第六章 胺类药物的分析
第一节 芳胺类药物的分析
常见的芳胺类药物
对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构
C
O
O R 2NR 1
H
H 2 N C O O C H 2 C H 2 N ( C 2 H 5 ) 2 H C l
盐酸普鲁卡因
C O O C 2 H 5H 2 N
苯佐卡因
C O O C H 2 C H 2 N ( C 2 H 5 ) 2C H 3 ( C H 2 ) 3 N H H C l
盐酸丁卡因
C O N H C H 2 C H 2 N ( C 2 H 5 ) 2H 2 N H C l
盐酸普鲁卡因胺
酰胺类药物的基本结构
N H C R
2
O
R
1
R
3
R
4
H O N H C O C H 3
N H C O C H 3C 2 H 5 O
非那西丁（对乙酰氨基苯乙醚）
对乙酰氨基酚（扑热息痛）
S
O
O
N H C O C H 3C H 3 C O N H
醋氨苯砜
N H C O C H
2
N ( C
2
H
5
)
2
C H
3
C H
3
H C l
盐酸利多卡因
N H C O
N
C
4
H
9C H
3
C H
3
H C l
盐酸布比卡因
一、结构与性质
（一） 具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨
基，可用重氮化 — 偶合反应鉴别或亚
硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发
生缩合反应，易氧化变色。
（二） 酯键或酰胺键易水解
（三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与
生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴
别或非水碱量法测定含量。
（四）游离碱易溶于有机溶剂，其盐
可溶于水。
（六） UV
（七） IR
（五） 某些特征取代基（如酚羟基）
的反应
二、鉴别试验
（一）重氮化 — 偶合反应
芳香第一胺类鉴别反应
A r N H 2 H ClN a N O
2
重氮盐
橙黄～猩红色
?? 萘酚
O H -
直接,盐酸普鲁卡因、对氨基水
杨酸钠,苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺
盐酸普鲁卡因 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 1）本品显芳香第一胺类的鉴别
反应（附录 Ⅲ ）
取供试品约 50mg，加稀盐酸 1m1，
必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加
0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性 β-
萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙
黄到猩红色沉淀。
间接, 对乙酰氨基酚、非那西丁、
醋氨苯砜、贝诺酯
对乙酰氨基酚 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 2）取本品约 0.1g，加稀盐酸
5m1，臵水浴中加热 40分钟，放冷；
取 0.5m1，滴加亚硝酸钠试液 5滴，摇
匀，用水 3ml稀释后，加碱性 β-萘酚试
液 2m1，振摇，即显红色。
对氨基酚对乙酰氨基酚,?? ?? ?H C l
（乳白色）盐酸丁卡因 ?? ??? ?H2N a N O
（二）三氯化铁反应
对乙酰氨基酚
（ 三 ） 与重金属离子反应
1,与铜和钴离子反应
黄色蓝紫色硫酸铜盐酸利多卡因 氯仿碳酸钠 ?? ????? ???
?? ??? ? 亮绿色细小盐酸利多卡因 H2C o C l
棕黑色）暗棕色羟肟酸铁（紫红色
羟肟酸盐酸普鲁卡因胺
???
?? ??? ? 322 F e C lOH
2．羟肟酸铁盐反应
黄色）（盐酸利多卡因, ??? ??? ?3HNO23NOHg
红色或橙黄色）（对氨基苯甲酸酯类, ??? ??? ?3HNO23NOHg
3．与汞离子的反应
（四）水解产物的反应
1,盐酸普鲁卡因 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 2）取本品约 0.1g，加水 2ml溶解
后，加 10％氢氧化钠溶液 1ml，即生成白
色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，
产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变
为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐
酸酸化，即析出白色沉淀。
）对氨基苯甲酸（白色对氨基苯甲酸钠
纸变兰色）（使湿润的红色石蕊试
二乙氨基乙醇对氨基苯甲酸钠
油状物普鲁卡因
盐酸普鲁卡因
???
??? ??
? ???
?
?
?
H C l
N a O H
2,苯佐卡因 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 2）取本品约 0.1g，加氢氧化钠
试液 5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试
液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿
的臭气。
）（碘仿臭气，黄色乙醇
乙醇苯佐卡因
?? ????
? ???
?
?
32 C H IN a O HI
N a O H
（ 五 ） 制备衍生物测熔点
1．三硝基苯酚衍生物
盐酸利多卡因 ChP（ 2000）
[鉴别 ] 取本品 0.2g,加水 20ml溶解 。
（ 1） 取溶液 10ml,加三硝基苯酚试液
10ml,即生成沉淀；滤过, 沉淀用水洗涤
后, 干燥, 依法测定 （ 附录 Ⅵ C）, 熔点
为 228～ 232℃, 熔融时同时分解 。
盐酸布比卡因 ChP（ 2000）
2,硫氰酸盐衍生物
盐酸丁卡因 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 1） 取本品约 0.1g,加 5%醋酸钠
溶液 10ml溶解后, 加 25%硫氰酸铵溶液
1ml,即析出白色结晶；滤过, 结晶用水
洗涤, 在 80℃ 干燥, 依法测定 （ 附录
Ⅵ C）, 熔点约为 131℃ 。
盐酸布比卡因 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 2） 取本品, 精密称定, 按干燥
品计算, 加 0.01mol/L盐酸溶液制成每 1ml
中含 0.40mg的溶液, 照分光光度法 （ 附录
Ⅳ A） 测定, 在 263nm与 271nm的波长处有
最大吸收；其吸收度分别为 0.53～ 0.58与
0.43～ 0.48。
（六） UV
（七） IR
盐酸布比卡因 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 3） 本品的红外光吸收图谱与对
照的图谱 （ 光谱集 324图 ） 一致 。
三、杂质检查
（一）对乙酰氨基酚
1,有关物质
杂质来源 中间体、副产物及分解
产物
对氯乙酰苯胺 杂质对照品法
检查方法 TLC
其他杂质 参比杂质对照品法
2,对氨基酚
杂质来源 中间体、水解产物
反应原理
兰色亚硝基铁氰化钠对氨基酚 ?? ??? ?OH
检查方法 对照法
取本品 1.0g，加甲醇溶液（ 1→2 ）
20ml溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液
1m1，摇匀，放臵 30min；如显色，与对
乙酰氨基酚对照品 1.0g加对氨基酚 50?g用
同一方法制成的对照液比较，不得更深
（ 0.005％）。
%0 0 5.0%1 0 0
0.1
1050
%1 0 0
6
??
