第八章 生物碱类药物的分析
第一节 概述
一、生物碱（ Alkaloids）
生物碱是生物体内含氮有机化合
物的总称
典型药物的结构
小檗碱
O H
-
+
N
O
O
CH
3
O
CH
3
O
p K b = 2,5
麻黄碱
C C CH
3
O H N H CH
3
H H
pK b = 4,4 2
阿托品
N
CH
3
O CO CH
CH
2
O H
p K b = 4,3 5
奎宁
N
CH CH 2
H
N
CH
3
O
C
O H
H
p K b2 = 9,7
p K b1 = 5, 0 7
士的宁
N
O
N
O
p K b 2 =1 1,7
p K b 1 =6,0
N
CH
3
O
CH
3
O
CH
2
O CH
3
O CH
3
罂粟碱
p K b = 7, 8 7
咖啡因
N
N
N
N
CH
3
CH
3
CH
3
O
O
p K b = 1 4, 1 5
吗啡
OH O O H
H
N CH
3
p K a = 9, 8 5
p K b = 6, 1 3
N
N
N
N
CH
3
CH
3
O
O
茶碱
H
二、生物碱类药物的通性
1,碱性
季铵碱＞脂肪胺, 脂环胺＞芳胺,
N— 芳杂环＞酰胺
小檗碱＞麻黄碱, 阿托品＞罂粟
碱＞咖啡因
吗啡具酸碱两性
2,溶解性
游离生物碱不溶或难溶于水, 能
溶或易溶于有机溶剂, 在稀酸中成盐
而溶解
生物碱盐类易溶于水，不溶于有
机溶剂
3,旋光性
一般多为左旋体有效。
第二节 鉴别试验
一, 特征鉴别反应
（一）双缩脲反应
侧链具有氨基醇结构
水层 兰色
醚层 紫红色
乙醚紫堇色O H -C u S O
4+
盐酸麻黄碱
盐酸伪麻黄碱
（二） Vitali反应 托烷生物碱硫酸阿托品
+ 发烟 H N O 3 ·
黄色
醇制
K O H
深紫色
氢溴酸山莨菪碱
（ 三 ） 绿奎宁反应
硫酸奎宁, 硫酸奎尼丁
紫堇色盐酸吗啡 + 甲醛硫酸
（四） Marquis反应 吗啡生物碱
棕绿色兰色
紫色盐酸吗啡 + 钼硫酸
（五） Frohde反应 吗啡生物碱
（六） 官能团反应 吲哚生物碱
1,利血平 + 新制香草醛 → 玫瑰红色
红色绿色
二甲氨基苯甲醛对利血平
冰醋酸冰醋酸、硫酸 ?? ?????? ??
??
2,
（七）紫脲酸胺反应 黄嘌啉类生物碱
K C l O 3+H C l
紫色消失
K O H
氨气
蒸干
紫色
+
咖啡因
茶碱
（八）还原反应
吗啡与磷酸可待因的区分反应
普鲁士兰F e
3+
K 2 [F e (CN ) 6 ]
吗啡 + K 3 [F e (CN ) 6 ]
二、一般鉴别反应
（ 一 ） 熔点测定法
（二）沉淀反应
↓H
+生物碱 + 生物碱沉淀试剂
常用的生物碱沉淀试剂为：
1,重金属盐类，如 K2HgI4,KBiI4、
I2—KI、二氯化汞等；
2,大分子酸类，如磷钼酸、硅钨
酸等。
（ 三 ） 显色反应
常用的显色试剂：浓硫酸, 浓硝
酸, 钼硫酸, 钒硫酸, 硒硫酸, 甲醛
硫酸等
（四） UV
（五） IR
（六）色谱法
1,HPLC
2,TLC
硅胶为吸附剂：游离生物碱能顺
利迁移, 生物碱盐类吸附太牢, 造成
严重拖尾 。
解决方法：
（ 1）在展开剂中加少量的碱性试剂，
如氨、二乙胺、有机脂烃胺类；
（ 2）硅胶板用碱处理
第三节 特殊杂质检查
? 特殊杂质检查主要根据药物与杂
质的理化性质差异来进行 。
利用药物和杂质在颜色、溶解行
为、旋光性质、对光吸收选择性等物
理性质上的差异，检查杂质是否符合
限量规定
一、物理法
? 利用药物与杂质在挥发性、臭
味等方面的差异进行检查。
（一）臭味及挥发性的差异
ChP（ 2000） 麻醉乙醚中异臭的检查
取本品 10ml，置瓷蒸发皿中，使自
然挥发，挥散完毕后，不得有异臭。
（二） 颜色的差异
ChP（ 2000） 盐酸阿扑吗啡
[检查 ] 分解产物 取本品 0.10g，加
无水氧化物的乙醚 5ml，振摇后，乙
醚液只许显极淡的红色。
（三）溶解行为的差异
利用药物与杂质在溶解性方面的差
异进行检查。如葡萄糖中糊精的检查。
（四）旋光性质的差异
ChP（ 2000） 硫酸阿托品
[检查 ] 莨菪碱 取本品，按干燥品计
算，加水制成每 1ml 中含 50mg 的溶
液，依法测定（附录 Ⅵ E），旋光度
不得过 –0.40° 。
（五）对光吸收性质的差异 ——
分光光度法
利用药物与杂质在紫外吸收光
谱方面的差异进行检查 。
1,紫外分光光度法
例 1,中国药典 （ 2000年版 ） 规定肾上腺素中
检查肾上腺素酮的方法为：取本品, 加盐酸
溶液 （ 9→ 2000） 制成每 1ml中含 2.0mg的溶
液, 于 310nm波长处测定, 吸收度不得超过
0.05,已知肾上腺素酮在 310nm波长处的为
453,肾上腺素在该波长处无吸收 。 请计算
肾上腺素酮的限量应为 （ D）
A,0.1％ B,0.5％ C,0.04％
D,0.06% E,0.0002％
%06.0%100
1010.2
1
1001453
0, 0 5
%100
100
%
3
%1
1
??
??
?
??
?
?
?
?
?
