第七章 杂环类药物的分析
杂环化合物：指环状有机化合
物的碳环中夹杂有非碳元素原子
（如 O,S,N等）的化合物
第一节 吡啶类药物的分析
N
C
O N H N H
2
N
异烟肼（ isoniazid）吡啶（ pyridine）
??
??
?
N
C
O
N ( C
2
H
5
)
2
尼可刹米（ nikethamide）
N
C O N H N C H
O H
O C H
3
异烟腙（ ftivazide）
N
C
S N H
2
C H
2
C H
2
C H
3
丙硫异烟胺（ protionamide）
一、结构与性质
1,吡啶环
弱碱性 pKb～ 8.8,非水碱量法
含量测定或沉淀反应鉴别
吡啶环可发生开环反应, 可用于
吡啶类药物的鉴别
2,取代基：
（ 1） 异烟肼 ? 位上酰肼基
弱酸性 非水酸量法
还原性 鉴别或氧化还原滴定法含
量测定
可 与某些羰基试剂发生缩合反应
鉴别或比色法含量测定
酰胺键易水解 引入特殊杂质 游离肼
（ 2） 尼可刹米 ?位上酰胺基
易水解, 遇碱水解后, 释放出具有
碱性的二乙胺, 能使湿润的红色石蕊
试纸变蓝色, 故可以此进行鉴别 。
（ 3） 丙硫异烟胺 ?位上硫代甲酰胺基
易水解, 加酸水解后, 释放出硫化
氢, 能使湿润的醋酸铅试纸显黑色,
故可以此进行鉴别 。
3,UV和 IR
二、鉴别试验
（ 一 ） 吡啶环的反应
1,沉淀反应
（ 1） 与氯化汞的反应
??? 白色异烟肼
尼可刹米 2
H g C l
（ 2） 与铜盐的反应
尼可刹米 ChP（ 2000）
???? 草绿色尼可刹米 S C NNHC u S O 44
【 鉴别 】 （ 3） 取本品 2 滴, 加水 1
ml, 摇匀, 加硫酸铜试液 2 滴与硫氰
酸胺试液 3 滴, 即生成草绿色沉淀 。
2,吡啶环的开环反应
适用于吡啶 ?,?′未取代, 以及
?,?为烷基或羧基的衍生物
（ 1） 戊烯二醛反应 （ K?nig反应 ）
尼可刹米 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 （ 2） 取本品 1 滴, 加水 50
ml,摇匀, 分取 2 ml,加溴化氰试
液 2 ml与 2.5% 苯胺溶液 3 ml,摇匀,
溶液渐显黄色 。
黄色戊烯二醛衍生物
溴化氰尼可刹米
苯胺
?? ??
?? ???
OH 2
H B r+N H
2
C N+
C H O HO C H
C O N ( C
2
H
5
)
2
H
2
O2
N
C N B r
C O N ( C
2
H
5
)
2
B r C N
N
C O N ( C
2
H
5
)
2
C O N ( C
2
H
5
)
2
O C H C H O H
+ 2
N H
2
N
C O N ( C
2
H
5
)
2
C H C H N H
N
C O N H N H 2
K M n O 4 或 溴水
N
C O O H
淡红～红色联苯胺戊烯二醛衍生物
黄～黄棕色苯胺戊烯二醛衍生物
??
??
异烟肼：
（ 2）二硝基氯苯反应
异烟腙 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 取异烟腙约 50 mg,加 2,4－
二硝基氯苯 50 mg与乙醇 3 m1,臵水
浴中煮沸 2～ 3 min,加 10％ 氢氧化钠
溶液 2滴, 静臵后, 即显鲜明的红色 。
N
C O O N a
N a O H
N
C O N H N C H
O C H
3
O H
鲜明的红色
乙醇二硝基氯苯，异烟腙
滴，静置
～
?????? ??
??? ????? ?
2N a O H%10
m i n3242
N
C O O N a
N O
2
N O
2
O H
-
N
C O O N a
C l
N O
2
N O
2
C l
N O
2
N O
2
+
N
C O O N a
紫红色
二硝基氯苯，异烟肼
乙醇
?? ???? ??
??
?
OH
42
异烟肼不经处理的反应,
（ 二 ） 酰肼基团的反应
1,还原反应
???
??
2
3
NAg
A g N O
、银镜）（黑色
异烟肼
异烟肼 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 （ 2）取异烟肼约 10 mg，
臵试管中，加水 2 ml溶解后，加氨制
硝酸银试液 1 m1，即发生气泡与黑色
浑浊，并在试管壁上生成银镜。
（红色）异烟肼 ??? SeS e O 2
2,缩合反应
测定熔点
异烟腙（黄色）香草醛异烟肼,
OH 2 ??? ??? ??
N
C O N H N H 2
+
C H O
O H
O C H 3
? H 2 O
N
C O N H N C H
O C H 3
O H
异烟肼 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 （ 1）取本品约 0.1 g，加水
5 ml溶解后，加 10％香草醛的乙醇溶
液 1 m1，摇匀，微热，放冷，即析出
黄色结晶，滤过，用稀乙醇重结晶，
在 105℃ 干燥后，测定熔点，其熔点
为 228～ 231℃,熔融时同时分解。
（三）分解产物的反应
?? ??? 二乙胺尼可刹米 ΔNa OH
1,尼可刹米 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 （ 1） 取本品 10 滴, 加氢
氧化钠试液 3 ml, 加热, 即发生二
乙胺的臭气, 能使湿润的红色石蕊试
纸变蓝色 。
2,丙硫异烟胺 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 （ 1） 取本品约 50 mg,加
盐酸溶液 （ 9→100） 3 ml, 缓缓加
热, 发生的气体可使湿润的醋酸铅试
纸显黑色 。
（黑色）
丙硫异烟胺
???
?? ???
?
P b SP b ( A c )SH
SHH C l
22
2
（ 四 ） 紫外吸收光谱特征
丙硫异烟胺 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 （ 1） 取本品, 加乙醇制成每
1 ml 中含 20 ?g 的 溶液, 照分光光度
法 （ 附录 Ⅳ A） 测定, 在 291 nm 的波
长处有最大吸收, 吸收度约为 0.78。
（ 五 ） IR
尼可刹米 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 （ 4） 本品的红外吸收图谱应
与对照的图谱 （ 光谱集 135 图 ） 一致 。
三、杂质检查
杂质来源 原料引入, 降解产生
（一）异烟肼中游离肼的检查
1,薄层色谱法（ TLC）
（ 1） ChP（ 2000） 杂质对照品法
取本品，加水制成每 1ml 中含 50mg
的溶液，作为供试品溶液。另取硫酸肼加
水制成每 1ml中含 0.20mg（相当于游离肼
50μg 的溶液，作为对照溶液。吸取供试品
溶液 10μl 与对照溶液 2μl 分别点于同一硅
胶薄层板（用羧甲基纤维素钠溶液制备）
上，以异丙醇－丙酮（ 3∶ 2）为展开剂，
展开后，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯
甲醛试液,15min后检视,在供试品主斑
点前方与硫酸肼斑点相应的位臵上，不得
显黄色斑点。
%02.0%1 0 0
1050
21050
%1 0 0
3
??
?
??
?
??
?
供试品量
允许杂质存在的最大量
L
（ 2） BP（ 1998）
游离肼 杂质对照品法
有关物质 高低浓度对比法
2,比浊法 JP（ 13）
检查方法 灵敏度法
反应原理
游离肼 +水杨醛 →水杨醛腙 ↓
优点,不用对照品，价廉、简单易
行
缺点,准确度差
3,差示分光光度法
游离肼 +对二甲氨基苯甲醛 →黄色缩合
物 于 456nm波长处有最大吸收
异烟肼 +对二甲氨基苯甲醛 →缩合物 于
456nm波长处 无 吸收
游离肼 +3%丙酮 →无色 的二甲基甲酮连
氮
参比,异烟肼 +游离肼 +对二甲氨基苯甲
醛 +3%丙酮
样品,异烟肼 +游离肼 +对二甲氨基苯甲
醛
测定，对照法定量
（二）尼可刹米中有关物质的检查
ChP（ 2000）
TLC 高低浓度对比法
配制两种不同浓度的对照溶液
四、含量测定
（一）异烟肼的含量测定
1,氧化还原滴定法
（ 1）溴酸钾法
ChP（ 2000）原料及制剂
N
C O N H N H 2
3 +2 K B r O 3
H C l
N
C O O H
3 + 3 N 2↑ +3 H 2 O + 2 K B r
反应摩尔比 3∶ 2
mlmg429.3
32
14.13701667.0
?
