
（一）中药及其制剂定义
1,中药,以中医药学理论体系的术语表述其性能、功效和使用规律，并且只有当按中医药学理论指导其临床应用的传统药物，才可称之谓中药。
2,中药制剂（中成药）,用中药为原料，按中医药学理论谴药、配伍和组方，以一定制备工艺和方法制成一定剂型的药物制剂。
（二）中药及其制剂的质量标准
1．现状：中国药典已收载中药品种 992种，其中中药材 532种，中药制剂 460种。中药及其制剂的质量控制主要包括鉴别、检查和含量测定。
2．进展：如何确定中药制剂质量评价的指标是 关键问题 。只有在天然药物化学、药理学、药剂学、药物分析以及临床和基础医学等方面进行深入的研究，探明中药制剂的作用机理、主要成分及相互的作用关系后，
才能评价其质量的客观指标，制定出比较完善的质量标准。
（ 三）中药制剂分析的特点由于中药制剂的组成十分复杂，因此给分析测试带来一定困难，中药制剂分析的样品一般需要经过提取、纯化等预处理过程，以排除干扰组分的干扰。但过于繁琐预处理不宜作为药品常规检验的方法。中药制剂中有效成分的含量一般较低，因此要求方法有较高的灵敏度。
（四）中药及其制剂的分类与质量分析要点
1．分类中药材及其炮制品液体制剂,合剂与口服液、酒剂和酊剂、
注射剂半固体制剂,煎膏剂、浸膏剂和流浸膏剂固体制剂,丸剂、散剂、颗粒剂、片剂胶囊剂
2．质量分析 要点注射剂：为了确保中药注射剂的质量稳定、可控，
中药注射剂在固体中药材品种、产地和采收期的前提下，需制订中药材、有效部位或中间体、注射剂的 指纹图谱 。
HPLC
色谱指纹图谱 GC
中药指纹图谱 光谱指纹图谱 TLC
脱氧核糖核酸指纹图谱。
二、中药及其制剂分析中待测成分的提取分离与纯化方法
（一）提取方法
1．萃取法
2．冷浸法
3．回流提取法
4．连续回流提取法：使用索氏提取器连续进行提取，
提取效率高。
5,水蒸气蒸馏法,适用于挥发性组分的提取。组分对热应稳定。
6．超声提取法：超声波具有助溶作用，提取较冷浸法速度快，一般仅需数十分钟浸出即可达到平衡。由于超声提取过程中溶剂可能会有一定的损失，所以用作含量测定时,应于 超声振荡前先称定重量，提取完毕后，放冷至室温，再称重，并补足减失的重量，滤过后，取续滤液备用。用于药材粉末的提取时，由于组分是由细胞内逐步扩散出来，速度较慢，
加溶剂后 宜先放置一段时间,再超声振荡提取。
7．超临界流体萃取法
1）超临界流体：是指当压力和温度物质的临界点时，
所形成的单一相态。
常用的超临界流体物质 临界温度 临界压力 优点
（ ℃ ） （ KPa）
CO2 31 7390 较低的临界温度、惰性
、无毒、纯净、价廉
N2O 36 7290
NH3 132 11300
2）超临界流体特点：
①具有与液体相似的密度：具有与液体相似的较强的溶解能力；
②溶质在其中扩散系数与气体相似：具有传质快，提取时间短的优点，提取完全一般仅需数十分钟；
③表面张力为零：很容易渗透到样品的里面，带走测定组分；
④选择性强：通过改变萃取的条件，如温度、压力等，
可以选择性的萃取某些组分；
⑤在通常状态下即成为气体：萃取后溶剂立即变为气体而逸出，容易达到浓集的目的。
装置
影响因素：压力、温度、改性剂、提取时间温度：恒压下温度升高，可提高萃取效率压力：恒温下提高压力，有利于极性组分和高分子量组分的提取；压力降低，有利于非极性组分的提取。
改性剂：甲醇、氯仿
（二）鉴别试验
1．鉴别试验的重要性：中药及其制剂的鉴别可以通过确认其中所含药味的存在或某些特征成分的检出而达到鉴别的目的。目前部分中药尚无含量测定项目，因此，鉴别就成为中药制剂质量控制的一个非常重要的环节。
2．鉴别方法性状鉴别显微鉴别：显微化学反应鉴别法理化法鉴别：微量升华法荧光与光谱鉴别法颜色反应及沉淀反应鉴别法色谱鉴别：纸色谱法毛细管分析法
TLC,GC,HPLC
1） 显微鉴别：
光学显微镜或电子显微镜鉴别：
该法通常在下列情况中应用：药材及炮制品的外形鉴别特征不明显或外形相似难于鉴别而组织构造不同时；
药材破碎或呈粉末不易用肉眼辨认或区分时；含原药材粉末的中药制剂；处方中主要药味及化学成分不清楚或尚无化学鉴别法。