?
s
cm
m
V
lE
A
肾上腺酮
2,IR
用于药物中无效或低效晶型的
检查 。 利用药物与杂质有特征峰差
异进行检查 。 如甲苯咪唑中 A晶型的
检查, 无味氯霉素混悬剂中 A晶型的
检查 。
X— 射线粉末衍射法
3,原子吸收分光光度法
主要用于金属元素的检查, 具
有灵敏度高, 选择性好等优点 。 如
肝素钠中钾盐的检查 。
（六）吸附或分配性质的差异 —色谱
法
1,TLC
（ 1） 杂质对照品法
（ 2） 高低浓度对比法
（ 3） 参比杂质对照品法 选用可能存
在的某种物质作为杂质对照品 。
（ 4） 选用质量符合规定的与供试品
相同的药物作为杂质对照品 。
2,纸色谱
用于极性较大药物中杂质的检
查或放射性药物注射液 （ 或溶液 ）
中放射化学杂质的检查 。 如地高辛
中洋地黄毒苷的检查 。
缺点：展开时间长，斑点扩散，
不能用强酸等腐蚀性显色剂
3,HPLC
（ 1）内标法加校正因子测定供试品中
某个杂质的含量
准确测定杂质含量
方法
内标物 +杂质对照品 → 对照溶液，
进样，测定，计算校正因子
RR
ss
CA
CA
f ?）校正因子（
供试品 +内标 → 供试品溶液, 进样,
测定杂质和内标峰面积或峰高, 计算
杂质含量
ss
x
x
CA
A
fC ??）含量（
（ 2） 外标法测定供试品中某个杂质
的含量
供试品 → 供试品溶液
杂质对照品 → 对照品溶液
进样, 测定, 计算杂质的含量
R
x
Rx
A
A
CC ??）含量（
缺点：不易准确控制进样量，宜
用定量环进样
（ 3）加校正因子的主成分自身对照法
方法
待测成分对照品 +杂质对照品 →
溶液, 进样, 记录色谱图, 计算杂
质的校正因子
对照溶液一定量供试品溶液
供试品溶液
稀释
溶剂溶解
?? ??
??? ??S
分别进样，供试品溶液的记录时间除另
有规定外，应为主成分保留时间的若干倍，
测量供试品溶液色谱图上各杂质的峰面积，
分别乘以相应的校正因子后与对照溶液主成
分的峰面积比较，依法计算各杂质含量。
（ 4）不加校正因子的主成分自身对照
法
无杂质对照品，且杂质峰面积与主
成分峰面积相差悬殊时应用。
方法
对照溶液一定量供试品溶液
供试品溶液
稀释
溶剂溶解
?? ??
??? ??S
分别进样，测定供试品溶液中各
杂质峰面积及其总和，与对照溶液主
成分峰面积比较，控制供试品中杂质
的量。
缺点：检测波长处，各杂质和药
物的吸收强度可能有差异，准确度差
优点：不需杂质对照品，可同时
控制各个杂质及其总量限度
（ 5）面积归一化法
取一定量供试品溶液进样，测定各
杂质及药物的峰面积，计算各杂质峰面
积及其总和占总峰面积的百分率，不能
超过限量。注意溶剂峰不应计算在总峰
面积内。
优点：不需杂质对照品，简便易
行。
缺点：检测波长处, 各杂质和药
物的吸收强度可能有差异, 控制杂质
峰面积百分率不一定就是杂质限量,
准确度差 。
4,GC 用于药物中挥发性杂质的
检查。如药物中有机溶剂残留量测定。
检查方法同 HPLC。
二、化学法
利用药物与杂质在化学性质上的
差异进行检查。如阿司匹林中水杨
酸的检查。
98,77．乙醇中检查杂醇油是利用
（ C）
A,颜色的差异
B,旋光的差异
C,臭味及挥发性的差异
D,对光选择吸收的差异
E,溶解行为的差异
例, 药物中特殊杂质的检查方
法有（ ABCDE）
A,沉淀法与颜色法
B,滴定法
C,旋光法
D,分光光度法
E,色谱法
例, HPLC检查药物中杂质的具体方法
有 （ ABCDE）
A,峰面积归一化法
B,主成分自身对照法
C,内标法
D,外标法
E,内标法加校正因
例, 最常用于药物中特殊杂质检查的
方法是 (A)
A,TLC
B,IR
C,UV
D,MS
E,NMR
例, 红外分光光度法在杂质检查中主
要用于 （ A）
A,药物中无效或低效晶型的检查
B,杂质特征峰的确定
C,杂质相关峰的确定
D,杂质官能团的确定
E,药物和杂质的鉴别
一, 非水溶液滴定法 （ 非水碱量法 ）
原料药
（ 一 ） 原理
水溶液中滴定突跃不明显, 在非水
介质中, 碱性增强, 使滴定顺利进行
第四节 含量测定
1,溶剂
酸性溶剂,冰醋酸, 冰醋酸 +醋酐,
醋酐
惰性溶剂,苯, 氯仿, 四氯化碳
能影响溶质的解离情况和能影响
酸碱强度很大的溶剂,硝基甲烷, 丙
酮, 二氧六环
2,滴定剂, 高氯酸的冰醋酸溶液
或高氯酸的二氧六环溶液
3,指示终点的方法
电位法,玻璃 —甘汞电极系统
指示剂法,结晶紫、喹哪啶红等
有机碱及其盐类及有机酸碱金属
盐类
8＜ pKb＜ 10 冰醋酸作溶剂
10＜ pKb＜ 12 冰醋酸 +醋酐
pKb＞ 12 醋酐
（二）适用范围
一般采用半微量法 。 中国药典 （ 2000
年版 ） 的测定方法为：取经适当方法干燥
的供试品适量 〔 约 消耗高氯酸滴定液 （ 0.1
mol/L） 8 ml〕, 加冰醋酸 10～ 30 ml使溶解 。
若供试品为氢卤酸盐, 应再加 5％ 醋酸汞的
冰醋酸溶液 3～ 5 m1,加各药品项下规定的
指示液 1～ 2滴, 用高氯酸滴定液 （ 0.1mol/L）
滴定, 并将滴定结果用空白试验校正 。
（三）一般测定方法
取本品约 0.15g,精密称定, 加醋
酐 —冰醋酸 （ 5∶ 1） 的混合液 25ml,微
热使溶解, 放冷, 加结晶紫指示液 1滴,
用高氯酸滴定液 （ 0.1mo1/L） 滴定, 至溶
液显 黄色, 并将滴定的结果用空白试验校
正 。 每 1ml 高氯酸滴定液 （ 0.1mol/L） 相
当于 19.42mg 的 C8H10N4O2。
咖啡因 ChP(2000)
（四）生物碱盐类的滴定
HAC l OBHHC l OABH 44 ??? ????