?
??
n
cM
T
取本品约 0.2g,精密称定, 臵 100ml
量瓶中, 加水使溶解并稀释至刻度, 摇匀；
精密量取 25m1,加水 50m1,盐酸 20ml与
甲基橙指示剂 1滴, 用溴酸钾滴定液
（ 0.01667mo1/L） 缓缓滴定 （ 温度保持在
18～ 25℃ ） 至粉红色消失 。 每 1ml的溴酸
钾 滴 定 液 （ 0.01667mol/L ） 相 当 于
3.429mg的 C6H7N3O。
（ 2）溴量法 反应摩尔比 1∶ 4
mlmg4 2 9.3
4
14.1 3 71.0
?
?
??
n
cM
T
N
C O N H N H 2
+ 2 B r 2 + H 2 O
H C l
N
C O O H
+ N
2 ↑ + 4 H B r
（ 3） 剩余碘量法 反应摩尔比 1∶ 4
N
C O N H N H 2
+ 2 +
N
C O O H
+ N 2 ↑ + 4 N aI + 5I
2 5 N a H C O 3
C O 2 +4 H 2 O
2,非水溶液滴定法
（ 1）非水酸量法
（ 2）非水碱量法
（二）尼可刹米的含量测定
1,非水溶液滴定法
ChP（ 2000） 原料
2,紫外分光光度法
ChP（ 2000）注射液
内容量移液管
用内容量移液管精密量取本品 1m1，
臵 100ml 量瓶中, 用 0.5％ 硫酸溶液分次
洗涤移液管内壁, 洗液并入量瓶中, 加
0.5％ 硫酸溶液稀释至刻度, 摇匀, 精密
量取适量, 加 0.5％ 硫酸溶液稀释成每 1ml
中约含尼可刹米 20μg 的溶液, 在 263nm的
波长处测定吸收度, 按 C10H14N2O的吸收
系数 （ ） 为 292计算, 即得 。
1%
1cmE
（三）异烟腙的含量测定
非水溶液滴定法 电位法指示
终点
ChP（ 2000） 原料及片剂
（四）丙硫异烟胺的含量测定
1,非水溶液滴定法
ChP（ 2000） 原料
2,银量法
ChP（ 2000）片剂
取本品 20片, 精密称定, 研细, 精密
称取适量 （ 约相当于丙硫异烟胺 0.3g） 臵
具塞锥形瓶中, 加丙酮 20ml使丙硫异烟胺
溶解, 精密加入硝酸银滴定液 （ 0.1mo1/L）
50m1,摇匀, 放臵 15min,加水 50m1,硝
酸 3m1,硝基苯 5ml与硫酸铁铵指示液 2m1，
用硫氰酸铵滴定液 （ 0.1mo1/L） 滴定, 并
将滴定的结果用空白试验校正 。 每 lml的
硝酸银滴定液 （ 0.1mo1/L） 相当于
9.014mg的 C9H12N2S。
99,79,下列药物中, 哪一个药物加
氨制硝酸银能产生银镜反应
A,地西泮
B,阿司匹林
C,异烟肼
D,苯佐卡因
E,苯巴比妥
97,132,用于吡啶类药物鉴别的开
环反应有
A,茚三酮反应
B,戊烯二醛反应
C,坂口反应
D,硫色素反应
E．二硝基氯苯反应
例 1,ChP（ 2000） 异烟肼的测定方法
为
A,溴酸钾滴定法
B,溴量法
C,TCL
D,NaNO2
E,比色法
例 2,能和 2,4一二硝基氯苯发生呈色
反应的药物是
A,异烟腙
B,硫酸奎宁
C,阿莫西林
D,四环素
E,炔孕酮
例 3,能和硫酸铜及硫氰酸铵反应, 生
成草绿色沉淀的药物为
A,对乙酰氨基酚
B,异烟肼
C,尼可刹米
D,地西泮
E,维生素 E
例 4,经高锰酸钾或溴水氧化后, 可发生
开环形成戊烯二醛反应的药物为
A,葡萄糖
B,皮质酮
C,维生素 C
D,土酶素
E,异烟肼
例 5,溴酸钾法测定异烟肼含量的方法是
A,属于氧化还原滴定法
B,lmol溴酸钾相当于 3/2mol的异烟肼
C,采用永停滴定法指示终点
D,在 HCl酸性条件下进行滴定
E,还可以用于异烟肼制剂的含量测定
例 6,异烟肼可由原料反应不完全或贮
藏中的降解反应而引入哪种杂质
A,间氨基酚
B,水杨酸
C,对氨基苯甲酸
D,游离肼
E,其他甾体
例 7,可用于异烟肼鉴别的反应有
A,与氨制硝酸银的反应
B,戊烯二醛反应
C,坂口反应
D,硫色素反应
E,二硝基氯苯反应
第二节 吩噻嗪类药物的分析
吩噻嗪类药物的基本结构
N
S
R
R '
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
N
S
C H
2
C H N ( C H
3
)
2
C H
3
H C l
盐酸异丙嗪
N
S
C H
2
C H
2
C H
2
N ( C H
3
)
2
C l
H C l
盐酸氯丙嗪
N
S
C l
C H
2
C H
2
C H
2
N N C H
2
C H
2
O H
奋乃静
N
S
C H
2
C H
2
C H
2
C F
3
N N ( C H
2
)
2
O C O ( C H
2
)
8
C H
3
癸氟奋乃静
H ClN
S
C H
2
C H
2
C H
2
C F
3
N N C H
2
C H
2
O H
2
盐酸氟奋乃静
N
S
C H
2
C H
2
C H
2
N N C H
3
C F
3
H C l2
盐酸三氟拉嗪
盐酸二氧丙嗪
H C l
N
S
O O
C H
2
C H ( C H
3
) N ( C H
3
)
2
一、结构与性质
（一）结构分析
1,硫氮杂蒽母核
（ 1）含 S,N的三环共轭的大 ?体系，
S,N与苯环形成 p-?共轭 —— 具有紫
外吸收光谱特征
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1N
S
（ 2） 硫氮杂蒽环上硫原子为 -2价,
具有还原性, 易氧化呈色
（ 3）硫氮杂蒽环上硫原子有两对
孤对电子，易与金属离子络合呈色
2,取代基
R：脂烃胺基, 哌嗪基, 具碱性
R?：卤素
??????? ??? XXC 一定方法破坏
（ 二 ） 性质
1,紫外与红外吸收光谱 本类药
物的紫外特征吸收, 主要由 母核三环
的 π系统 所产生, 一般具有 三个峰值 。
即在 204～ 209nm（ 205nm附近 ）,
250～ 265nm（ 254nm附近 ） 和 300～
325nm（ 300nm附近 ） 。 最强峰多在
250～ 265nm。
2位上的取代基 （ R′） 不同, 会
引起吸收峰发生位移 。
其结构中 -2 价的硫, 易氧化, 氧
化产物砜及亚砜有四个吸收峰 。
吩噻嗪类药物随取代基 R 和 R′的
不同, 产生不同的红外吸收光谱 。
2,易被氧化呈色
3,易与金属离子络合呈色
4,碱性
二、鉴别试验
（ 一 ） UV和 IR
奋乃静 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 2） 取本品, 加无水乙醇制
成每 1ml 中含 7?g 的 溶液, 照分光光
度法 （ 附录 Ⅳ A） 测定, 在 258nm 的
波长处有最大吸收, 吸收度约为 0.65。
（ 3）本品的红外吸收图谱应与对照
的图谱（光谱集 243 图）一致
（二） 显色反应
1,氧化剂氧化显色
氧化剂 硫酸、硝酸、过氧化氢
奋乃静 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 1） 取本品 5mg,加盐酸与
水各 1ml,加热至 80℃, 加入过氧化
氢溶液数滴, 即显深红色；放臵后,
红色渐褪去 。
盐酸异丙嗪 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 1）取本品约 5mg，加硫酸
5ml 溶解后，溶液显樱桃红色；放臵
后，色渐变深。
（ 2）取本品约 0.1g，加水 3ml 溶解
后，加硝酸 1ml，即生成红色沉淀；
加热，沉淀即溶解，溶液由红色转变
为橙黄色。
癸氟奋乃静 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 2）取本品约 5mg，加甲醇
2ml 溶解后，加 0.1% 氯化钯溶液
3ml，即有沉淀生成，并显红色，再
加过量的氯化钯溶液，颜色变深。
2,与钯离子络合显色
（三）分解产物的反应
癸氟奋乃静 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 1）取本品 15 ～ 20mg，加碳
酸钠与碳酸钾各约 0.1g，混匀，在
600℃ 炽灼 15～ 20分钟，放冷，加水
2ml 使溶解，加盐酸溶液（ 1→2）酸
化，滤过，滤液加茜素锆试液 0.5ml，
应显黄色。
溶液由红色变为黄色
茜素
癸氟奋乃静
酸性茜素锆
℃，
]Z r F[
F
2
6
600COKCONa
3232
????? ??