?
?
??
?
供试品量
允许杂质存在的最大量
L
2,盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯
甲酸的检查
检查方法 TLC 杂质对照品法
杂质来源 水解产生
%2.1%1 0 0
105.2
101030
%1 0 0
3
??
?
??
?
??
?
供试品量
允许杂质存在的最大量
L
精密量取本品，加乙醇稀释使成为每 1ml
中含盐酸普鲁卡因 2.5mg的溶液，作为供试品溶
液。取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成每 1ml
中含 30?g的溶液，作为对照品溶液。取上述两
种溶液各 10 ?l，分别点于含有羧甲基纤维素钠
为粘合剂的硅胶 H薄层板上，用苯 -冰醋酸 -丙酮 -
甲醇（ 14∶ 1 ∶ 1 ∶ 4）为展开剂，展开后，取
出晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（ 2％对二甲
氨基苯甲醛乙醇溶液 100ml，加冰醋酸 5ml制成）
喷雾显色。供试品溶液如显与对照品溶液相应
的杂质斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，
不得更深。
（ 一 ） 亚硝酸钠滴定法
1,原理 具芳伯氨基的药物
Cl -
+ 22 +++ +A r N H
2 N a N O 2 H Cl A r N N N a Cl H 2 O
四、含量测定
具游离芳伯氨基的药物可用本法
直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，
如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）
经水解，芳香族硝基化合物（如无味
氯霉素）经还原，也可用本法测定。
N H C O R + H 2 O N H 2 + R C O O HH
+
△
N O 2 + 6 [ H ] N H 2 + 2 H 2 O
2,主要测定条件
（ 1） 加入适量 KBr加速反应
KBr为催化剂
NaNO2+HCl→HNO 2+NaCl
HNO2+HCl→NOCl+H 2O
在盐酸存在下，重氮化反应的机
理为：
N N
+
C l
-
快
N N O H
快
N N O
H
慢
N O
+
C l
-
N H
2
OHN O B r H B r H N O 22 ??
OHN O C l H C lH N O 22 ??
（ 1） K1
（ 2） K2
∵ K1 ≈ 300 K2
加入 KBr,可增大被测溶液中 NO+的
浓度, 所以能加快重氮化反应速度
（ 2） 酸的种类及其浓度
在不同酸中重氮化反应的速度为：
HBr＞ HCl ＞ H2SO4 ＞ HNO3
盐酸 1:2.5～ 6；
加入盐酸：
① 重氮化反应速度加快；
② 重氮盐在酸性溶液中稳定；
③ 防止生成偶氮氨基化合物, 而影
响测定结果
N N
+
C l
-
+ H
2 N
N N N H + H C l
（ 3） 室温条件下滴定 10～ 30℃
（ 4） 滴定速度：先快后慢
滴定管尖端插入液面下 2/3处，滴
定液一次大部分放下，近终点时方
改为慢速滴定
3,指示终点的方法
（ 1） 永停滴定法
ChP（ 2000）, BP（ 1998）
永停滴定法（附录 Ⅶ A）
用作重氮化法的终点指示时，调节 R1使加
于电极上的电压约为 50mV。取供试品适量，精
密称定，臵烧杯中，除另有规定外，可加水
40ml与盐酸溶液（ 1→2 ） 15ml，而后臵电磁搅
拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾 2g，插入
铂 — 铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约
2/3处，用亚硝酸钠滴定液（ 0.1mol/L或
0.05mol/L）迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点
时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗
尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电
流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终
点。
（ 2） 电位法 USP（ 24）
（ 3） 外指示剂法
KI— 淀粉糊剂或试纸
2NaNO2+2KI+4HCl→
2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O
（ 4） 内指示剂法
中性红 不可逆指示剂
4,测定方法
盐酸普鲁卡因 ChP（ 2000）
取本品约 0.6g，精密称定，照永停
滴定法（附录 Ⅶ A），在 15～ 25℃,
用亚硝酸钠滴定液（ 0.1mol/L）滴定。
每 1ml亚硝酸钠滴定液（ 0.1mol/L）
相当于 27.28mg的 C13H20N2O2·HCl
（三）紫外分光光度法
对乙酰氨基酚在 0.4％氢氧化钠溶
液中，于 257nm波长处有最大吸收，
其紫外吸收光谱特征，可用于其原料
及其制剂的含量测定。
（二）非水溶液滴定法
脂烃胺侧链，具弱碱性
对乙酰氨基酚 ChP（ 2000）
取本品约 40mg, 精密称定, 臵
25ml量瓶中, 加 0.4％ 氢氧化钠溶液
50ml溶解后, 加水至刻度, 摇匀, 精
密量取 5m1,臵 100ml量瓶中, 加 0.4
％ 氢氧化钠溶液 10m1,加水至刻度,
摇匀, 在 257nm的波长处测定吸收度,
按 C8H9NO2的吸收系数 为 715 计
算, 即得 。
%1
1cmE
原料药 吸收系数法
%100
100
%1
1 ?
??
?
?
s
cm
m
Vn
lE
A
百分含量
USP（ 24） 对照法
（四）比色法
中性条件下的重氮化反应
Anm 处测定棕红色化合物，
磺酸钠萘醌，盐酸普鲁卡因
482
421
m a x
94pH
?