置换滴定：
无机酸在冰醋酸中的酸性次序为：
高氯酸＞氢溴酸＞盐酸＞硫酸＞
＞硝酸＞其它弱酸 （ 磷酸, 有机酸 ）
?
4H S O
由于有机酸系弱酸, 被高氯酸置
换出的 HA,对滴定无干扰, 能准确滴
定 。
1,有机酸盐的测定
取本品约 60mg,精密称定, 加冰醋酸
20ml 溶解后, 加结晶紫指示液 1滴, 用高
氯酸滴定液 （ 0.05mo1/L） 滴定, 至溶液显
蓝绿色, 并将滴定的结果用空白试验校正 。
每 1ml 高氯酸滴定液 （ 0.05mol/L） 相当于
22.07mg 的 C19H23N3O2·C4H4O4。
马来酸麦角新碱 ChP(2000)
若被置换出的有机酸不溶于冰醋
酸, 应先将样品碱化, 有机溶剂提取
游离碱后, 再非水碱量法测定 。
一般均预先在溶液中加入
Hg(Ac)2 的冰醋酸溶液，以消除氢卤
酸对滴定的干扰。
22 H gXAc2B HH g( A c )X2B H ????? ????
理论量 1～ 3倍
2,氢卤酸盐的测定
取本品约 0.15g,精密称定, 加冰醋酸
10ml,加热溶解后, 加 醋酸汞试液
4ml 与结晶紫指示液 1滴, 用高氯酸滴
定液 （ 0.1mo1/L） 滴定至溶液显 翠绿
色, 并将滴定的结果用空白试验校正 。
每 1ml 高氯酸滴定液 （ 0.1mol/L） 相
当于 20.17mg 的 C10H15NO·HCl。
盐酸麻黄碱 ChP(2000)
生物碱的硫酸盐, 在冰醋酸介质中只
能被滴定至生物碱的硫酸氢盐 。
··· 2 - -- +BH + C l O 4 B H + H S O 4+( B H + ) 2 S O 4 H Cl O 4
（ 1） 直接滴定
3,硫酸盐的测定
A,硫酸阿托品
HClO4直接滴定时, 反应摩尔比为 1∶ 1 H 2 OH 2 S O 4
2
N
CH
3
O CO CH
CH
2
O H
B,硫酸奎宁
HClO4直接滴定时，反应摩尔比为 1∶ 3
N
CH
3
O
C
O H
H
N
CH CH 2
H
2
H
2
S O
4
H
2
O
（ 2） 加入高氯酸钡消除硫酸的干扰后
滴定
硫酸奎宁 反应摩尔比为 1∶ 2
硫酸阿托品 一元碱不能滴定
因 HNO3具有氧化性, 可使指示剂
变色, 一般电位法指示终点 。 如硝酸
士的宁, 硝酸毛果芸香碱
4,硝酸盐的测定
取本品约 0.3g,精密称定, 加冰
醋酸 20ml,振摇使溶解, 照电位滴定
法 （ 附录 Ⅶ A）, 用高氯酸滴定液
（ 0.1mo1/L） 滴定, 并将滴定的结果
用空白试验校正 。 每 1ml 高氯酸滴定
液 （ 0.1mol/L ） 相当于 39.74mg 的
C21H22N2O2·HNO3。
硝酸士的宁 ChP(2000)
按常法测定,如磷酸氯喹、磷酸
可待因
5,磷酸盐的测定
简便, 快速, 准确, 精密, 取样
量小, 测定的是生理活性部分 。
如有酸性或碱性成分存在时会影
响，选择性差，不能直接用于制剂分
析，只能用于原料药测定。
（五）特点
（ 1） 一般是取一定量样品在水浴上蒸干,
在一定温度下干燥后按原料药物项下的方
法进行 。 ——主药对热稳定
（六）制剂分析
1,注射剂
精密量取本品 10ml,置水浴上蒸干,
在 105℃ 干燥 1h,放冷, 加冰醋酸
10ml,与 醋酸汞试液 6ml 使溶解, 加结
晶紫指示液 1滴, 用高氯酸滴定液
（ 0.1mo1/L） 滴定, 至溶液显 绿色, 并
将滴定的结果用空白试验校正 。 每 1ml
高 氯 酸 滴 定 液 （ 0.1mol/L ） 相 当 于
37.58mg 的 C20H21NO4·HCl。
盐酸罂粟碱注射液 ChP（ 2000）
（ 2） 碱化, 经有机溶剂反复提取完全,
蒸去溶剂后, 再按原料药方法进行 。 ——
主药对热不稳定
二盐酸奎宁注射液 ChP（ 2000）
精密量取本品适量 （ 约相当于二盐酸
奎宁 0.15g）, 置分液漏斗中, 加水使成
20ml,加氨试液使成碱性, 用氯仿分次振
摇提取, 第一次 25ml,以后每次各 10ml，
至奎宁提尽为止, 每次得到的氯仿液均用
同一份水洗涤 2 次, 每次 5 ml,洗液用氯
仿 10ml 振摇提取, 合并氯仿液, 置水浴
上蒸去氯仿, 加无水乙醇 2ml再蒸干, 在
105℃ 干燥 1h,放冷, 加醋酐 5ml 与冰醋
酸 10ml,溶解后, 加结晶紫指示液 1滴,
用高氯酸滴定液 （ 0.1mo1/L） 滴定, 至溶
液显 蓝色, 并将滴定的结果用空白试验校
正 。 每 1ml 高氯酸滴定液 （ 0.1mol/L） 相
当于 19.87mg 的 C20H24N2O2·2HCl。
片剂中许多赋形剂如硬脂酸盐, 苯
甲酸盐, 羧甲基纤维素钠等都消耗高
氯酸, 因此片剂的测定一般需提取分
离并经干燥后才可进行 。
2,片剂,
如硫酸奎宁片, 硫酸奎尼丁片
碱化、有机溶剂提取后,HClO4滴
定时，反应摩尔比为 1∶ 4
硫酸奎宁片 ChP（ 2000）
取本品 10 片, 除去糖衣后, 精密称
定, 研细, 精密称取适量 （ 约相当于硫酸
奎宁 0.3g）, 置分液漏斗中, 加氯化钠
0.5g 与 0.1mol/L 氢氧化钠溶液 10ml,混
匀, 精密加氯仿 50ml,振摇 10min,静
置, 分取氯仿液, 用干燥滤纸滤过 。
精密量取续滤液 25ml,加醋酐 5ml
与二甲基黄指示液 2滴, 用高氯酸
滴定液 （ 0.1mo1/L） 滴定, 至溶液
显玫瑰红色, 并将滴定的结果用空
白试验校正 。 每 1ml 高氯酸滴定液
（ 0.1 mol/L ） 相 当于 19.57mg 的
（ C20H24N2O2） 2·H2SO4·2H2O。
二、提取中和法（ 提取酸碱滴定法、
提取容量法）
（一）原理与方法
生物碱盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂
游离生物碱不溶于水，易溶于有机溶剂依据性质
中和法测定 有机层（ B ）
水层
有机溶剂
O H
-
s ol
过滤s ol ( B H
+
)
稀酸
或H
2 O
游离生物碱或
生物碱盐类
1,碱化
2,有机溶剂提取
3,中和法测定
终点
酸滴定液滴定
）（
中性乙醇
）残渣（
，蒸干
）有机层（
??????? ??????? ??