??????? ??
?
??
（四）氯化物的反应
盐酸氯丙嗪 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 3）本品的水溶液显氯化物
的鉴别反应（附录 Ⅲ ）。
三、有关物质检查
1,癸氟奋乃静及其注射液
TLC 参比杂质对照品法
以盐酸氟奋乃静为对照品
2,其他药物
TLC 高低浓度对比法
四、含量测定
（ 一 ） 非水溶液滴定法 原料药
HClO4在冰醋酸溶液中, 具强氧化
性, 可氧化吩噻嗪类药物产生红色的
氧化物, 干扰指示剂终点的观察 。 排
除方法：
（ 1） 改用中性溶剂
（ 2） 加抗坏血酸
（ 3） 电位法指示终点
（ 二 ） 紫外分光光度法
1,直接分光光度法
盐酸异丙嗪,片剂测定波长为
249nm（ 为 910）；注射液为了
消除抗氧剂维生素 C（ ?max 243nm）对
测定的干扰，测定波长改为 299nm
（ 为 108）。
1%
1cmE
1%
1cmE
同理,盐酸氯丙嗪 片剂测定波长
为 254nm（ 为 915）；注射液测定
波长改为 306nm（ 为 115） 。
1%
1cmE
1%
1cmE
2,萃取后分光光度法
盐酸氯丙嗪注射液
计算。为以
，测定盐酸氯丙嗪
乙醚层
氯丙嗪盐酸氯丙嗪
盐酸萃取乙醚提取
氨水碱化
915 E
1254
1%
1 c m
m a x
Anm?
??? ????? ??
??? ??
?
3,二阶导数分光光度法
盐酸氯丙嗪注射液
抗氧剂维生素 C的二阶导数光谱近
似为接近基线的一条直线，不干扰盐
酸氯丙嗪的测定
因此盐酸氯丙嗪可从其二阶导数
光谱量取峰 266nm～ 谷 254nm距离，标准
曲线法定量
4,萃取 — 双波长分光光度法
（ 1） 原理
在待测组分 （ a） 的最大吸收波长
（ 测定波长, ?1） 处测定待测组分和干
扰组分 （ b） 吸收度的总和；另选一适
当波长 （ 参比波长, ?2） 测定吸收度,
并使干扰组分在测定波长和参比波长处
的吸收度相等, 即, 而待测组
分在这两个波长处吸收度的差值足够大 。
bb AA
21 ??
?
（ 2）定量依据 样品在二波长下吸收度
差值（ ?A）：
a
bb
a
aa
babababa
CA
AA
lCAA
AAAAAAA
??
?
????
???????
??
)(
)()(
21
2121
221121
??
????
??????
??
即，吸收度差值（ ?A）仅与待测组分
的浓度有关，而与干扰组分无关，干
扰组分的干扰被消除。
（ 3） 必要条件
① 干扰组分在两个波长处吸收度
相等
② 待测组分在两个波长处吸收度
相差足够大
（ 4） 应用
① 萃取 除去抗氧剂的干扰
氧化产物盐酸盐盐酸氯丙嗪
乙醚层
氧化产物氯丙嗪
盐酸氯丙嗪注射液
盐酸萃取
乙醚提取
浓氨碱化
?
??? ??
??? ???
??? ??
② 双波长分光光度法测定
排除氧化产物的干扰
测定波长 254nm
参比波长 277nm
对照法定量
（三） 铈量法
红色消褪红色 ?????? ??
?
?????? ??
?
?? ??
?
e2,)C e ( S O
e,)C e ( S O
s o l
H
S
24
24
自身指示终点或电位法、永停
法指示终点
优点：
硫酸铈作滴定剂具有高的氧化
电位，且为一价还原；不存在对环
取代基的副反应，专属性高。
本法既可用于原料，亦可用于
片剂的测定
（ 四 ） 比色法
1,钯离子比色法
，对照法定量处测定在
～
红色络合物吩噻嗪类药物
A
nm500
Pd
m a x
m a x
0, 1p H 22
?
?
??? ???
??
反应在 pH2〒 0.1 的缓冲液中进行
优点：
钯离子比色法可选择性地用于未
被氧化的吩噻嗪类药物的测定
2,铁盐比色法
95,131,盐酸氯丙嗪的含量测定方法
有
A,中和法
B,非水滴定法
C,紫外法
D,旋光法
E,铈量法
99x,87,中国药典 （ 1995年版 ） 对盐
酸异丙嗪注射液的含量测定, 选用
299nm波长处测定, 其原因是
A,299nm处是它的最大吸收波长
B,为了排除其氧化产物的干扰
C,为了排除抗氧剂的干扰
D,在 299nm处, 它的吸 收系数最大
E,在其他波长处，因其无明显吸收
99x,78,有氧化产物存在时, 吩噻嗪
类药物的鉴别或含量测定方法为
A,非水溶液滴定法
B,紫外分光光度法
C,荧光分光光度法
D,钯离子比色法
E,pH指示剂吸收度比值法
例 1,中国药典 (2000年版 )中地西泮原
料药中 2-甲氨基 -5-氯二苯酮的检查法
为
A,TLC
B,HPLC
C,GC
D,沉淀法
E,显色法
例 2,检查盐酸氯丙嗪中, 有关物质,
时, 采用的对照溶液为
A,杂质的标准溶液
B,标准, 有关物质, 溶液
C,供试品溶液
D,供试液的稀释溶液
E,对照溶液
例 3,某药物于酸性溶液中, 加硫酸铈试
液则产生红色, 继续滴加硫酸铈试液,
红色由浅变深, 继由深又变浅直至红色
消失, 该药物应为
A,雌二醇
B,氯丙嗪
C,诺氟沙星
D,硫酸镁
E,苯巴比妥钠
例 4,吩噻嗪类药物与钯离子反应，需
在以下哪种酸性条件下进行
A,pH4
B,pH3～ 3.5
C,pH2± 0.1
D,pH1
E,pH5
第三节 苯并二氮杂卓
类药物的分析
1
2
3
4
5
6
7
+
环庚三烯 草卓
N
N
1
2
3
45
6
7
1,4-二氮杂卓 N
N
1
2
3
45
6
7
1,4-苯并二氮杂卓
8
9
N
N
N
C H
3
O
C l
氯氮卓
H
N
N
C l
H
3
C
O
地西泮
N
N
O
2
N
OH
硝西泮
N
N
O
2
N
O
C l
H
氯硝西泮
奥沙西泮
H
N
N
O
C l
O H
N
N
O
C l
O H
F
C H
2
C H
2
N ( C H
2
C H
3
)
2
2 H C l
盐酸氟西泮
N
N
N
N
C l
艾司唑仑
N
N
N
N
C l
H
3
C
阿普唑仑
一、结构与性质
1,苯并二氮杂卓母核 弱碱性, UV
2,结构中的环一般比较稳定，但在酸
性溶液中可水解，形成相应的二苯甲酮
衍生物。
甘氨酸地西泮, ??? ?? ? OHH 2
（芳伯氨基）
二苯甲酮氯氨基氯氮卓,
52OHH 2 ??????? ??