?? ?????? ?
（五）荧光法 —— 荧光探针技术
使荧光衍生化试剂与本身无荧光或
荧光效率低的化合物反应，其产物具有强
荧光，从而使检测灵敏度大大提高。
荧光物荧胺盐酸普鲁卡因胺 ?? ??? p H 7, 5
λex400nm（ 激发波长 ）,
λem485nm（ 发射波长 ） 处测定荧光强度,
标准曲线法定量 。
（六） HPLC法
盐酸普鲁卡因注射液 ChP（ 2000）
可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产
物对氨基苯甲酸
离子抑制色谱法 内标法定量
98,133,盐酸普鲁卡因胺常用的鉴
别反应有 （ AB）
A,重氮化 — 偶合反应
B,羟肟酸铁盐反应
C,氧化反应
D,磺化反应
E,碘化反应
97,137,采用亚硝酸钠法测定含量
的药物有 （ CD）
A,苯巴比妥
B,盐酸丁卡因
C,苯佐卡因
D,醋氨苯砜
E,盐酸去氧肾上腺素
95,85,下列药物中不能用亚硝酸钠
滴定法测定含量者 （ A）
A,乙酰水杨酸
B,对氨基水杨酸钠
C,对乙酰氨基酚
D,普鲁卡因
E,苯佐卡因
96,81（ 99,72）, 亚硝酸钠滴定法
中, 加 KBr的作用是 （ B）
A,添加 Br?
B,生成 NO+·Br?
C,生成 HBr
D,生成 Br2
E,抑制反应进行
95,75,中国药典 （ 1990年版 ） 所收载
的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为
（ B）
A,电位法
B,永停法
C,外指示剂法
D,内指示剂法
E,自身指示剂法
96,127,亚硝酸钠滴定法中, 可用于
指示终点的方法有 （ BCDE）
A,自身指示剂法
B,内指示剂法
C,永停法
D,外指示剂法
E,电位法
例 1,ChP（ 2000） 亚硝酸钠滴定法测
定对氨基水杨酸钠的含量时, 指示滴
定终点的方法为 （ C）
A,自身指示终点法
B,电位法指示终点
C,永停滴定法
D,氧化还原指示剂法
E,酸碱指示剂法
例 2,以下那种药物中应检查对氨基苯
甲酸 （ E）
A,盐酸普鲁卡因
B,盐酸普鲁卡因胺
C,注射用盐酸普鲁卡因
D,盐酸普鲁卡因胺片
E,盐酸普鲁卡因注射液
例 3,盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法
测定含量时的反应条件是 （ ABCDE）
A,强酸
B,加入适量溴化钾
C,室温 （ 10～ 30℃ ） 下滴定
D,滴定管尖端深入液面
E,永停法指示终点
第二节 苯乙胺类药物的分析
R
1
C H C H N H R
2
O H R
3
苯乙胺类药物的基本结构
*
H O
H O
C
O H
H
C H 2 N H C H 3
肾上腺素
常见的苯乙胺类药物
H O
H O
C
O H
H
C H 2 N H 2
重酒石酸去甲肾上腺素
C
C
C O O H
C O O H
O HH
HH O
H O
C
H
O H
C H 2 N H C H 3 H C l
盐酸去氧肾上腺素
H O
C
H
O H
C H 2 N H C H ( C H 3 ) 2 H C lH O
盐酸异丙肾上腺素
C l
H 2 N
C l
C
H
O H
C H 2 N H C ( C H 3 ) 3 H C l
盐酸克仑特罗
H 2 S O 4
2
H O
C H 2 O H
C
H
O H
C H 2 N H C ( C H 3 ) 3
硫酸沙丁胺醇
一、结构与性质
1,脂烃胺基侧链, 显弱碱性
2,酚羟基, 易氧化变色, 可发生
三氯化铁反应
3,具手性碳原子, 具旋光性
4,溶解性 游离碱难溶于水, 易溶
于有机溶剂, 其盐可溶于水
5,UV
6,IR
7,取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑
特罗可用重氮化 — 偶合反应鉴别,
亚硝酸钠滴定法测定含量 。
二、鉴别试验
1,三氯化铁反应
2,氧化反应
3,与甲醛 — 硫酸反应
4,UV与 IR
5,与亚硝基铁氰化钠反应 （ Rimini反
应 ） 脂肪族伯胺的专属反应
红紫色
丙酮亚硝基铁氰化钠重酒石酸间羟胺
? ??
???
?
N a H C O 3
H O
C
H
O H
C H
C H 3
N H 2
C H ( O H ) C O O H
C H ( O H ) C O O H
三、杂质检查
杂质来源 原料残存
检查方法 比较法 （ 含量测定法 ）
（一）酮体的检查
检查原理 利用酮体在 310nm波长
处有最大吸收, 而药物本身在此波长
处几乎没有吸收, 规定一定浓度溶液
在 310nm波长处的吸收度限制酮体的
量 。
（ 二 ） 有关物质检查
盐酸去氧肾上腺素, 硫酸沙丁胺
醇等药物
检查方法,TLC中高低浓度对比法
配制两种浓度对照溶液
（ 三 ） 盐酸苯乙双胍中有关双胍的检
查
检查方法,纸色谱法 （ PC） 分离
后, 洗脱, 照分光光度法于 232nm波
长处测定吸收度, 控制吸收度以控制
有关双胍的量
四、含量测定
（ 一 ） 非水溶液滴定法 原料药
脂烃胺基侧链, 显弱碱性
（ 二 ） 溴量法 盐酸去氧肾上腺素及
其注射液, 重酒石酸间羟胺
反应摩尔比为 1∶ 6
H O
C H C H
2
N H C H
3
O H
B r
2
+3
B r
B r
H O
B r
C H C H
2
N H C H
3
O H
+ 3 H B r
（ 三 ） 比色法 盐酸克仑特罗栓
具芳伯氨基, 可发生重氮化 — 偶合
反应
AnmN 测定
盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗栓
乙二胺萘基）（、
盐酸氯仿
500m a x1HN a N O 2 ????????? ????? ??