???? ??
?
Bs o l
BB
（ 1） 直接滴定法
用于碱性较强的生物碱
（ 2） 剩余滴定法
用于碱性较弱的生物碱
终点
碱滴定液滴定
）（
定量过量的酸标准溶液
）残渣（
，蒸干
）有机层（
??????? ??
?
?
?
?????????? ??
???? ??
?
HBHs o l
BB
（ 3） 酸滴定液返提后剩余滴定法
用于对热不稳定的生物碱
终点
碱滴定液滴定
水层
）水层（
有机层（弃去）
定量过量的酸滴定液
）有机层（
??????? ???
?
?
? ?
????????? ??
??
HBH
B
1,碱化试剂 最常用氨水
2,提取溶剂
（ 1） 提取溶剂选择的原则
（ 2） 常用的提取溶剂 最常用氯仿
（二）测定条件的选择
（ 3） 提取溶剂的用量及提取次数
通常应提取 4次, 第一次用量至
少应为水液体积的一半, 以后几次应
各为第一次的一半
3,提取终点的确定 用合适的沉淀反
应确定
4,指示剂的选择
5,乳化的预防和消除
仪器简单, 试剂常用, 但操作繁
琐, 费时, 精密度差, 准确度差, 主
要用于制剂分析
（三）特点
阿片粉中吗啡的含量测定 ——石灰法
ChP（ 1995）
?
? 结晶：吗啡
乙醚层：那可汀
氨水、乙醚
水层（吗啡、那可汀）氢氧化钙
阿片粉
???? ??
??? ??
?
固相萃取 —离子对 -反相高效液相色谱
法 ChP（ 2000）
（四）应用
（五）提取重量法
有机层（ B ）
水层
有机溶剂
O H -
s ol
过滤s ol ( B H
+
)
稀酸
或H
2 O
游离生物碱或
生物碱盐类
Bmmm
mB
mB
??
?
? ?? ?
12
2
1
)(
）量（容器，干燥至恒重，称）残渣（
）中器（置已知重量且恒重的容有机溶剂提取液
（ 一 ） 基本原理
在适当的 pH介质中
有机相
·( B H
+
I n
-
)
水相
·( B H
+
I n
-
)
+H I n H
+
I n
-
+B H
+
B H
+
三、酸性染料比色法 制剂
1,水相中反应
离子对 BH+·In-被有机溶剂提取,
使有机相呈色 。 剩余的酸性染料留
于水相
3,比色法测定
2,有机溶剂提取
（ 1） 定量分离出有机提取液, 脱水后,
测定 A,求出有机碱含量
（ 2） 定量分离出有机提取液, 脱水
后, 碱化, 则水相呈色, 测定水相中
In-的吸收度, 间接求出有机碱的含量
BH+In- + OH-→B + H2O + In-
（ 3） 定量分离出有机提取液, 脱水
后, 酸化, 则水相呈色, 测定水相中
HIn的吸收度, 间接求出有机碱的含
量
BH+In- + H+ →BH ++ HIn
1,水相的最适 pH值 如果水相 pH值
过小, 酸性染料几乎仍以分子状态存
在；如果水相 pH值过大, 则生物碱
几乎全部以游离碱的形式存在
2,有机溶剂的选择 CHCl3,CH2Cl2
（二）影响定量分析的因素
3,酸性染料的选择 常用溴甲酚绿,
溴麝香草酚蓝 （ BTB） 等
5,有色杂质的排除
4,水分的影响 严防水分的混入
有机层可加入无水硫酸钠等脱水
剂或经干燥滤纸滤过
6,共存物的影响
3,准确度差, 不能用于原料药的
测定, 只能用于制剂分析
（三）特点
1,选择性高（选用适当 pH缓冲液
可消除干扰）
2,灵敏度高、供试品用量少
硫酸阿托品注射液 ChP（ 2000）
%1 0 0% ?
??
?
标示
对
供
对
标示量
c
n
A
A
c
注射液 对照法
（四）应用
%100% ?
?
???
?
标示量
平均片重
标示量
对
供
对
s
m
Vn
A
A
c
片剂 对照法
五、色谱法
（一）高效液相色谱法
1．反相 HPLC 分析生物碱类和有
机含氮药物的特点
色谱峰拖尾，保留时间过长，甚
至长期地保留在色谱柱上。
四, 紫外 —可见分光光度法
（ 1） 加扫尾剂法 分离依据物质的极
性及溶解性 。 在流动相中加入扫尾剂,
最常用的扫尾剂是三乙胺
（ 2） 用硅胶作固定相法 离子交换机
理：根据 pKa大小进行分离
2．解决方法
流动相要选择适宜的 pH 值, 竞争
离子的种类和浓度, 同时要加入有机
改性剂
适合于药物与体内代谢物的分析
（ 3）用金刚烷基硅烷化硅胶作固定相
法 分离依据物质溶解性
不论是游离碱还是其盐类, 均是
以游离碱出峰
衍生物生物碱
游离生物碱生物碱盐
衍生化
碱化、有机溶剂提取
?? ??