?
N H
2
C l C O
H
+
N
N
C l
O
N H C H
3
?????? ??? XXC 氧瓶燃烧法破坏
3,含卤素
二、鉴别试验
（ 一 ） 化学反应
1,沉淀反应
??? ??? 橙红色氯氮卓、地西泮 HC l4K B i I
氯氮卓 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 （ 2）取本品约 10mg，加盐
酸溶液（ 9→1000） 10ml 溶解后，加
碘化铋钾试液 1 滴，即生成橙红色沉
淀。
阿普唑仑 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 1）取本品约 5mg，加盐酸
溶液（ 9→1000） 2ml 溶解后，分为
两份：一份加硅钨酸试液 1 滴，即生
成白色沉淀；另一份加碘化铋钾试液
1 滴，即生成橙红色沉淀。
??? ??? 白色硅钨酸阿普唑仑 H C l
2,水解后重氮化 — 偶合反应
氯氮卓、艾司唑仑、奥沙西泮
氯氮卓 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 1）取本品约 10mg，加盐酸
溶液（ 1→2） 15ml，缓缓煮沸 15 分
钟，放冷，溶液显芳香第一胺类的鉴
别反应（附录 Ⅲ ）。
3,水解后呈茚三酮反应 地西泮
4,硫酸 — 荧光反应
地西泮 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 1）取本品约 10mg，加硫酸
3ml，振摇使溶解，在紫外灯
（ 365nm）下检视，显黄绿色荧光。
氯氮卓 —— 黄色
艾司唑仑 —— 亮绿色
硝西泮 —— 淡蓝色
5,分解产物的反应
地西泮 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 2）取本品 20mg，用氧瓶燃
烧法（附录 Ⅶ C）进行有机破坏，以
5% 氢氧化钠溶液 5ml 为吸收液，燃
烧完全后，用稀硝酸酸化，并缓缓煮
沸 2 分钟，溶液显氯化物的鉴别反应
（附录 Ⅲ ）。
（二） UV 和 IR
（三） TLC
三、特殊杂质的检查
（ 一 ） 有关物质的检查
1,地西泮中有关物质的检查
地西泮的原料及片剂
TLC 高低浓度对比法
2,氯氮卓中有关物质的检查
USP（ 24） TLC
氧化物, 氨基物 杂质对照品法
有关物质 参比杂质对照品法
BP（ 1998） TLC 高低浓度对比法
3,氯氮卓中有关物质的反相高效液相
色谱法
（ 二 ） 降解产物的检查
地西泮注射液
分解产生 2-甲氨基 -5-氯二苯甲酮
HPLC 主成分自身对照法
1,峰面积归一化法
取一定量供试品溶液进样，测定各
杂质及药物的峰面积，计算各杂质峰面
积及其总和占总峰面积的百分率，不能
超过限量。注意溶剂峰不应计算在总峰
面积内。
优点：不需杂质对照品，简便易
行。
缺点：检测波长处, 各杂质和药
物的吸收强度可能有差异, 控制杂质
峰面积百分率不一定就是杂质限量,
准确度差 。
2,主成分自身对照法
杂质峰面积与主成分峰面积相差悬
殊时应用。
方法
对照溶液一定量供试品溶液
供试品溶液
稀释
溶剂溶解
?? ??
??? ??S
分别进样，测定供试品溶液中各
杂质峰面积及其总和，与对照溶液主
成分峰面积比较，控制供试品中杂质
的量。
缺点：检测波长处，各杂质和药
物的吸收强度可能有差异，准确度差
优点：不需杂质对照品，可同时
控制各个杂质及其总量限度
3,内标法测定供试品中杂质的总量限
度
方法
供试品 →供试品溶液 1 图 1
供试品 +内标 →供试品溶液 2 图 2
判断
若图 1无与内标峰保留时间相同的
杂质峰, 则图 2中各杂质峰面积之和应
小于内标物质峰面积 （ 溶剂峰不计在
内 ）
若图 1有与内标峰保留时间相同的
杂质峰，则将图 2上的内标峰面积减去
图 1中此杂质峰面积,得内标物质峰的
校正面积 ；图 2中各杂质峰面积加上图 1
此杂质峰面积，得各杂质峰的校正总面
积；各杂质峰校正总面积应小于内标物
质峰的校正面积。
4,内标法加校正因子测定供试品中
某个杂质的含量
准确测定杂质含量
方法
内标 +杂质对照品 →溶液，进样，
测定，计算校正因子
rr
ss
mA
mA
f ?）校正因子（
供试品 +内标 →供试品溶液, 进
样, 测定杂质和内标峰面积或峰高,
计算杂质量
ss
x
x
mA
A
fm ??）杂质量（
5,外标法测定供试品中某个杂质的
量
供试品 →供试品溶液
杂质对照品 →对照品溶液进样, 测
定, 计算杂质的含量
r
x
x
A
A
fm ??）杂质量（
缺点：不易准确控制进样量，宜
用定量环进样
四、含量测定
（ 一 ） 非水溶液滴定法 原料
（ 二 ） 紫外分光光度法
（ 三 ） 比色法
1,地西泮经水解后氯仿提取液的比
色测定法
量对照法或吸收曲线法定
，处测定黄色溶液，
二苯甲酮氯甲氨基地西泮
氯仿
Anm 410
52
m a x
H
??? ??
????? ??
?
2,地西泮水解产物甘氨酸与茚三酮
反应后比色测定法
A nm5 7 0m a x
H
处测定紫色，
茚三酮甘氨酸地西泮
??
?? ??
?
3,氯氮卓经酸水解后的重氮化 — 偶
合比色测定法
（ 四 ） HPLC
1,地西泮注射液的 HPLC 法
内标法加校正因子定量
2,三唑仑的 HPLC 法
内标法加校正因子定量
97,[116— 120]
A,氯氮卓 （ 利眠宁 ） B,地西泮 （ 安定 ）
C,两者均能 D,两者均不能
97,116,分子母核属于苯并二氮杂卓
97,117,用氧瓶燃烧法破坏后, 显氯化物
反应
97,118,水解后呈芳伯胺反应
97,119,与三氯化锑反应生成紫红色
97,120．溶于硫酸后，在紫外光下显黄绿
色荧光
(C)
（ C）
（ A）
（ D）
（ B）
99,85,硫酸 — 荧光反应为地西泮的
特征鉴别反应之一 。 地西泮加硫酸溶
解后, 在紫外光下显
A,红色荧光 B,橙色荧光
C,黄绿色荧光 D,淡蓝色荧光
E,紫色荧色
例 1,某药物经酸水解后呈茚三酮反应，
溶液显紫色，该药为
A,氯氮卓
B,地西泮
C,盐酸普鲁卡因
D,阿司匹林
E,尼可刹米
例 2,某药物经酸水解后可用重氮化 —
偶合反应鉴别，此药物是
A,盐酸氯丙嗪
B,氯氮卓
C,地西泮
D,醋酸氢化可的松
E,维生素 C
杂环化合物：指环状有机化合
物的碳环中夹杂有非碳元素原子
（如 O,S,N等）的化合物
第一节 吡啶类药物的分析
N
C
O N H N H
2
N
异烟肼（ isoniazid）吡啶（ pyridine）
??