?? ???? ??
????
对照法定量
偶合剂 N-（ 1-萘基） -乙二胺遇亚
硝酸也能显色，干扰比色测定，所以
在重氮化后，应加氨基磺酸铵将剩余
的亚硝酸分解除去，再加偶合试剂 N-
（ 1-萘基） -乙二胺。
（ 四 ） 提取酸碱滴定法
硫酸苯丙胺及其制剂
盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂
游离碱不溶于水，易溶于有机溶剂依据性质
终点（过量）
乙醚层（苯丙胺）
苯丙胺硫酸苯丙胺
滴定甲基红、
低温蒸去乙醚定量过量的
乙醚提取
、
?????? ??
???? ???????? ??
??? ??
???? ??
N a O H
42
N a C lN a O H
SOH
42
SOH
碱化
有机溶剂提取
（ 五 ） 荧光分光光度法
三羟基吲哚，，甲基
肾上腺红肾上腺素
一定条件下 ??????? ??
??
653
I 2
N
λex410nm,λem520nm处测定荧光强度,
对照法定量 。
（ 六 ） HPLC法
重酒石酸去甲肾上腺素注射液
离子对反相高效液相色谱法
内标法定量
调节溶液 pH为 3.8,加入离子对试
剂十二烷基磺酸钠
例 1,能和重酒石酸去甲肾上腺素发生颜
色反应的试液为 （ D）
A,浓硫酸
B,甲醛试液
C,氨试液
D,甲醛 — 硫酸试液
E,茚三酮试液
例 2,盐酸异丙肾上腺素的检查项目是
（ E）
A,有关物质
B,二苯酮
C,盐酸
D,醛
E,酮体
第三节 氨基醚衍生物类药物的分析
C
H
O C H
2
C H
2
N ( C H
3
)
2
H C l
盐酸苯海拉明
C
H
O C H 2 C H 2 N ( C H 3 ) 2
N
N
O
C H 3
C H 3
O
N
N
C l
H
茶苯海明
一、结构与性质
1,脂烃胺基侧链, 显弱碱性
2,UV和 IR
3,茶苯海明含卤素
二、鉴别试验
1,与硫酸反应呈色
2,制备三硝基苯酚衍生物测熔点
2,水解反应
3,与 AgNO3反应形成沉淀
4,UV和 IR
三、含量测定
（ 一 ） 非水溶液滴定法 原料
（ 二 ） 银量法
茶苯海明中 8-氯茶碱的测定
间接银量法测定
氯茶碱
、
Cl8
OHNH 23 ???
???? ???
（ 三 ） 酸性染料比色法
盐酸苯海拉明片剂及片剂溶出度
测定
（四）阴离子表面活性剂滴定法（双
相滴定法）
盐酸苯海拉明注射液
1,原理
滴定反应
RX+M— Na→ R— M+NaX K1
（可溶于有机溶剂）
终点指示
M— Na+碱性染料 → 有色物 K2
（可溶于有机溶剂）
2,测定对象 有机碱性药物
3,测定条件
（ 1）酸性溶液
（ 2）本法应用前提：药物与滴定剂的
反应优于滴定剂与指示剂的反应。若滴
定剂不能先与药物作用而先与指示剂作
用，则滴定无法进行。即使药物与滴定
剂先反应，若滴定剂不在反应完成的等
当点稍后与指示剂反应，则纵使可以滴
定，也会造成误差。 K1＞ K2，但也不能
相差太大，相差 2个数量级以下，即 ?K
＜ 100。
（ 3） 滴定剂 阴离子表面活性剂
（ 4） 指示剂 碱性染料
二甲基黄或二甲基黄 +亚甲兰（混
合指示剂可提高灵敏度）
标标标 mVc ??
样样标 mVc ??
标
样
标样
V
V
mm ??
（ 5）本法用对照法定量
因此虽用标准溶液，但标准溶液
浓度不用标定。既解决了滴定液的标
定问题，又可消除产生的滴定误差。
4,测定方法
精密量取本品适量 （ 约相当于盐酸苯海拉
明 20mg）, 臵具塞锥形瓶中, 加水 20m1,加
氯仿 50ml与稀硫酸 5m1。 再加二甲基黄一溶
剂蓝 19混合指示液 1m1,用磺基丁二酸钠二
辛酯试液滴定, 至近终点时强力振摇, 继续
滴定至氯仿层由绿色转变为红灰色；另精密
称取盐酸苯海拉明对照品约 20mg,照上述方
法自, 臵具塞锥形瓶, 起, 依法测定, 根据
二者消耗磺基丁二酸钠二辛酯试液的容积
（ m1） 比值计算, 即得 。
（五） HPLC法
茶苯海明片
离子抑制色谱法 内标法定量
例 1,氨基醚衍生物类药物的鉴别反应
是 （ ABCD）
A,硫酸呈色反应
B,水解反应
C,与硝酸银反应
D,吸收光谱法
E,三氯化铁反应
例 2,盐酸苯海拉明的含量测定可用
（ CDE）
A,电泳法
B,X— 射线衍射法
C,非水溶液滴定法
D,酸性染料比色法
E,阴离子表面活性剂滴定法
例 3,阴离子表面活性剂滴定法的终点
指示原理是 （ B）
A,碱性药物和滴定剂反应, 所生
成的配位化合物溶于有机溶剂而显色
B,滴定剂和碱性染料反应, 所生
成的配位化合物溶于有机溶剂而显色
C,碱性药物和酸性染料反应, 所
生成的配位化合物溶于有机溶剂而显
色
D,酸性药物和碱性染料反应, 所
生成的配位化合物溶于有机溶剂而显
色
E,滴定剂和酸性染料反应，所生
成的配位化合物溶于有机溶剂而显色
第一节 芳胺类药物的分析
常见的芳胺类药物
对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构
C
O
O R 2NR 1
H
H 2 N C O O C H 2 C H 2 N ( C 2 H 5 ) 2 H C l
盐酸普鲁卡因
C O O C 2 H 5H 2 N
苯佐卡因
C O O C H 2 C H 2 N ( C 2 H 5 ) 2C H 3 ( C H 2 ) 3 N H H C l
盐酸丁卡因
C O N H C H 2 C H 2 N ( C 2 H 5 ) 2H 2 N H C l
盐酸普鲁卡因胺
酰胺类药物的基本结构
N H C R
2
O
R
1
R
3
R
4
H O N H C O C H 3
N H C O C H 3C 2 H 5 O
非那西丁（对乙酰氨基苯乙醚）
对乙酰氨基酚（扑热息痛）
S
O
O
N H C O C H 3C H 3 C O N H
醋氨苯砜
N H C O C H
2
N ( C
2
H
5
)
2
C H
3
C H
3
H C l
盐酸利多卡因
N H C O
N
C
4
H
9C H
3
C H
3
H C l
盐酸布比卡因
一、结构与性质
（一） 具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨
基，可用重氮化 — 偶合反应鉴别或亚
硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发
生缩合反应，易氧化变色。
（二） 酯键或酰胺键易水解