?????? ??
（二）气相色谱法
97,83,咖啡因和茶碱的特征鉴别
反应是
A,双缩脲反应
B,Vitali反应
C,Marquis反应
D,紫脲酸铵反应
E,绿奎宁反应
98,139,盐酸吗啡中应检查的特殊
杂质为
A,吗啡
B,阿朴吗啡
C,罂粟碱
D,莨菪碱
E,其它生物碱
96,136,用非水溶液滴定法测定盐
酸吗啡含量时, 应使用的试剂是
A,5％ 醋酸汞冰醋酸液
B,盐酸
C,冰醋酸
D,二甲基甲酰胺
E,高氯酸
97,130,非水溶液滴定法测定硫酸奎
宁含量的反应条件为
A,冰醋酸一醋酐为溶剂
B,高氯酸滴定液 （ 0.1mol/L） 滴定
C,1mol的高氯酸与 ?mol的硫酸奎
宁反应
D,仅用电位法指示终点
E．溴酚蓝为指示剂
99,78,非水溶液滴定法测定硫酸奎宁
原料的含量时, 可以用高氯酸直接滴
定冰醋酸介质中的供试品, 1摩尔硫酸
奎宁需要消耗高氯酸的摩尔数为
A,1 B,2
C,3
D,4 E,5
99x,[116— 120]滴定反应中
A,被测物与 HClO4的摩尔比为 1∶ 1
B,被测物与 HClO4的摩尔比为 1∶ 3
C,两者均是
D,两者均不是
99x,116,硫酸奎宁片经氯仿提取后
用 HClO4滴定 （ D）
99x,117,硫酸阿托品在冰醋酸中用
HClO4滴定
99x,118,硫酸奎宁原料药用 HClO4滴
定
99x,119,磷酸可待因用 HClO4滴定
99x,120,硝酸士的宁用 HClO4滴定
（ A）
（ B）
（ A）
(A)
96,129,生物碱类药物制剂的测定方法
A,直接用有机溶剂提取后, 用
H2SO4标准液滴定
B,碱化后用有机溶剂提取, 再用
NaOH水溶液滴定
C,碱化后用有机溶剂提取, 蒸去
有机溶剂后用中性醇溶液, 再用 H2SO4
标准液滴定
D,碱化后用有机溶剂提取, 蒸去
有机溶剂, 再加入定量的 H2SO4,再用
NaOH标准液回滴
E,酸化后，用有机溶剂提取，采
用适宜方法滴定
96,77,酸件染料比色法中, 水相的
pH值过小, 则
A,能形成离子对
B,有机溶剂提取能完全
C,酸性染料以阴离子状态存在
D,生物碱几乎全部以分子状态存在
E,酸性染料以分子状态存在
95,[111— 115]可选择的药物：
A,阿托品 B,吗啡
C,两者均可 D,两者均不可
95,111,具有酯结构
95,112,为两性化合物
95,113,显较强碱性
95,114,用提取容量法测定
95,115,用碱性染料比色法
（ A）
（ B）
（ A）
（ C）
（ D）
例 [1～ 5]
A,双缩脲反应 B,Marquis反应
C,两者皆是 D,两者皆不是
1,盐酸麻黄碱
2,某些生物碱类药物
3,盐酸吗啡
4,咖啡因
5,硫酸奎尼丁
（ A）
（ C）
（ B）
（ D）
（ D）
例 6,生物碱类药物的一般鉴别试验包
括
A,熔点测定
B,显色反应
C,沉淀反应
D,光谱法 （ 紫外, 红外 ）
E,薄层色谱法
例 7,能够发生 Vitali反应的药物是
A,盐酸吗啡
B,硫酸奎宁
C,磷酸可待因
D,盐酸麻黄碱
E,硫酸阿托品
例 8,用非水溶液滴定法测定二盐酸奎
宁时, 二盐酸奎宁和 HClO4的摩尔比
是
A,1∶ 1
B,1∶ 2
C,1∶ 3
D,1∶ 4
E,1∶ 1.5
例 9,检查硫酸阿托品中莨菪碱时, 应
采用
A,色谱法
B,红外分光法
C,旋光度法
D,显色法
E,直接检查法
例 10,酸性染料比色法测定生物碱类药
物, 有机溶剂萃取测定的有色物是
A,离子对和指示剂的混合物
B,生物碱盐
C,指示剂
D,离子对
E,游离生物碱
第一节 概述
一、生物碱（ Alkaloids）
生物碱是生物体内含氮有机化合
物的总称
典型药物的结构
小檗碱
O H
-
+
N
O
O
CH
3
O
CH
3
O
p K b = 2,5
麻黄碱
C C CH
3
O H N H CH
3
H H
pK b = 4,4 2
阿托品
N
CH
3
O CO CH
CH
2
O H
p K b = 4,3 5
奎宁
N
CH CH 2
H
N
CH
3
O
C
O H
H
p K b2 = 9,7
p K b1 = 5, 0 7
士的宁
N
O
N
O
p K b 2 =1 1,7
p K b 1 =6,0
N
CH
3
O
CH
3
O
CH
2
O CH
3
O CH
3
罂粟碱
p K b = 7, 8 7
咖啡因
N
N
N
N
CH
3
CH
3
CH
3
O
O
p K b = 1 4, 1 5
吗啡
OH O O H
H
N CH
3
p K a = 9, 8 5
p K b = 6, 1 3
N
N
N
N
CH
3
CH
3
O
O
茶碱
H
二、生物碱类药物的通性
1,碱性
季铵碱＞脂肪胺, 脂环胺＞芳胺,
N— 芳杂环＞酰胺
小檗碱＞麻黄碱, 阿托品＞罂粟
碱＞咖啡因
吗啡具酸碱两性
2,溶解性
游离生物碱不溶或难溶于水, 能
溶或易溶于有机溶剂, 在稀酸中成盐
而溶解
生物碱盐类易溶于水，不溶于有
机溶剂
3,旋光性
一般多为左旋体有效。
第二节 鉴别试验
一, 特征鉴别反应
（一）双缩脲反应
侧链具有氨基醇结构
水层 兰色
醚层 紫红色
乙醚紫堇色O H -C u S O
4+
盐酸麻黄碱
盐酸伪麻黄碱
（二） Vitali反应 托烷生物碱硫酸阿托品
+ 发烟 H N O 3 ·
黄色
醇制
K O H
深紫色
氢溴酸山莨菪碱
（ 三 ） 绿奎宁反应
硫酸奎宁, 硫酸奎尼丁
紫堇色盐酸吗啡 + 甲醛硫酸
（四） Marquis反应 吗啡生物碱
棕绿色兰色
紫色盐酸吗啡 + 钼硫酸
（五） Frohde反应 吗啡生物碱
（六） 官能团反应 吲哚生物碱
1,利血平 + 新制香草醛 → 玫瑰红色
红色绿色
二甲氨基苯甲醛对利血平
冰醋酸冰醋酸、硫酸 ?? ?????? ??