??
?
N
C
O
N ( C
2
H
5
)
2
尼可刹米（ nikethamide）
N
C O N H N C H
O H
O C H
3
异烟腙（ ftivazide）
N
C
S N H
2
C H
2
C H
2
C H
3
丙硫异烟胺（ protionamide）
一、结构与性质
1,吡啶环
弱碱性 pKb～ 8.8,非水碱量法
含量测定或沉淀反应鉴别
吡啶环可发生开环反应, 可用于
吡啶类药物的鉴别
2,取代基：
（ 1） 异烟肼 ? 位上酰肼基
弱酸性 非水酸量法
还原性 鉴别或氧化还原滴定法含
量测定
可 与某些羰基试剂发生缩合反应
鉴别或比色法含量测定
酰胺键易水解 引入特殊杂质 游离肼
（ 2） 尼可刹米 ?位上酰胺基
易水解, 遇碱水解后, 释放出具有
碱性的二乙胺, 能使湿润的红色石蕊
试纸变蓝色, 故可以此进行鉴别 。
（ 3） 丙硫异烟胺 ?位上硫代甲酰胺基
易水解, 加酸水解后, 释放出硫化
氢, 能使湿润的醋酸铅试纸显黑色,
故可以此进行鉴别 。
3,UV和 IR
二、鉴别试验
（ 一 ） 吡啶环的反应
1,沉淀反应
（ 1） 与氯化汞的反应
??? 白色异烟肼
尼可刹米 2
H g C l
（ 2） 与铜盐的反应
尼可刹米 ChP（ 2000）
???? 草绿色尼可刹米 S C NNHC u S O 44
【 鉴别 】 （ 3） 取本品 2 滴, 加水 1
ml, 摇匀, 加硫酸铜试液 2 滴与硫氰
酸胺试液 3 滴, 即生成草绿色沉淀 。
2,吡啶环的开环反应
适用于吡啶 ?,?′未取代, 以及
?,?为烷基或羧基的衍生物
（ 1） 戊烯二醛反应 （ K?nig反应 ）
尼可刹米 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 （ 2） 取本品 1 滴, 加水 50
ml,摇匀, 分取 2 ml,加溴化氰试
液 2 ml与 2.5% 苯胺溶液 3 ml,摇匀,
溶液渐显黄色 。
黄色戊烯二醛衍生物
溴化氰尼可刹米
苯胺
?? ??
?? ???
OH 2
H B r+N H
2
C N+
C H O HO C H
C O N ( C
2
H
5
)
2
H
2
O2
N
C N B r
C O N ( C
2
H
5
)
2
B r C N
N
C O N ( C
2
H
5
)
2
C O N ( C
2
H
5
)
2
O C H C H O H
+ 2
N H
2
N
C O N ( C
2
H
5
)
2
C H C H N H
N
C O N H N H 2
K M n O 4 或 溴水
N
C O O H
淡红～红色联苯胺戊烯二醛衍生物
黄～黄棕色苯胺戊烯二醛衍生物
??
??
异烟肼：
（ 2）二硝基氯苯反应
异烟腙 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 取异烟腙约 50 mg,加 2,4－
二硝基氯苯 50 mg与乙醇 3 m1,臵水
浴中煮沸 2～ 3 min,加 10％ 氢氧化钠
溶液 2滴, 静臵后, 即显鲜明的红色 。
N
C O O N a
N a O H
N
C O N H N C H
O C H
3
O H
鲜明的红色
乙醇二硝基氯苯，异烟腙
滴，静置
～
?????? ??
??? ????? ?
2N a O H%10
m i n3242
N
C O O N a
N O
2
N O
2
O H
-
N
C O O N a
C l
N O
2
N O
2
C l
N O
2
N O
2
+
N
C O O N a
紫红色
二硝基氯苯，异烟肼
乙醇
?? ???? ??
??
?
OH
42
异烟肼不经处理的反应,
（ 二 ） 酰肼基团的反应
1,还原反应
???
??
2
3
NAg
A g N O
、银镜）（黑色
异烟肼
异烟肼 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 （ 2）取异烟肼约 10 mg，
臵试管中，加水 2 ml溶解后，加氨制
硝酸银试液 1 m1，即发生气泡与黑色
浑浊，并在试管壁上生成银镜。
（红色）异烟肼 ??? SeS e O 2
2,缩合反应
测定熔点
异烟腙（黄色）香草醛异烟肼,
OH 2 ??? ??? ??
N
C O N H N H 2
+
C H O
O H
O C H 3
? H 2 O
N
C O N H N C H
O C H 3
O H
异烟肼 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 （ 1）取本品约 0.1 g，加水
5 ml溶解后，加 10％香草醛的乙醇溶
液 1 m1，摇匀，微热，放冷，即析出
黄色结晶，滤过，用稀乙醇重结晶，
在 105℃ 干燥后，测定熔点，其熔点
为 228～ 231℃,熔融时同时分解。
（三）分解产物的反应
?? ??? 二乙胺尼可刹米 ΔNa OH
1,尼可刹米 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 （ 1） 取本品 10 滴, 加氢
氧化钠试液 3 ml, 加热, 即发生二
乙胺的臭气, 能使湿润的红色石蕊试
纸变蓝色 。
2,丙硫异烟胺 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 （ 1） 取本品约 50 mg,加
盐酸溶液 （ 9→100） 3 ml, 缓缓加
热, 发生的气体可使湿润的醋酸铅试
纸显黑色 。
（黑色）
丙硫异烟胺
???
?? ???
?
P b SP b ( A c )SH
SHH C l
22
2
（ 四 ） 紫外吸收光谱特征
丙硫异烟胺 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 （ 1） 取本品, 加乙醇制成每
1 ml 中含 20 ?g 的 溶液, 照分光光度
法 （ 附录 Ⅳ A） 测定, 在 291 nm 的波
长处有最大吸收, 吸收度约为 0.78。
（ 五 ） IR
尼可刹米 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 （ 4） 本品的红外吸收图谱应
与对照的图谱 （ 光谱集 135 图 ） 一致 。
三、杂质检查
杂质来源 原料引入, 降解产生
（一）异烟肼中游离肼的检查
1,薄层色谱法（ TLC）
（ 1） ChP（ 2000） 杂质对照品法
取本品，加水制成每 1ml 中含 50mg
的溶液，作为供试品溶液。另取硫酸肼加
水制成每 1ml中含 0.20mg（相当于游离肼
50μg 的溶液，作为对照溶液。吸取供试品
溶液 10μl 与对照溶液 2μl 分别点于同一硅
胶薄层板（用羧甲基纤维素钠溶液制备）
上，以异丙醇－丙酮（ 3∶ 2）为展开剂，
展开后，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯
甲醛试液,15min后检视,在供试品主斑
点前方与硫酸肼斑点相应的位臵上，不得
显黄色斑点。
%02.0%1 0 0
1050
21050
%1 0 0
3
??
?
??
?
??
?
供试品量
允许杂质存在的最大量
L
（ 2） BP（ 1998）
游离肼 杂质对照品法
有关物质 高低浓度对比法
2,比浊法 JP（ 13）
检查方法 灵敏度法
反应原理
游离肼 +水杨醛 →水杨醛腙 ↓
优点,不用对照品，价廉、简单易
行
缺点,准确度差
3,差示分光光度法
游离肼 +对二甲氨基苯甲醛 →黄色缩合
物 于 456nm波长处有最大吸收
异烟肼 +对二甲氨基苯甲醛 →缩合物 于
456nm波长处 无 吸收
游离肼 +3%丙酮 →无色 的二甲基甲酮连
氮
参比,异烟肼 +游离肼 +对二甲氨基苯甲
醛 +3%丙酮
样品,异烟肼 +游离肼 +对二甲氨基苯甲
醛
测定，对照法定量
（二）尼可刹米中有关物质的检查
ChP（ 2000）
TLC 高低浓度对比法
配制两种不同浓度的对照溶液
四、含量测定
（一）异烟肼的含量测定
1,氧化还原滴定法
（ 1）溴酸钾法
ChP（ 2000）原料及制剂
N
C O N H N H 2
3 +2 K B r O 3
H C l
N
C O O H
3 + 3 N 2↑ +3 H 2 O + 2 K B r
反应摩尔比 3∶ 2
mlmg429.3
32
14.13701667.0
?