注,处方中多味药物共同具有的显微特征不能作为鉴别特征。
多来源药材应选择其共有的显微特征。
显微化学反应鉴别法：
一般可取药材切片或粉末，中成药取粉末，置载玻片上，滴加各种试剂，加盖玻片，在显微镜下观察产生的结晶、沉淀物，以及特殊的颜色变化，
作为鉴别特征。该法可以确定基础品种中特殊化学成分的存在及在组织中的分布。
例：
黄连：纤维素鲜黄色左金丸 均含石细胞：不能采用吴茱萸：腺毛例：黄连粉末 +水 +稀盐酸 黄色结晶槟榔粉末 +水 +稀盐酸滤液 +碘化铋钾 浑浊显微观察：红石榴球形或方形结晶振摇微热过滤载玻片上
2） TLC法薄层板：最多的是硅胶 G板，也可另加 0.2%～ 0.5%的
CMC作为黏合剂，可用软铝笔在板上做标记；能经受一般的化学试剂处理，如用含浓硫酸的显色剂处理后，
可将酸在水中洗去，然后烘干保存。
一般通用的展开剂：无水乙醇 -苯（ 1,4）
苯 -氯仿（ 1,3）
丙酮 -甲醇（ 1,1）
显色方法：紫外灯下观察荧光斑点选用显色剂
供试品溶液的制备：
一份,+盐酸至 pH3
样品 粉末 滤液 +乙醚一份,+碳酸钠至 pH11
提取液残渣 +乙醇供试品溶液粉碎 水煮沸过滤回收乙醚溶解
（三）杂质检查杂质检查项目：水分、灰分、酸不溶性灰分、砷盐、重金属、农药残留量、浸出物、挥发油、总氮测定等。
1．水分检查法中国药典（ 2000年版一部）附录收载以下四种方法,烘干法甲苯法 69.3℃
减压干燥法
GC法。
2．总灰分和酸不溶性灰分总灰分,是指药材或制剂经加热炽灼灰化遗留的无机物，包括药物本身所含无机盐（称为生理灰分）
、泥土、砂石等药材外表黏附的无机杂质。
酸不溶性灰分,主要是外来杂质，如泥土、砂石总灰分 +稀盐酸 残渣滤纸残渣：
外来杂质水浴 过滤水洗滤纸炽灼恒重碳酸盐生理灰分溶解，而泥砂（硅酸盐）不溶
3．砷盐与重金属检查与化学合成药物不同的是，检查前必须对样品进行有机破坏，破坏方法有 干法 和 湿法 两种。
重金属检查方法：二硫腙比色法原子吸收分光光度法砷盐检查方法：古蔡法
Ag-DDC法原子吸收分光光度法
4．农药残留量农药的来源常用的农药：有机氯类：艾氏剂、氯丹、六六六等有机磷类：三硫磷、氯硫磷、蝇毒磷等检查原则：农药不明的样品测定总氯量、总磷量，
已知农药的样品可采用 GC法测定某个农药的量。
总氯量的测定样品细粉 +乙腈 -水 滤液 +石油醚 萃取液
（ 65:35）
搅拌过滤萃取浓缩 氧瓶燃烧吸收液：硫氰酸铵比色法
GC测定取样 萃取农药 柱纯化 GC测定测定有机氯时，使用电子捕获检测器（ ECD）；
测定有机磷时，使用火焰光度检测器（ FPD）。
上法得的石油醚萃取液总磷量的测定洗脱液 吸收液：磷钼酸比色法柱层析 浓缩氧瓶燃烧
（四）含量测定含量测定方法主要有：化学分析法、分光光度法、薄层扫描法和 HPLC法。
1．薄层扫描法
1）对色谱条件的要求：选择性好，组分能完全分离，
斑点对称、均匀、不拖尾。
2)测量方法：多使用 反射法 。
3）扫描方式：
单波长双波长 测定波长 选在被测组分的最大吸收波长，
参比波长 选在组分无吸收的位置上，若背景有均匀污染时，可选择背景光谱中与测定波长的等吸收处。
4） 散射参数 SX,由于薄层板对光的散射，其吸收度和浓度之间的关系不服从比尔定律，
二者不呈直线，但符合 K-M
方程，可以进行校正，使其成为直线。薄层扫描仪均装有线性化器，测定时需输入
SX值，因为吸收度 -浓度曲线的形状与 SX值有关。
5）定量方法：
外标法 若曲线经过原点，可用一点法校正；若曲线不经过原点，用二点法校正；必要时，可采用多点法校正。
内标法 将内标加入供试液中，以组分与内标峰面积比值作为定量依据。
（ 五）检验记录
1,要求,原始资料真实、详细、整洁。
2,内容,送检单位、送检日期、检品名称与规格、
批号、检验项目、检验方法、检验者、审核者及检验日期。对用显微镜或电镜检验所得的图象，
应真实描绘，注明放大倍数或附相片及说明。检验中所用仪器应标明型号。所得到得数局，应详加核对，并进行统计学处理。
练习与思考
1．中药制剂分析有何特点？
2．中药制剂分析中样品的前处理方法有哪些？
3．简述中药制剂分析的一般程序。