??
2,
（七）紫脲酸胺反应 黄嘌啉类生物碱
K C l O 3+H C l
紫色消失
K O H
氨气
蒸干
紫色
+
咖啡因
茶碱
（八）还原反应
吗啡与磷酸可待因的区分反应
普鲁士兰F e
3+
K 2 [F e (CN ) 6 ]
吗啡 + K 3 [F e (CN ) 6 ]
二、一般鉴别反应
（ 一 ） 熔点测定法
（二）沉淀反应
↓H
+生物碱 + 生物碱沉淀试剂
常用的生物碱沉淀试剂为：
1,重金属盐类，如 K2HgI4,KBiI4、
I2—KI、二氯化汞等；
2,大分子酸类，如磷钼酸、硅钨
酸等。
（ 三 ） 显色反应
常用的显色试剂：浓硫酸, 浓硝
酸, 钼硫酸, 钒硫酸, 硒硫酸, 甲醛
硫酸等
（四） UV
（五） IR
（六）色谱法
1,HPLC
2,TLC
硅胶为吸附剂：游离生物碱能顺
利迁移, 生物碱盐类吸附太牢, 造成
严重拖尾 。
解决方法：
（ 1）在展开剂中加少量的碱性试剂，
如氨、二乙胺、有机脂烃胺类；
（ 2）硅胶板用碱处理
第三节 特殊杂质检查
? 特殊杂质检查主要根据药物与杂
质的理化性质差异来进行 。
利用药物和杂质在颜色、溶解行
为、旋光性质、对光吸收选择性等物
理性质上的差异，检查杂质是否符合
限量规定
一、物理法
? 利用药物与杂质在挥发性、臭
味等方面的差异进行检查。
（一）臭味及挥发性的差异
ChP（ 2000） 麻醉乙醚中异臭的检查
取本品 10ml，置瓷蒸发皿中，使自
然挥发，挥散完毕后，不得有异臭。
（二） 颜色的差异
ChP（ 2000） 盐酸阿扑吗啡
[检查 ] 分解产物 取本品 0.10g，加
无水氧化物的乙醚 5ml，振摇后，乙
醚液只许显极淡的红色。
（三）溶解行为的差异
利用药物与杂质在溶解性方面的差
异进行检查。如葡萄糖中糊精的检查。
（四）旋光性质的差异
ChP（ 2000） 硫酸阿托品
[检查 ] 莨菪碱 取本品，按干燥品计
算，加水制成每 1ml 中含 50mg 的溶
液，依法测定（附录 Ⅵ E），旋光度
不得过 –0.40° 。
（五）对光吸收性质的差异 ——
分光光度法
利用药物与杂质在紫外吸收光
谱方面的差异进行检查 。
1,紫外分光光度法
例 1,中国药典 （ 2000年版 ） 规定肾上腺素中
检查肾上腺素酮的方法为：取本品, 加盐酸
溶液 （ 9→ 2000） 制成每 1ml中含 2.0mg的溶
液, 于 310nm波长处测定, 吸收度不得超过
0.05,已知肾上腺素酮在 310nm波长处的为
453,肾上腺素在该波长处无吸收 。 请计算
肾上腺素酮的限量应为 （ D）
A,0.1％ B,0.5％ C,0.04％
D,0.06% E,0.0002％
%06.0%100
1010.2
1
1001453
0, 0 5
%100
100
%
3
%1
1
??
??
?
??
?
?
?
?
?
?
s
cm
m
V
lE
A
肾上腺酮
2,IR
用于药物中无效或低效晶型的
检查 。 利用药物与杂质有特征峰差
异进行检查 。 如甲苯咪唑中 A晶型的
检查, 无味氯霉素混悬剂中 A晶型的
检查 。
X— 射线粉末衍射法
3,原子吸收分光光度法
主要用于金属元素的检查, 具
有灵敏度高, 选择性好等优点 。 如
肝素钠中钾盐的检查 。
（六）吸附或分配性质的差异 —色谱
法
1,TLC
（ 1） 杂质对照品法
（ 2） 高低浓度对比法
（ 3） 参比杂质对照品法 选用可能存
在的某种物质作为杂质对照品 。
（ 4） 选用质量符合规定的与供试品
相同的药物作为杂质对照品 。
2,纸色谱
用于极性较大药物中杂质的检
查或放射性药物注射液 （ 或溶液 ）
中放射化学杂质的检查 。 如地高辛
中洋地黄毒苷的检查 。
缺点：展开时间长，斑点扩散，
不能用强酸等腐蚀性显色剂
3,HPLC
（ 1）内标法加校正因子测定供试品中
某个杂质的含量
准确测定杂质含量
方法
内标物 +杂质对照品 → 对照溶液，
进样，测定，计算校正因子
RR
ss
CA
CA
f ?）校正因子（
供试品 +内标 → 供试品溶液, 进样,
测定杂质和内标峰面积或峰高, 计算
杂质含量
ss
x
x
CA
A
fC ??）含量（
（ 2） 外标法测定供试品中某个杂质
的含量
供试品 → 供试品溶液
杂质对照品 → 对照品溶液
进样, 测定, 计算杂质的含量
R
x
Rx
A
A
CC ??）含量（
缺点：不易准确控制进样量，宜
用定量环进样
（ 3）加校正因子的主成分自身对照法
方法
待测成分对照品 +杂质对照品 →
溶液, 进样, 记录色谱图, 计算杂
质的校正因子
对照溶液一定量供试品溶液
供试品溶液
稀释
溶剂溶解
?? ??