（三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与
生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴
别或非水碱量法测定含量。
（四）游离碱易溶于有机溶剂，其盐
可溶于水。
（六） UV
（七） IR
（五） 某些特征取代基（如酚羟基）
的反应
二、鉴别试验
（一）重氮化 — 偶合反应
芳香第一胺类鉴别反应
A r N H 2 H ClN a N O
2
重氮盐
橙黄～猩红色
?? 萘酚
O H -
直接,盐酸普鲁卡因、对氨基水
杨酸钠,苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺
盐酸普鲁卡因 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 1）本品显芳香第一胺类的鉴别
反应（附录 Ⅲ ）
取供试品约 50mg，加稀盐酸 1m1，
必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加
0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性 β-
萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙
黄到猩红色沉淀。
间接, 对乙酰氨基酚、非那西丁、
醋氨苯砜、贝诺酯
对乙酰氨基酚 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 2）取本品约 0.1g，加稀盐酸
5m1，臵水浴中加热 40分钟，放冷；
取 0.5m1，滴加亚硝酸钠试液 5滴，摇
匀，用水 3ml稀释后，加碱性 β-萘酚试
液 2m1，振摇，即显红色。
对氨基酚对乙酰氨基酚,?? ?? ?H C l
（乳白色）盐酸丁卡因 ?? ??? ?H2N a N O
（二）三氯化铁反应
对乙酰氨基酚
（ 三 ） 与重金属离子反应
1,与铜和钴离子反应
黄色蓝紫色硫酸铜盐酸利多卡因 氯仿碳酸钠 ?? ????? ???
?? ??? ? 亮绿色细小盐酸利多卡因 H2C o C l
棕黑色）暗棕色羟肟酸铁（紫红色
羟肟酸盐酸普鲁卡因胺
???
?? ??? ? 322 F e C lOH
2．羟肟酸铁盐反应
黄色）（盐酸利多卡因, ??? ??? ?3HNO23NOHg
红色或橙黄色）（对氨基苯甲酸酯类, ??? ??? ?3HNO23NOHg
3．与汞离子的反应
（四）水解产物的反应
1,盐酸普鲁卡因 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 2）取本品约 0.1g，加水 2ml溶解
后，加 10％氢氧化钠溶液 1ml，即生成白
色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，
产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变
为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐
酸酸化，即析出白色沉淀。
）对氨基苯甲酸（白色对氨基苯甲酸钠
纸变兰色）（使湿润的红色石蕊试
二乙氨基乙醇对氨基苯甲酸钠
油状物普鲁卡因
盐酸普鲁卡因
???
??? ??
? ???
?
?
?
H C l
N a O H
2,苯佐卡因 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 2）取本品约 0.1g，加氢氧化钠
试液 5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试
液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿
的臭气。
）（碘仿臭气，黄色乙醇
乙醇苯佐卡因
?? ????
? ???
?
?
32 C H IN a O HI
N a O H
（ 五 ） 制备衍生物测熔点
1．三硝基苯酚衍生物
盐酸利多卡因 ChP（ 2000）
[鉴别 ] 取本品 0.2g,加水 20ml溶解 。
（ 1） 取溶液 10ml,加三硝基苯酚试液
10ml,即生成沉淀；滤过, 沉淀用水洗涤
后, 干燥, 依法测定 （ 附录 Ⅵ C）, 熔点
为 228～ 232℃, 熔融时同时分解 。
盐酸布比卡因 ChP（ 2000）
2,硫氰酸盐衍生物
盐酸丁卡因 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 1） 取本品约 0.1g,加 5%醋酸钠
溶液 10ml溶解后, 加 25%硫氰酸铵溶液
1ml,即析出白色结晶；滤过, 结晶用水
洗涤, 在 80℃ 干燥, 依法测定 （ 附录
Ⅵ C）, 熔点约为 131℃ 。
盐酸布比卡因 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 2） 取本品, 精密称定, 按干燥
品计算, 加 0.01mol/L盐酸溶液制成每 1ml
中含 0.40mg的溶液, 照分光光度法 （ 附录
Ⅳ A） 测定, 在 263nm与 271nm的波长处有
最大吸收；其吸收度分别为 0.53～ 0.58与
0.43～ 0.48。
（六） UV
（七） IR
盐酸布比卡因 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 3） 本品的红外光吸收图谱与对
照的图谱 （ 光谱集 324图 ） 一致 。
三、杂质检查
（一）对乙酰氨基酚
1,有关物质
杂质来源 中间体、副产物及分解
产物
对氯乙酰苯胺 杂质对照品法
检查方法 TLC
其他杂质 参比杂质对照品法
2,对氨基酚
杂质来源 中间体、水解产物
反应原理
兰色亚硝基铁氰化钠对氨基酚 ?? ??? ?OH
检查方法 对照法
取本品 1.0g，加甲醇溶液（ 1→2 ）
20ml溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液
1m1，摇匀，放臵 30min；如显色，与对
乙酰氨基酚对照品 1.0g加对氨基酚 50?g用
同一方法制成的对照液比较，不得更深
（ 0.005％）。
%0 0 5.0%1 0 0
0.1
1050
%1 0 0
6
??