?
??
n
cM
T
取本品约 0.2g,精密称定, 臵 100ml
量瓶中, 加水使溶解并稀释至刻度, 摇匀；
精密量取 25m1,加水 50m1,盐酸 20ml与
甲基橙指示剂 1滴, 用溴酸钾滴定液
（ 0.01667mo1/L） 缓缓滴定 （ 温度保持在
18～ 25℃ ） 至粉红色消失 。 每 1ml的溴酸
钾 滴 定 液 （ 0.01667mol/L ） 相 当 于
3.429mg的 C6H7N3O。
（ 2）溴量法 反应摩尔比 1∶ 4
mlmg4 2 9.3
4
14.1 3 71.0
?
?
??
n
cM
T
N
C O N H N H 2
+ 2 B r 2 + H 2 O
H C l
N
C O O H
+ N
2 ↑ + 4 H B r
（ 3） 剩余碘量法 反应摩尔比 1∶ 4
N
C O N H N H 2
+ 2 +
N
C O O H
+ N 2 ↑ + 4 N aI + 5I
2 5 N a H C O 3
C O 2 +4 H 2 O
2,非水溶液滴定法
（ 1）非水酸量法
（ 2）非水碱量法
（二）尼可刹米的含量测定
1,非水溶液滴定法
ChP（ 2000） 原料
2,紫外分光光度法
ChP（ 2000）注射液
内容量移液管
用内容量移液管精密量取本品 1m1，
臵 100ml 量瓶中, 用 0.5％ 硫酸溶液分次
洗涤移液管内壁, 洗液并入量瓶中, 加
0.5％ 硫酸溶液稀释至刻度, 摇匀, 精密
量取适量, 加 0.5％ 硫酸溶液稀释成每 1ml
中约含尼可刹米 20μg 的溶液, 在 263nm的
波长处测定吸收度, 按 C10H14N2O的吸收
系数 （ ） 为 292计算, 即得 。
1%
1cmE
（三）异烟腙的含量测定
非水溶液滴定法 电位法指示
终点
ChP（ 2000） 原料及片剂
（四）丙硫异烟胺的含量测定
1,非水溶液滴定法
ChP（ 2000） 原料
2,银量法
ChP（ 2000）片剂
取本品 20片, 精密称定, 研细, 精密
称取适量 （ 约相当于丙硫异烟胺 0.3g） 臵
具塞锥形瓶中, 加丙酮 20ml使丙硫异烟胺
溶解, 精密加入硝酸银滴定液 （ 0.1mo1/L）
50m1,摇匀, 放臵 15min,加水 50m1,硝
酸 3m1,硝基苯 5ml与硫酸铁铵指示液 2m1，
用硫氰酸铵滴定液 （ 0.1mo1/L） 滴定, 并
将滴定的结果用空白试验校正 。 每 lml的
硝酸银滴定液 （ 0.1mo1/L） 相当于
9.014mg的 C9H12N2S。
99,79,下列药物中, 哪一个药物加
氨制硝酸银能产生银镜反应
A,地西泮
B,阿司匹林
C,异烟肼
D,苯佐卡因
E,苯巴比妥
97,132,用于吡啶类药物鉴别的开
环反应有
A,茚三酮反应
B,戊烯二醛反应
C,坂口反应
D,硫色素反应
E．二硝基氯苯反应
例 1,ChP（ 2000） 异烟肼的测定方法
为
A,溴酸钾滴定法
B,溴量法
C,TCL
D,NaNO2
E,比色法
例 2,能和 2,4一二硝基氯苯发生呈色
反应的药物是
A,异烟腙
B,硫酸奎宁
C,阿莫西林
D,四环素
E,炔孕酮
例 3,能和硫酸铜及硫氰酸铵反应, 生
成草绿色沉淀的药物为
A,对乙酰氨基酚
B,异烟肼
C,尼可刹米
D,地西泮
E,维生素 E
例 4,经高锰酸钾或溴水氧化后, 可发生
开环形成戊烯二醛反应的药物为
A,葡萄糖
B,皮质酮
C,维生素 C
D,土酶素
E,异烟肼
例 5,溴酸钾法测定异烟肼含量的方法是
A,属于氧化还原滴定法
B,lmol溴酸钾相当于 3/2mol的异烟肼
C,采用永停滴定法指示终点
D,在 HCl酸性条件下进行滴定
E,还可以用于异烟肼制剂的含量测定
例 6,异烟肼可由原料反应不完全或贮
藏中的降解反应而引入哪种杂质
A,间氨基酚
B,水杨酸
C,对氨基苯甲酸
D,游离肼
E,其他甾体
例 7,可用于异烟肼鉴别的反应有
A,与氨制硝酸银的反应
B,戊烯二醛反应
C,坂口反应
D,硫色素反应
E,二硝基氯苯反应
第二节 吩噻嗪类药物的分析
吩噻嗪类药物的基本结构
N
S
R
R '
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
N
S
C H
2
C H N ( C H
3
)
2
C H
3
H C l
盐酸异丙嗪
N
S
C H
2
C H
2
C H
2
N ( C H
3
)
2
C l
H C l
盐酸氯丙嗪
N
S
C l
C H
2
C H
2
C H
2
N N C H
2
C H
2
O H
奋乃静
N
S
C H
2
C H
2
C H
2
C F
3
N N ( C H
2
)
2
O C O ( C H
2
)
8
C H
3
癸氟奋乃静
H ClN
S
C H
2
C H
2
C H
2
C F
3
N N C H
2
C H
2
O H
2
盐酸氟奋乃静
N
S
C H
2
C H
2
C H
2
N N C H
3
C F
3
H C l2
盐酸三氟拉嗪
盐酸二氧丙嗪
H C l
N
S
O O
C H
2
C H ( C H
3
) N ( C H
3
)
2
一、结构与性质
（一）结构分析
1,硫氮杂蒽母核
（ 1）含 S,N的三环共轭的大 ?体系，
S,N与苯环形成 p-?共轭 —— 具有紫
外吸收光谱特征
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1N
S
（ 2） 硫氮杂蒽环上硫原子为 -2价,
具有还原性, 易氧化呈色
（ 3）硫氮杂蒽环上硫原子有两对
孤对电子，易与金属离子络合呈色
2,取代基
R：脂烃胺基, 哌嗪基, 具碱性
R?：卤素
??????? ??? XXC 一定方法破坏
（ 二 ） 性质
1,紫外与红外吸收光谱 本类药
物的紫外特征吸收, 主要由 母核三环
的 π系统 所产生, 一般具有 三个峰值 。
即在 204～ 209nm（ 205nm附近 ）,
250～ 265nm（ 254nm附近 ） 和 300～
325nm（ 300nm附近 ） 。 最强峰多在
250～ 265nm。
2位上的取代基 （ R′） 不同, 会
引起吸收峰发生位移 。
其结构中 -2 价的硫, 易氧化, 氧
化产物砜及亚砜有四个吸收峰 。
吩噻嗪类药物随取代基 R 和 R′的
不同, 产生不同的红外吸收光谱 。
2,易被氧化呈色
3,易与金属离子络合呈色
4,碱性
二、鉴别试验
（ 一 ） UV和 IR
奋乃静 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 2） 取本品, 加无水乙醇制
成每 1ml 中含 7?g 的 溶液, 照分光光
度法 （ 附录 Ⅳ A） 测定, 在 258nm 的
波长处有最大吸收, 吸收度约为 0.65。
（ 3）本品的红外吸收图谱应与对照
的图谱（光谱集 243 图）一致
（二） 显色反应
1,氧化剂氧化显色
氧化剂 硫酸、硝酸、过氧化氢
奋乃静 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 1） 取本品 5mg,加盐酸与
水各 1ml,加热至 80℃, 加入过氧化
氢溶液数滴, 即显深红色；放臵后,
红色渐褪去 。
盐酸异丙嗪 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 1）取本品约 5mg，加硫酸
5ml 溶解后，溶液显樱桃红色；放臵
后，色渐变深。
（ 2）取本品约 0.1g，加水 3ml 溶解
后，加硝酸 1ml，即生成红色沉淀；
加热，沉淀即溶解，溶液由红色转变
为橙黄色。
癸氟奋乃静 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 2）取本品约 5mg，加甲醇
2ml 溶解后，加 0.1% 氯化钯溶液
3ml，即有沉淀生成，并显红色，再
加过量的氯化钯溶液，颜色变深。
2,与钯离子络合显色
（三）分解产物的反应
癸氟奋乃静 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 1）取本品 15 ～ 20mg，加碳
酸钠与碳酸钾各约 0.1g，混匀，在
600℃ 炽灼 15～ 20分钟，放冷，加水
2ml 使溶解，加盐酸溶液（ 1→2）酸
化，滤过，滤液加茜素锆试液 0.5ml，
应显黄色。
溶液由红色变为黄色
茜素
癸氟奋乃静
酸性茜素锆
℃，
]Z r F[
F
2
6
600COKCONa
3232
????? ??