??? ??S
分别进样，供试品溶液的记录时间除另
有规定外，应为主成分保留时间的若干倍，
测量供试品溶液色谱图上各杂质的峰面积，
分别乘以相应的校正因子后与对照溶液主成
分的峰面积比较，依法计算各杂质含量。
（ 4）不加校正因子的主成分自身对照
法
无杂质对照品，且杂质峰面积与主
成分峰面积相差悬殊时应用。
方法
对照溶液一定量供试品溶液
供试品溶液
稀释
溶剂溶解
?? ??
??? ??S
分别进样，测定供试品溶液中各
杂质峰面积及其总和，与对照溶液主
成分峰面积比较，控制供试品中杂质
的量。
缺点：检测波长处，各杂质和药
物的吸收强度可能有差异，准确度差
优点：不需杂质对照品，可同时
控制各个杂质及其总量限度
（ 5）面积归一化法
取一定量供试品溶液进样，测定各
杂质及药物的峰面积，计算各杂质峰面
积及其总和占总峰面积的百分率，不能
超过限量。注意溶剂峰不应计算在总峰
面积内。
优点：不需杂质对照品，简便易
行。
缺点：检测波长处, 各杂质和药
物的吸收强度可能有差异, 控制杂质
峰面积百分率不一定就是杂质限量,
准确度差 。
4,GC 用于药物中挥发性杂质的
检查。如药物中有机溶剂残留量测定。
检查方法同 HPLC。
二、化学法
利用药物与杂质在化学性质上的
差异进行检查。如阿司匹林中水杨
酸的检查。
98,77．乙醇中检查杂醇油是利用
（ C）
A,颜色的差异
B,旋光的差异
C,臭味及挥发性的差异
D,对光选择吸收的差异
E,溶解行为的差异
例, 药物中特殊杂质的检查方
法有（ ABCDE）
A,沉淀法与颜色法
B,滴定法
C,旋光法
D,分光光度法
E,色谱法
例, HPLC检查药物中杂质的具体方法
有 （ ABCDE）
A,峰面积归一化法
B,主成分自身对照法
C,内标法
D,外标法
E,内标法加校正因
例, 最常用于药物中特殊杂质检查的
方法是 (A)
A,TLC
B,IR
C,UV
D,MS
E,NMR
例, 红外分光光度法在杂质检查中主
要用于 （ A）
A,药物中无效或低效晶型的检查
B,杂质特征峰的确定
C,杂质相关峰的确定
D,杂质官能团的确定
E,药物和杂质的鉴别
一, 非水溶液滴定法 （ 非水碱量法 ）
原料药
（ 一 ） 原理
水溶液中滴定突跃不明显, 在非水
介质中, 碱性增强, 使滴定顺利进行
第四节 含量测定
1,溶剂
酸性溶剂,冰醋酸, 冰醋酸 +醋酐,
醋酐
惰性溶剂,苯, 氯仿, 四氯化碳
能影响溶质的解离情况和能影响
酸碱强度很大的溶剂,硝基甲烷, 丙
酮, 二氧六环
2,滴定剂, 高氯酸的冰醋酸溶液
或高氯酸的二氧六环溶液
3,指示终点的方法
电位法,玻璃 —甘汞电极系统
指示剂法,结晶紫、喹哪啶红等
有机碱及其盐类及有机酸碱金属
盐类
8＜ pKb＜ 10 冰醋酸作溶剂
10＜ pKb＜ 12 冰醋酸 +醋酐
pKb＞ 12 醋酐
（二）适用范围
一般采用半微量法 。 中国药典 （ 2000
年版 ） 的测定方法为：取经适当方法干燥
的供试品适量 〔 约 消耗高氯酸滴定液 （ 0.1
mol/L） 8 ml〕, 加冰醋酸 10～ 30 ml使溶解 。
若供试品为氢卤酸盐, 应再加 5％ 醋酸汞的
冰醋酸溶液 3～ 5 m1,加各药品项下规定的
指示液 1～ 2滴, 用高氯酸滴定液 （ 0.1mol/L）
滴定, 并将滴定结果用空白试验校正 。
（三）一般测定方法
取本品约 0.15g,精密称定, 加醋
酐 —冰醋酸 （ 5∶ 1） 的混合液 25ml,微
热使溶解, 放冷, 加结晶紫指示液 1滴,
用高氯酸滴定液 （ 0.1mo1/L） 滴定, 至溶
液显 黄色, 并将滴定的结果用空白试验校
正 。 每 1ml 高氯酸滴定液 （ 0.1mol/L） 相
当于 19.42mg 的 C8H10N4O2。
咖啡因 ChP(2000)
（四）生物碱盐类的滴定
HAC l OBHHC l OABH 44 ??? ????
置换滴定：
无机酸在冰醋酸中的酸性次序为：
高氯酸＞氢溴酸＞盐酸＞硫酸＞
＞硝酸＞其它弱酸 （ 磷酸, 有机酸 ）
?