?
?
??
?
供试品量
允许杂质存在的最大量
L
2,盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯
甲酸的检查
检查方法 TLC 杂质对照品法
杂质来源 水解产生
%2.1%1 0 0
105.2
101030
%1 0 0
3
??
?
??
?
??
?
供试品量
允许杂质存在的最大量
L
精密量取本品，加乙醇稀释使成为每 1ml
中含盐酸普鲁卡因 2.5mg的溶液，作为供试品溶
液。取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成每 1ml
中含 30?g的溶液，作为对照品溶液。取上述两
种溶液各 10 ?l，分别点于含有羧甲基纤维素钠
为粘合剂的硅胶 H薄层板上，用苯 -冰醋酸 -丙酮 -
甲醇（ 14∶ 1 ∶ 1 ∶ 4）为展开剂，展开后，取
出晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（ 2％对二甲
氨基苯甲醛乙醇溶液 100ml，加冰醋酸 5ml制成）
喷雾显色。供试品溶液如显与对照品溶液相应
的杂质斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，
不得更深。
（ 一 ） 亚硝酸钠滴定法
1,原理 具芳伯氨基的药物
Cl -
+ 22 +++ +A r N H
2 N a N O 2 H Cl A r N N N a Cl H 2 O
四、含量测定
具游离芳伯氨基的药物可用本法
直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，
如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）
经水解，芳香族硝基化合物（如无味
氯霉素）经还原，也可用本法测定。
N H C O R + H 2 O N H 2 + R C O O HH
+
△
N O 2 + 6 [ H ] N H 2 + 2 H 2 O
2,主要测定条件
（ 1） 加入适量 KBr加速反应
KBr为催化剂
NaNO2+HCl→HNO 2+NaCl
HNO2+HCl→NOCl+H 2O
在盐酸存在下，重氮化反应的机
理为：
N N
+
C l
-
快
N N O H
快
N N O
H
慢
N O
+
C l
-
N H
2
OHN O B r H B r H N O 22 ??
OHN O C l H C lH N O 22 ??
（ 1） K1
（ 2） K2
∵ K1 ≈ 300 K2
加入 KBr,可增大被测溶液中 NO+的
浓度, 所以能加快重氮化反应速度
（ 2） 酸的种类及其浓度
在不同酸中重氮化反应的速度为：
HBr＞ HCl ＞ H2SO4 ＞ HNO3
盐酸 1:2.5～ 6；
加入盐酸：
① 重氮化反应速度加快；
② 重氮盐在酸性溶液中稳定；
③ 防止生成偶氮氨基化合物, 而影
响测定结果
N N
+
C l
-
+ H
2 N
N N N H + H C l
（ 3） 室温条件下滴定 10～ 30℃
（ 4） 滴定速度：先快后慢
滴定管尖端插入液面下 2/3处，滴
定液一次大部分放下，近终点时方
改为慢速滴定
3,指示终点的方法
（ 1） 永停滴定法
ChP（ 2000）, BP（ 1998）
永停滴定法（附录 Ⅶ A）
用作重氮化法的终点指示时，调节 R1使加
于电极上的电压约为 50mV。取供试品适量，精
密称定，臵烧杯中，除另有规定外，可加水
40ml与盐酸溶液（ 1→2 ） 15ml，而后臵电磁搅
拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾 2g，插入
铂 — 铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约
2/3处，用亚硝酸钠滴定液（ 0.1mol/L或
0.05mol/L）迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点
时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗
尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电
流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终
点。
（ 2） 电位法 USP（ 24）
（ 3） 外指示剂法
KI— 淀粉糊剂或试纸
2NaNO2+2KI+4HCl→
2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O
（ 4） 内指示剂法
中性红 不可逆指示剂
4,测定方法
盐酸普鲁卡因 ChP（ 2000）
取本品约 0.6g，精密称定，照永停
滴定法（附录 Ⅶ A），在 15～ 25℃,
用亚硝酸钠滴定液（ 0.1mol/L）滴定。
每 1ml亚硝酸钠滴定液（ 0.1mol/L）
相当于 27.28mg的 C13H20N2O2·HCl
（三）紫外分光光度法
对乙酰氨基酚在 0.4％氢氧化钠溶
液中，于 257nm波长处有最大吸收，
其紫外吸收光谱特征，可用于其原料
及其制剂的含量测定。
（二）非水溶液滴定法
脂烃胺侧链，具弱碱性
对乙酰氨基酚 ChP（ 2000）
取本品约 40mg, 精密称定, 臵
25ml量瓶中, 加 0.4％ 氢氧化钠溶液
50ml溶解后, 加水至刻度, 摇匀, 精
密量取 5m1,臵 100ml量瓶中, 加 0.4
％ 氢氧化钠溶液 10m1,加水至刻度,
摇匀, 在 257nm的波长处测定吸收度,
按 C8H9NO2的吸收系数 为 715 计
算, 即得 。
%1
1cmE
原料药 吸收系数法
%100
100
%1
1 ?
??
?
?
s
cm
m
Vn
lE
A
百分含量
USP（ 24） 对照法
（四）比色法
中性条件下的重氮化反应
Anm 处测定棕红色化合物，
磺酸钠萘醌，盐酸普鲁卡因
482
421
m a x
94pH
?
?? ?????? ?
