http://spxy.zjgsu.edu.cn 《基因工程原理》教学大纲 (Genetic Engineering) 一、基本信息 课程代码：1034212 学 分：2 总 课 时：32 课程性质：专业选修课 适用专业：生物工程 先修课程：生物化学，微生物学，分子生物学 二、本课程教学目的和任务 基因工程原理与技术是为生物工程专业开设的一门专业选修课。通过课程学习，使学生 更进一步了解生物技术领域中的前沿技术，并扎实专业理论知识。 三、教学方法与手段 多媒体教学。 四、教学内容及要求 第一章 绪论 要求掌握基因工程的研究内容；熟悉基因工程进展。 重点内容：基因工程的研究内容和基因工程进展。 第二章 基因工程的四大要素及实施要点 要求掌握基因工程操作中常用的工具酶、基因工程载体；熟悉受体细胞和重组基因的导 入、基因重组体的筛选。 重点内容：基因工程载体。 难点内容：基因重组体的筛选。 第三章 外源基因在宿主细胞中的高效表达 要求掌握基因高效表达各种因素；熟悉几种典型的原核和真核表达系统。 重点内容：典型的原核和真核表达系统。 难点内容：基因高效表达各种因素。 第四章 基因的融合和融合蛋白的表达 要求掌握基因融合的策略；熟悉基因融合和显示筛选、基因融合和蛋白分泌系统的内容； 了解融合蛋白的纯化方法。 重点内容：基因融合的策略。 难点内容：基因融合构建和融合蛋白的纯化如何结合。 http://spxy.zjgsu.edu.cn 第五章 外源蛋白的分泌表达 要求掌握外源基因在 Ｅ .coli 中的分泌表达、a- 因子前导序列介导的酵母细胞分泌系统； 熟悉一些表达的例子。 重点内容：分泌表达系统的构建。 难点内容：分泌表达系统的构建。 第六章 重组蛋白的正确折叠及修饰 要求掌握重组蛋白的重折叠、外源蛋白在翻译后的修饰。 重点内容：重组蛋白的重折叠。 难点内容：外源蛋白在翻译后的修饰。 第七章 分子杂交技术 要求掌握探针与目标核酸相互作用的原理、放射性探针的制备、非放射性探针的制备； 了解探针的选择和特异性、杂交的最适条件。 重点内容：放射性探针的制备、非放射性探针的制备。 难点内容：杂交的最适条件。 第八章 聚合酶链反应及其应用 要求掌握聚合酶链反应的原理原理、标准的ＰＣＲ扩增方案；熟悉ＰＣＲ反应中几种主 要组成；了解与ＰＣＲ相关的技术及ＰＣＲ技术的应用。 重点内容：标准的ＰＣＲ扩增方案。 难点内容：与ＰＣＲ相关的技术及ＰＣＲ技术的应用。 第九章 噬菌体显示技术 要求掌握噬菌体显示技术的操作、噬菌体显示技术的应用。 重点内容：噬菌体显示技术的操作。 难点内容：噬菌体显示技术的应用。 第十章 基因打靶技术及其应用 要求掌握同源重组与基因打靶原理；熟悉基因打靶载体、转染ＤＮＡ的方法及重组体的 检定、基因打靶技术的应用。 重点内容：同源重组与基因打靶原理。 难点内容：基因打靶载体及应用方法。 第十一章 几种有开发前景的研究及新技术 要求掌握转录因子的研究与治疗药物的开发、反义核酸技术、ＤＮＡ疫苗等一些新的理 论和技术。 重点内容：新技术的方法和应用。 难点内容：新技术的原理。 http://spxy.zjgsu.edu.cn 五、教学时数分配表 章 内 容 参考时数 一 绪论 2 二 基因工程的四大要素及实施要点 6 三 外源基因在宿主细胞中的高效表达 6 四 基因的融合和融合蛋白的表达 2 五 外源蛋白的分泌表达 2 六 重组蛋白的正确折叠及修饰 2 七 分子杂交技术 2 八 聚合酶链反应及其应用 2 九 噬菌体显示技术 2 十 基因打靶技术及其应用 2 十一 几种有开发前景的研究和新技术 4 合 计 32 六、考核方式及成绩评定标准 考核方式：闭卷 成绩评定标准：平时成绩占 30%；期末成绩占 70%。成绩评定为百分制。 七、教材及主要参考书 教材：静国忠，《基因工程及其分子生物学基础》，北京大学出版社 参考书目： [1] R.M.特怀曼著，陈淳等译， 《高级分子生物学要义》 ，科学出版社，第一版，2000 [2] 吴乃虎， 《基因工程原理》 ，科学出版社，第一版，1999 年 [3] 朱玉贤主编， 《现代分子生物学》 ，高等教育出版社，第二版，2002 年 [4] 张惠展主编， 《基因工程概论》 ，华东理工大学出版社，第一版，1999 年 执笔人:顾 青