??????? ??
?
??
（四）氯化物的反应
盐酸氯丙嗪 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 3）本品的水溶液显氯化物
的鉴别反应（附录 Ⅲ ）。
三、有关物质检查
1,癸氟奋乃静及其注射液
TLC 参比杂质对照品法
以盐酸氟奋乃静为对照品
2,其他药物
TLC 高低浓度对比法
四、含量测定
（ 一 ） 非水溶液滴定法 原料药
HClO4在冰醋酸溶液中, 具强氧化
性, 可氧化吩噻嗪类药物产生红色的
氧化物, 干扰指示剂终点的观察 。 排
除方法：
（ 1） 改用中性溶剂
（ 2） 加抗坏血酸
（ 3） 电位法指示终点
（ 二 ） 紫外分光光度法
1,直接分光光度法
盐酸异丙嗪,片剂测定波长为
249nm（ 为 910）；注射液为了
消除抗氧剂维生素 C（ ?max 243nm）对
测定的干扰，测定波长改为 299nm
（ 为 108）。
1%
1cmE
1%
1cmE
同理,盐酸氯丙嗪 片剂测定波长
为 254nm（ 为 915）；注射液测定
波长改为 306nm（ 为 115） 。
1%
1cmE
1%
1cmE
2,萃取后分光光度法
盐酸氯丙嗪注射液
计算。为以
，测定盐酸氯丙嗪
乙醚层
氯丙嗪盐酸氯丙嗪
盐酸萃取乙醚提取
氨水碱化
915 E
1254
1%
1 c m
m a x
Anm?
??? ????? ??
??? ??
?
3,二阶导数分光光度法
盐酸氯丙嗪注射液
抗氧剂维生素 C的二阶导数光谱近
似为接近基线的一条直线，不干扰盐
酸氯丙嗪的测定
因此盐酸氯丙嗪可从其二阶导数
光谱量取峰 266nm～ 谷 254nm距离，标准
曲线法定量
4,萃取 — 双波长分光光度法
（ 1） 原理
在待测组分 （ a） 的最大吸收波长
（ 测定波长, ?1） 处测定待测组分和干
扰组分 （ b） 吸收度的总和；另选一适
当波长 （ 参比波长, ?2） 测定吸收度,
并使干扰组分在测定波长和参比波长处
的吸收度相等, 即, 而待测组
分在这两个波长处吸收度的差值足够大 。
bb AA
21 ??
?
（ 2）定量依据 样品在二波长下吸收度
差值（ ?A）：
a
bb
a
aa
babababa
CA
AA
lCAA
AAAAAAA
??
?
????
???????
??
)(
)()(
21
2121
221121
??
????
??????
??
即，吸收度差值（ ?A）仅与待测组分
的浓度有关，而与干扰组分无关，干
扰组分的干扰被消除。
（ 3） 必要条件
① 干扰组分在两个波长处吸收度
相等
② 待测组分在两个波长处吸收度
相差足够大
（ 4） 应用
① 萃取 除去抗氧剂的干扰
氧化产物盐酸盐盐酸氯丙嗪
乙醚层
氧化产物氯丙嗪
盐酸氯丙嗪注射液
盐酸萃取
乙醚提取
浓氨碱化
?
??? ??
??? ???
??? ??
② 双波长分光光度法测定
排除氧化产物的干扰
测定波长 254nm
参比波长 277nm
对照法定量
（三） 铈量法
红色消褪红色 ?????? ??
?
?????? ??
?
?? ??
?
e2,)C e ( S O
e,)C e ( S O
s o l
H
S
24
24
自身指示终点或电位法、永停
法指示终点
优点：
硫酸铈作滴定剂具有高的氧化
电位，且为一价还原；不存在对环
取代基的副反应，专属性高。
本法既可用于原料，亦可用于
片剂的测定
（ 四 ） 比色法
1,钯离子比色法
，对照法定量处测定在
～
红色络合物吩噻嗪类药物
A
nm500
Pd
m a x
m a x
0, 1p H 22
?
?
??? ???
??
反应在 pH2〒 0.1 的缓冲液中进行
优点：
钯离子比色法可选择性地用于未
被氧化的吩噻嗪类药物的测定
2,铁盐比色法
95,131,盐酸氯丙嗪的含量测定方法
有
A,中和法
B,非水滴定法
C,紫外法
D,旋光法
E,铈量法
99x,87,中国药典 （ 1995年版 ） 对盐
酸异丙嗪注射液的含量测定, 选用
299nm波长处测定, 其原因是
A,299nm处是它的最大吸收波长
B,为了排除其氧化产物的干扰
C,为了排除抗氧剂的干扰
D,在 299nm处, 它的吸 收系数最大
E,在其他波长处，因其无明显吸收
99x,78,有氧化产物存在时, 吩噻嗪
类药物的鉴别或含量测定方法为
A,非水溶液滴定法
B,紫外分光光度法
C,荧光分光光度法
D,钯离子比色法
E,pH指示剂吸收度比值法
例 1,中国药典 (2000年版 )中地西泮原
料药中 2-甲氨基 -5-氯二苯酮的检查法
为
A,TLC
B,HPLC
C,GC
D,沉淀法
E,显色法
例 2,检查盐酸氯丙嗪中, 有关物质,
时, 采用的对照溶液为
A,杂质的标准溶液
B,标准, 有关物质, 溶液
C,供试品溶液
D,供试液的稀释溶液
E,对照溶液
例 3,某药物于酸性溶液中, 加硫酸铈试
液则产生红色, 继续滴加硫酸铈试液,
红色由浅变深, 继由深又变浅直至红色
消失, 该药物应为
A,雌二醇
B,氯丙嗪
C,诺氟沙星
D,硫酸镁
E,苯巴比妥钠
例 4,吩噻嗪类药物与钯离子反应，需
在以下哪种酸性条件下进行
A,pH4
B,pH3～ 3.5
C,pH2± 0.1
D,pH1
E,pH5
第三节 苯并二氮杂卓
类药物的分析
1
2
3
4
5
6
7
+
环庚三烯 草卓
N
N
1
2
3
45
6
7
1,4-二氮杂卓 N
N
1
2
3
45
6
7
1,4-苯并二氮杂卓
8
9
N
N
N
C H
3
O
C l
氯氮卓
H
N
N
C l
H
3
C
O
地西泮
N
N
O
2
N
OH
硝西泮
N
N
O
2
N
O
C l
H
氯硝西泮
奥沙西泮
H
N
N
O
C l
O H
N
N
O
C l
O H
F
C H
2
C H
2
N ( C H
2
C H
3
)
2
2 H C l
盐酸氟西泮
N
N
N
N
C l
艾司唑仑
N
N
N
N
C l
H
3
C
阿普唑仑
一、结构与性质
1,苯并二氮杂卓母核 弱碱性, UV
2,结构中的环一般比较稳定，但在酸
性溶液中可水解，形成相应的二苯甲酮
衍生物。
甘氨酸地西泮, ??? ?? ? OHH 2
（芳伯氨基）
二苯甲酮氯氨基氯氮卓,
52OHH 2 ??????? ??
