http://spxy.zjgsu.edu.cn 《微生物学实验》教学大纲 (Experiment of Microbiology) 一、 基本信息 课程代码：1001612 学 分 ：1.5 总 课 时 ：51 课程性质：必修课 适用专业：适用食品科学与工程、生物工程、环境工程、食品质量与安全本科专业 先修课程：生物化学、微生物学 二、本课程教学目的和任务 微生物学实验是生物学重要的基础课之一，特别是随着分子生物学的发展与拓宽，微生 物学方法与技术显得尤为重要。此外，医学、农学、林学等学科，甚至地质学、太空学等也 需微生物的方法与技术。因此，熟悉掌握微生物学方法与技术，对其它很多学科的发展有直 接的影响。无菌操作技能和无菌概念的建立是微生物学实验中最重要的内容，并且可以培养 学生的动手能力。 本课程的任务： 1. 微生物学实验主要任务是使学生掌握研究与应用微生物的主要方法与技术，包括经 典的、常规的、以及现代的方法与技术，使学生具有适应于从事相关学科的基础理论研究与 实际生产应用的微生物学实验技能。 2.从微生物形态学、微生物生理学、微生物遗传学、微生物生态学与分类、微生物免疫 学等六大方面进行设计内容设计与选择，与微生物学基础理论课紧密结合，使学生将理性知 识与感性认识有机地结合，将书本知识用于实验，在实验中更深地理解基础理论，提高学生 的综合能力与创新意识。 3. 提高学生分析问题和解决问题的能力。根据本学科的特点，逐步使学生认识微生物 的基本特性，比较它们与其它生物的相似和不同之处，知道如何研究微生物以及对研究中所 出现的问题点样分析，并加以解决。 三、教学方法与手段 以学生自己动手为主，老师在适当时间予以提示；对实验中所出现的一些现象多向学生 提出问题，使它们学会分析结果，并与理论知识有机结合；根据实验的进行程度，引导学生 更深入思考，逐步树立他们的创新意思；严格要求使操作技能规范化，老师作示范，强调其 要点学生自己练。 四、教学内容及要求 http://spxy.zjgsu.edu.cn 实验一、显微镜的使用及细菌形态的观察（3 课时） 要求掌握显微镜的使用方法；熟悉显微镜的构造；了解细菌的形态差异。 重点内容：油镜的使用方法。 难点内容：油镜的使用方法。 实验二、细菌涂片制备及染色（3 课时） 要求掌握细菌涂片的制备及革兰氏染色的方法和关键步骤；熟悉革兰氏染色所需试剂及 其作用；了解革兰氏染色的机理及其在细菌分类鉴定中的重要性。 重点内容：革兰氏染色的方法和关键步骤。 难点内容：革兰氏染色的操作。 实验三、玻璃器皿的清洗、包扎和干热灭菌（3 课时） 要求掌握微生物实验常用玻璃器皿的清洗和包扎方法；熟悉干热灭菌的操作技术；了解 干热灭菌的原理和应用范围。 重点内容：微生物实验常用玻璃器皿的清洗和包扎和干热灭菌操作。 难点内容：玻璃器皿的包扎。 实验四、常用培养基的配制和湿热灭菌（4 课时） 要求掌握配制培养基的一般方法和步骤；熟悉高压灭菌锅的构造和使用方法；了解培养 基的配制和湿热灭菌的原理。 重点内容：配制培养基的一般方法和步骤。 难点内容：湿热灭菌的原理。 实验五、细菌的分离、接种和培养（3 课时） 要求掌握倒平板的方法和微生物的接种技术； 熟悉几种常用的分离纯化微生物的基本操 作技术；了解不同的微生物在斜面上、半固体培养基和液体培养基中的生长特征。 重点内容：倒平板的方法和微生物的接种技术。 难点内容：微生物无菌操作技术。 实验六、霉菌的形态观察（3 课时） 要求掌握观察霉菌形态的基本方法；熟悉霉菌水浸片的制作过程；了解四类常见霉菌的 基本形态特征。 重点内容：观察霉菌形态的基本方法。 难点内容：霉菌水浸片的制作。 