（五）荧光法 —— 荧光探针技术
使荧光衍生化试剂与本身无荧光或
荧光效率低的化合物反应，其产物具有强
荧光，从而使检测灵敏度大大提高。
荧光物荧胺盐酸普鲁卡因胺 ?? ??? p H 7, 5
λex400nm（ 激发波长 ）,
λem485nm（ 发射波长 ） 处测定荧光强度,
标准曲线法定量 。
（六） HPLC法
盐酸普鲁卡因注射液 ChP（ 2000）
可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产
物对氨基苯甲酸
离子抑制色谱法 内标法定量
98,133,盐酸普鲁卡因胺常用的鉴
别反应有 （ AB）
A,重氮化 — 偶合反应
B,羟肟酸铁盐反应
C,氧化反应
D,磺化反应
E,碘化反应
97,137,采用亚硝酸钠法测定含量
的药物有 （ CD）
A,苯巴比妥
B,盐酸丁卡因
C,苯佐卡因
D,醋氨苯砜
E,盐酸去氧肾上腺素
95,85,下列药物中不能用亚硝酸钠
滴定法测定含量者 （ A）
A,乙酰水杨酸
B,对氨基水杨酸钠
C,对乙酰氨基酚
D,普鲁卡因
E,苯佐卡因
96,81（ 99,72）, 亚硝酸钠滴定法
中, 加 KBr的作用是 （ B）
A,添加 Br?
B,生成 NO+·Br?
C,生成 HBr
D,生成 Br2
E,抑制反应进行
95,75,中国药典 （ 1990年版 ） 所收载
的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为
（ B）
A,电位法
B,永停法
C,外指示剂法
D,内指示剂法
E,自身指示剂法
96,127,亚硝酸钠滴定法中, 可用于
指示终点的方法有 （ BCDE）
A,自身指示剂法
B,内指示剂法
C,永停法
D,外指示剂法
E,电位法
例 1,ChP（ 2000） 亚硝酸钠滴定法测
定对氨基水杨酸钠的含量时, 指示滴
定终点的方法为 （ C）
A,自身指示终点法
B,电位法指示终点
C,永停滴定法
D,氧化还原指示剂法
E,酸碱指示剂法
例 2,以下那种药物中应检查对氨基苯
甲酸 （ E）
A,盐酸普鲁卡因
B,盐酸普鲁卡因胺
C,注射用盐酸普鲁卡因
D,盐酸普鲁卡因胺片
E,盐酸普鲁卡因注射液
例 3,盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法
测定含量时的反应条件是 （ ABCDE）
A,强酸
B,加入适量溴化钾
C,室温 （ 10～ 30℃ ） 下滴定
D,滴定管尖端深入液面
E,永停法指示终点
第二节 苯乙胺类药物的分析
R
1
C H C H N H R
2
O H R
3
苯乙胺类药物的基本结构
*
H O
H O
C
O H
H
C H 2 N H C H 3
肾上腺素
常见的苯乙胺类药物
H O
H O
C
O H
H
C H 2 N H 2
重酒石酸去甲肾上腺素
C
C
C O O H
C O O H
O HH
HH O
H O
C
H
O H
C H 2 N H C H 3 H C l
盐酸去氧肾上腺素
H O
C
H
O H
C H 2 N H C H ( C H 3 ) 2 H C lH O
盐酸异丙肾上腺素
C l
H 2 N
C l
C
H
O H
C H 2 N H C ( C H 3 ) 3 H C l
盐酸克仑特罗
H 2 S O 4
2
H O
C H 2 O H
C
H
O H
C H 2 N H C ( C H 3 ) 3
硫酸沙丁胺醇
一、结构与性质
1,脂烃胺基侧链, 显弱碱性
2,酚羟基, 易氧化变色, 可发生
三氯化铁反应
3,具手性碳原子, 具旋光性
4,溶解性 游离碱难溶于水, 易溶
于有机溶剂, 其盐可溶于水
5,UV
6,IR
7,取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑
特罗可用重氮化 — 偶合反应鉴别,
亚硝酸钠滴定法测定含量 。
二、鉴别试验
1,三氯化铁反应
2,氧化反应
3,与甲醛 — 硫酸反应
4,UV与 IR
5,与亚硝基铁氰化钠反应 （ Rimini反
应 ） 脂肪族伯胺的专属反应
红紫色
丙酮亚硝基铁氰化钠重酒石酸间羟胺
? ??
???
?
N a H C O 3
H O
C
H
O H
C H
C H 3
N H 2
C H ( O H ) C O O H
C H ( O H ) C O O H
三、杂质检查
杂质来源 原料残存
检查方法 比较法 （ 含量测定法 ）
（一）酮体的检查
检查原理 利用酮体在 310nm波长
处有最大吸收, 而药物本身在此波长
处几乎没有吸收, 规定一定浓度溶液
在 310nm波长处的吸收度限制酮体的
量 。
（ 二 ） 有关物质检查
盐酸去氧肾上腺素, 硫酸沙丁胺
醇等药物
检查方法,TLC中高低浓度对比法
配制两种浓度对照溶液
（ 三 ） 盐酸苯乙双胍中有关双胍的检
查
检查方法,纸色谱法 （ PC） 分离
后, 洗脱, 照分光光度法于 232nm波
长处测定吸收度, 控制吸收度以控制
有关双胍的量
四、含量测定
（ 一 ） 非水溶液滴定法 原料药
脂烃胺基侧链, 显弱碱性
（ 二 ） 溴量法 盐酸去氧肾上腺素及
其注射液, 重酒石酸间羟胺
反应摩尔比为 1∶ 6
H O
C H C H
2
N H C H
3
O H
B r
2
+3
B r
B r
H O
B r
C H C H
2
N H C H
3
O H
+ 3 H B r
（ 三 ） 比色法 盐酸克仑特罗栓
具芳伯氨基, 可发生重氮化 — 偶合
反应
AnmN 测定
盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗栓
乙二胺萘基）（、
盐酸氯仿
500m a x1HN a N O 2 ????????? ????? ??