?
N H
2
C l C O
H
+
N
N
C l
O
N H C H
3
?????? ??? XXC 氧瓶燃烧法破坏
3,含卤素
二、鉴别试验
（ 一 ） 化学反应
1,沉淀反应
??? ??? 橙红色氯氮卓、地西泮 HC l4K B i I
氯氮卓 ChP（ 2000）
【 鉴别 】 （ 2）取本品约 10mg，加盐
酸溶液（ 9→1000） 10ml 溶解后，加
碘化铋钾试液 1 滴，即生成橙红色沉
淀。
阿普唑仑 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 1）取本品约 5mg，加盐酸
溶液（ 9→1000） 2ml 溶解后，分为
两份：一份加硅钨酸试液 1 滴，即生
成白色沉淀；另一份加碘化铋钾试液
1 滴，即生成橙红色沉淀。
??? ??? 白色硅钨酸阿普唑仑 H C l
2,水解后重氮化 — 偶合反应
氯氮卓、艾司唑仑、奥沙西泮
氯氮卓 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 1）取本品约 10mg，加盐酸
溶液（ 1→2） 15ml，缓缓煮沸 15 分
钟，放冷，溶液显芳香第一胺类的鉴
别反应（附录 Ⅲ ）。
3,水解后呈茚三酮反应 地西泮
4,硫酸 — 荧光反应
地西泮 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 1）取本品约 10mg，加硫酸
3ml，振摇使溶解，在紫外灯
（ 365nm）下检视，显黄绿色荧光。
氯氮卓 —— 黄色
艾司唑仑 —— 亮绿色
硝西泮 —— 淡蓝色
5,分解产物的反应
地西泮 ChP（ 2000）
[鉴别 ] （ 2）取本品 20mg，用氧瓶燃
烧法（附录 Ⅶ C）进行有机破坏，以
5% 氢氧化钠溶液 5ml 为吸收液，燃
烧完全后，用稀硝酸酸化，并缓缓煮
沸 2 分钟，溶液显氯化物的鉴别反应
（附录 Ⅲ ）。
（二） UV 和 IR
（三） TLC
三、特殊杂质的检查
（ 一 ） 有关物质的检查
1,地西泮中有关物质的检查
地西泮的原料及片剂
TLC 高低浓度对比法
2,氯氮卓中有关物质的检查
USP（ 24） TLC
氧化物, 氨基物 杂质对照品法
有关物质 参比杂质对照品法
BP（ 1998） TLC 高低浓度对比法
3,氯氮卓中有关物质的反相高效液相
色谱法
（ 二 ） 降解产物的检查
地西泮注射液
分解产生 2-甲氨基 -5-氯二苯甲酮
HPLC 主成分自身对照法
1,峰面积归一化法
取一定量供试品溶液进样，测定各
杂质及药物的峰面积，计算各杂质峰面
积及其总和占总峰面积的百分率，不能
超过限量。注意溶剂峰不应计算在总峰
面积内。
优点：不需杂质对照品，简便易
行。
缺点：检测波长处, 各杂质和药
物的吸收强度可能有差异, 控制杂质
峰面积百分率不一定就是杂质限量,
准确度差 。
2,主成分自身对照法
杂质峰面积与主成分峰面积相差悬
殊时应用。
方法
对照溶液一定量供试品溶液
供试品溶液
稀释
溶剂溶解
?? ??
??? ??S
分别进样，测定供试品溶液中各
杂质峰面积及其总和，与对照溶液主
成分峰面积比较，控制供试品中杂质
的量。
缺点：检测波长处，各杂质和药
物的吸收强度可能有差异，准确度差
优点：不需杂质对照品，可同时
控制各个杂质及其总量限度
3,内标法测定供试品中杂质的总量限
度
方法
供试品 →供试品溶液 1 图 1
供试品 +内标 →供试品溶液 2 图 2
判断
若图 1无与内标峰保留时间相同的
杂质峰, 则图 2中各杂质峰面积之和应
小于内标物质峰面积 （ 溶剂峰不计在
内 ）
若图 1有与内标峰保留时间相同的
杂质峰，则将图 2上的内标峰面积减去
图 1中此杂质峰面积,得内标物质峰的
校正面积 ；图 2中各杂质峰面积加上图 1
此杂质峰面积，得各杂质峰的校正总面
积；各杂质峰校正总面积应小于内标物
质峰的校正面积。
4,内标法加校正因子测定供试品中
某个杂质的含量
准确测定杂质含量
方法
内标 +杂质对照品 →溶液，进样，
测定，计算校正因子
rr
ss
mA
mA
f ?）校正因子（
供试品 +内标 →供试品溶液, 进
样, 测定杂质和内标峰面积或峰高,
计算杂质量
ss
x
x
mA
A
fm ??）杂质量（
5,外标法测定供试品中某个杂质的
量
供试品 →供试品溶液
杂质对照品 →对照品溶液进样, 测
定, 计算杂质的含量
r
x
x
A
A
fm ??）杂质量（
缺点：不易准确控制进样量，宜
用定量环进样
四、含量测定
（ 一 ） 非水溶液滴定法 原料
（ 二 ） 紫外分光光度法
（ 三 ） 比色法
1,地西泮经水解后氯仿提取液的比
色测定法
量对照法或吸收曲线法定
，处测定黄色溶液，
二苯甲酮氯甲氨基地西泮
氯仿
Anm 410
52
m a x
H
??? ??
????? ??
?
2,地西泮水解产物甘氨酸与茚三酮
反应后比色测定法
A nm5 7 0m a x
H
处测定紫色，
茚三酮甘氨酸地西泮
??
?? ??
?
3,氯氮卓经酸水解后的重氮化 — 偶
合比色测定法
（ 四 ） HPLC
1,地西泮注射液的 HPLC 法
内标法加校正因子定量
2,三唑仑的 HPLC 法
内标法加校正因子定量
97,[116— 120]
A,氯氮卓 （ 利眠宁 ） B,地西泮 （ 安定 ）
C,两者均能 D,两者均不能
97,116,分子母核属于苯并二氮杂卓
97,117,用氧瓶燃烧法破坏后, 显氯化物
反应
97,118,水解后呈芳伯胺反应
97,119,与三氯化锑反应生成紫红色
97,120．溶于硫酸后，在紫外光下显黄绿
色荧光
(C)
（ C）
（ A）
（ D）
（ B）
99,85,硫酸 — 荧光反应为地西泮的
特征鉴别反应之一 。 地西泮加硫酸溶
解后, 在紫外光下显
A,红色荧光 B,橙色荧光
C,黄绿色荧光 D,淡蓝色荧光
E,紫色荧色
例 1,某药物经酸水解后呈茚三酮反应，
溶液显紫色，该药为
A,氯氮卓
B,地西泮
C,盐酸普鲁卡因
D,阿司匹林
E,尼可刹米
例 2,某药物经酸水解后可用重氮化 —
偶合反应鉴别，此药物是
A,盐酸氯丙嗪
B,氯氮卓
C,地西泮
D,醋酸氢化可的松
E,维生素 C