实验七、酵母菌的形态与计数（3 课时） 要求掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别及使用血球计数板进行微生物计数 的方法；熟悉区分酵母菌死活细胞的实验方法；了解酵母菌的形态及出芽生殖方式和血球计 数板计数的原理。 重点内容 ：酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别及使用血球计数板进行微生物计数 http://spxy.zjgsu.edu.cn 的方法。 难点内容：区分酵母菌死活细胞的实验方法。 实验八、放线菌的形态观察（5 课时） 。要求掌握放线菌的一般形态特征及其与细菌的区别及插片培养方法；熟悉插片培养方 法；了解放线菌的形态及生殖方式和显微照像技术。 重点内容：插片培养法培养观察放线菌形态及孢子丝形态。 难点内容：插片培养法培养观察放线菌形态及孢子丝形态。 实验九、细菌的生理生化实验（3 课时） 要求掌握细菌生理生化的基本原理和方法；了解微生物生理生化在分类学上的意义。 重点内容：细菌生理生化的基本原理和方法。 难点内容：生化反应的历程。 实验十、水中菌落总数的测定（4 课时） 要求掌握国标中关于水中菌落总数测定基本原理和方法， 相关操作流程；了解取样规程。 重点内容：水中菌落总数测定的基本原理和方法。 难点内容：不同样品的预处理方法。 实验十一、质粒 DNA 转化大肠杆菌（6 课时） 要求掌握基因工程中常用的质粒转化方法；熟悉检测质粒 DNA 的转化活性的方法；了解 质粒转化的基本原理。 重点内容：基因工程中常用的质粒转化方法。 难点内容：基因工程中常用的质粒转化方法。 实验十二、水中大肠菌群的测定（8 课时） 要求掌握国标中关于水中大肠菌群测定基本原理和方法，要求学生查阅文献后自行 设计实验方案，经教师确认后进行实验，独立完成全过程；熟悉相关操作流程；了解取样规 程。 重点内容：水中大肠菌群测定的基本原理和方法。 难点内容：水中大肠菌群测定的基本原理和方法。 实验十三、酸奶的制做(3 课时) 要求掌握酸奶的制作的基本原理和方法；熟悉食品中常用微生物的形态；了解食品中 常用微生物的种类及感观品质要求。 重点内容：酸奶的制作的基本原理和方法。 难点内容：酸奶的制作的基本原理和方法。 五、教学时数分配表 序号 实 验 名 称 实验类型 实验要求 实验时数 http://spxy.zjgsu.edu.cn 1 显微镜的使用及细菌形态的观察 验证性 必做 3 2 细菌涂片制备及染色 验证性 必做 3 3 玻璃器皿的清洗、包扎和干热灭菌 验证性 必做 3 4 常用培养基的制备和湿热灭菌 验证性 必做 4 5 细菌的分离、接种和培养 验证性 必做 3 6 霉菌的形态观察 验证性 必做 3 7 酵母菌的形态与计数 验证性 必做 3 8 放线菌的形态观察与显微摄影 设计性 必做 5 9 细菌的生理生化实验 验证性 必做 3 10 水中菌落总数的测定 设计性 必做 4 11 质粒 DNA 转化大肠杆菌 验证性 必做 6 12 水中大肠菌群的测定 综合性 必做 8 13 酸奶的制做 设计性 必做 3 教学课时合计 51 七、考核方式及成绩评定标准 考核方式：闭卷考试及实验操作 成绩评定标准：平时成绩占总成绩的 30%，期末考试占总成绩的 70%。成绩评定为百分 制。 八、教材及主要参考书 教材：沈萍，范秀容，李广武主编，微生物学实验，第三版，高等教育出版社， 1999.6 参考书目： [1]、赵斌，何绍江主编，微生物学实验，科学出版社， 2002.8 [2]、唐丽杰主编，微生物学实验，哈尔滨工业大学出版社，2004.11 [3]、杨革主编，微生物学实验教程，科学出版社， 2004.9 执笔人: 粱新乐 陆海霞 陈敏