?? ???? ??
????
对照法定量
偶合剂 N-（ 1-萘基） -乙二胺遇亚
硝酸也能显色，干扰比色测定，所以
在重氮化后，应加氨基磺酸铵将剩余
的亚硝酸分解除去，再加偶合试剂 N-
（ 1-萘基） -乙二胺。
（ 四 ） 提取酸碱滴定法
硫酸苯丙胺及其制剂
盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂
游离碱不溶于水，易溶于有机溶剂依据性质
终点（过量）
乙醚层（苯丙胺）
苯丙胺硫酸苯丙胺
滴定甲基红、
低温蒸去乙醚定量过量的
乙醚提取
、
?????? ??
???? ???????? ??
??? ??
???? ??
N a O H
42
N a C lN a O H
SOH
42
SOH
碱化
有机溶剂提取
（ 五 ） 荧光分光光度法
三羟基吲哚，，甲基
肾上腺红肾上腺素
一定条件下 ??????? ??
??
653
I 2
N
λex410nm,λem520nm处测定荧光强度,
对照法定量 。
（ 六 ） HPLC法
重酒石酸去甲肾上腺素注射液
离子对反相高效液相色谱法
内标法定量
调节溶液 pH为 3.8,加入离子对试
剂十二烷基磺酸钠
例 1,能和重酒石酸去甲肾上腺素发生颜
色反应的试液为 （ D）
A,浓硫酸
B,甲醛试液
C,氨试液
D,甲醛 — 硫酸试液
E,茚三酮试液
例 2,盐酸异丙肾上腺素的检查项目是
（ E）
A,有关物质
B,二苯酮
C,盐酸
D,醛
E,酮体
第三节 氨基醚衍生物类药物的分析
C
H
O C H
2
C H
2
N ( C H
3
)
2
H C l
盐酸苯海拉明
C
H
O C H 2 C H 2 N ( C H 3 ) 2
N
N
O
C H 3
C H 3
O
N
N
C l
H
茶苯海明
一、结构与性质
1,脂烃胺基侧链, 显弱碱性
2,UV和 IR
3,茶苯海明含卤素
二、鉴别试验
1,与硫酸反应呈色
2,制备三硝基苯酚衍生物测熔点
2,水解反应
3,与 AgNO3反应形成沉淀
4,UV和 IR
三、含量测定
（ 一 ） 非水溶液滴定法 原料
（ 二 ） 银量法
茶苯海明中 8-氯茶碱的测定
间接银量法测定
氯茶碱
、
Cl8
OHNH 23 ???
???? ???
（ 三 ） 酸性染料比色法
盐酸苯海拉明片剂及片剂溶出度
测定
（四）阴离子表面活性剂滴定法（双
相滴定法）
盐酸苯海拉明注射液
1,原理
滴定反应
RX+M— Na→ R— M+NaX K1
（可溶于有机溶剂）
终点指示
M— Na+碱性染料 → 有色物 K2
（可溶于有机溶剂）
2,测定对象 有机碱性药物
3,测定条件
（ 1）酸性溶液
（ 2）本法应用前提：药物与滴定剂的
反应优于滴定剂与指示剂的反应。若滴
定剂不能先与药物作用而先与指示剂作
用，则滴定无法进行。即使药物与滴定
剂先反应，若滴定剂不在反应完成的等
当点稍后与指示剂反应，则纵使可以滴
定，也会造成误差。 K1＞ K2，但也不能
相差太大，相差 2个数量级以下，即 ?K
＜ 100。
（ 3） 滴定剂 阴离子表面活性剂
（ 4） 指示剂 碱性染料
二甲基黄或二甲基黄 +亚甲兰（混
合指示剂可提高灵敏度）
标标标 mVc ??
样样标 mVc ??
标
样
标样
V
V
mm ??
（ 5）本法用对照法定量
因此虽用标准溶液，但标准溶液
浓度不用标定。既解决了滴定液的标
定问题，又可消除产生的滴定误差。
4,测定方法
精密量取本品适量 （ 约相当于盐酸苯海拉
明 20mg）, 臵具塞锥形瓶中, 加水 20m1,加
氯仿 50ml与稀硫酸 5m1。 再加二甲基黄一溶
剂蓝 19混合指示液 1m1,用磺基丁二酸钠二
辛酯试液滴定, 至近终点时强力振摇, 继续
滴定至氯仿层由绿色转变为红灰色；另精密
称取盐酸苯海拉明对照品约 20mg,照上述方
法自, 臵具塞锥形瓶, 起, 依法测定, 根据
二者消耗磺基丁二酸钠二辛酯试液的容积
（ m1） 比值计算, 即得 。
（五） HPLC法
茶苯海明片
离子抑制色谱法 内标法定量
例 1,氨基醚衍生物类药物的鉴别反应
是 （ ABCD）
A,硫酸呈色反应
B,水解反应
C,与硝酸银反应
D,吸收光谱法
E,三氯化铁反应
例 2,盐酸苯海拉明的含量测定可用
（ CDE）
A,电泳法
B,X— 射线衍射法
C,非水溶液滴定法
D,酸性染料比色法
E,阴离子表面活性剂滴定法
例 3,阴离子表面活性剂滴定法的终点
指示原理是 （ B）
A,碱性药物和滴定剂反应, 所生
成的配位化合物溶于有机溶剂而显色
B,滴定剂和碱性染料反应, 所生
成的配位化合物溶于有机溶剂而显色
C,碱性药物和酸性染料反应, 所
生成的配位化合物溶于有机溶剂而显
色
D,酸性药物和碱性染料反应, 所
生成的配位化合物溶于有机溶剂而显
色
E,滴定剂和酸性染料反应，所生
成的配位化合物溶于有机溶剂而显色