4H S O
由于有机酸系弱酸, 被高氯酸置
换出的 HA,对滴定无干扰, 能准确滴
定 。
1,有机酸盐的测定
取本品约 60mg,精密称定, 加冰醋酸
20ml 溶解后, 加结晶紫指示液 1滴, 用高
氯酸滴定液 （ 0.05mo1/L） 滴定, 至溶液显
蓝绿色, 并将滴定的结果用空白试验校正 。
每 1ml 高氯酸滴定液 （ 0.05mol/L） 相当于
22.07mg 的 C19H23N3O2·C4H4O4。
马来酸麦角新碱 ChP(2000)
若被置换出的有机酸不溶于冰醋
酸, 应先将样品碱化, 有机溶剂提取
游离碱后, 再非水碱量法测定 。
一般均预先在溶液中加入
Hg(Ac)2 的冰醋酸溶液，以消除氢卤
酸对滴定的干扰。
22 H gXAc2B HH g( A c )X2B H ????? ????
理论量 1～ 3倍
2,氢卤酸盐的测定
取本品约 0.15g,精密称定, 加冰醋酸
10ml,加热溶解后, 加 醋酸汞试液
4ml 与结晶紫指示液 1滴, 用高氯酸滴
定液 （ 0.1mo1/L） 滴定至溶液显 翠绿
色, 并将滴定的结果用空白试验校正 。
每 1ml 高氯酸滴定液 （ 0.1mol/L） 相
当于 20.17mg 的 C10H15NO·HCl。
盐酸麻黄碱 ChP(2000)
生物碱的硫酸盐, 在冰醋酸介质中只
能被滴定至生物碱的硫酸氢盐 。
··· 2 - -- +BH + C l O 4 B H + H S O 4+( B H + ) 2 S O 4 H Cl O 4
（ 1） 直接滴定
3,硫酸盐的测定
A,硫酸阿托品
HClO4直接滴定时, 反应摩尔比为 1∶ 1 H 2 OH 2 S O 4
2
N
CH
3
O CO CH
CH
2
O H
B,硫酸奎宁
HClO4直接滴定时，反应摩尔比为 1∶ 3
N
CH
3
O
C
O H
H
N
CH CH 2
H
2
H
2
S O
4
H
2
O
（ 2） 加入高氯酸钡消除硫酸的干扰后
滴定
硫酸奎宁 反应摩尔比为 1∶ 2
硫酸阿托品 一元碱不能滴定
因 HNO3具有氧化性, 可使指示剂
变色, 一般电位法指示终点 。 如硝酸
士的宁, 硝酸毛果芸香碱
4,硝酸盐的测定
取本品约 0.3g,精密称定, 加冰
醋酸 20ml,振摇使溶解, 照电位滴定
法 （ 附录 Ⅶ A）, 用高氯酸滴定液
（ 0.1mo1/L） 滴定, 并将滴定的结果
用空白试验校正 。 每 1ml 高氯酸滴定
液 （ 0.1mol/L ） 相当于 39.74mg 的
C21H22N2O2·HNO3。
硝酸士的宁 ChP(2000)
按常法测定,如磷酸氯喹、磷酸
可待因
5,磷酸盐的测定
简便, 快速, 准确, 精密, 取样
量小, 测定的是生理活性部分 。
如有酸性或碱性成分存在时会影
响，选择性差，不能直接用于制剂分
析，只能用于原料药测定。
（五）特点
（ 1） 一般是取一定量样品在水浴上蒸干,
在一定温度下干燥后按原料药物项下的方
法进行 。 ——主药对热稳定
（六）制剂分析
1,注射剂
精密量取本品 10ml,置水浴上蒸干,
在 105℃ 干燥 1h,放冷, 加冰醋酸
10ml,与 醋酸汞试液 6ml 使溶解, 加结
晶紫指示液 1滴, 用高氯酸滴定液
（ 0.1mo1/L） 滴定, 至溶液显 绿色, 并
将滴定的结果用空白试验校正 。 每 1ml
高 氯 酸 滴 定 液 （ 0.1mol/L ） 相 当 于
37.58mg 的 C20H21NO4·HCl。
盐酸罂粟碱注射液 ChP（ 2000）
（ 2） 碱化, 经有机溶剂反复提取完全,
蒸去溶剂后, 再按原料药方法进行 。 ——
主药对热不稳定
二盐酸奎宁注射液 ChP（ 2000）
精密量取本品适量 （ 约相当于二盐酸
奎宁 0.15g）, 置分液漏斗中, 加水使成
20ml,加氨试液使成碱性, 用氯仿分次振
摇提取, 第一次 25ml,以后每次各 10ml，
至奎宁提尽为止, 每次得到的氯仿液均用
同一份水洗涤 2 次, 每次 5 ml,洗液用氯
仿 10ml 振摇提取, 合并氯仿液, 置水浴
上蒸去氯仿, 加无水乙醇 2ml再蒸干, 在
105℃ 干燥 1h,放冷, 加醋酐 5ml 与冰醋
酸 10ml,溶解后, 加结晶紫指示液 1滴,
用高氯酸滴定液 （ 0.1mo1/L） 滴定, 至溶
液显 蓝色, 并将滴定的结果用空白试验校
正 。 每 1ml 高氯酸滴定液 （ 0.1mol/L） 相
当于 19.87mg 的 C20H24N2O2·2HCl。
片剂中许多赋形剂如硬脂酸盐, 苯
甲酸盐, 羧甲基纤维素钠等都消耗高
氯酸, 因此片剂的测定一般需提取分
离并经干燥后才可进行 。
2,片剂,
如硫酸奎宁片, 硫酸奎尼丁片
碱化、有机溶剂提取后,HClO4滴
定时，反应摩尔比为 1∶ 4
硫酸奎宁片 ChP（ 2000）
取本品 10 片, 除去糖衣后, 精密称
定, 研细, 精密称取适量 （ 约相当于硫酸
奎宁 0.3g）, 置分液漏斗中, 加氯化钠
0.5g 与 0.1mol/L 氢氧化钠溶液 10ml,混
匀, 精密加氯仿 50ml,振摇 10min,静
置, 分取氯仿液, 用干燥滤纸滤过 。
精密量取续滤液 25ml,加醋酐 5ml
与二甲基黄指示液 2滴, 用高氯酸
滴定液 （ 0.1mo1/L） 滴定, 至溶液
显玫瑰红色, 并将滴定的结果用空
白试验校正 。 每 1ml 高氯酸滴定液
（ 0.1 mol/L ） 相 当于 19.57mg 的
（ C20H24N2O2） 2·H2SO4·2H2O。
二、提取中和法（ 提取酸碱滴定法、
提取容量法）
（一）原理与方法
生物碱盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂
游离生物碱不溶于水，易溶于有机溶剂依据性质
中和法测定 有机层（ B ）
水层
有机溶剂
O H
-
s ol
过滤s ol ( B H
+
)
稀酸
或H
2 O
游离生物碱或
生物碱盐类
1,碱化
2,有机溶剂提取
3,中和法测定
终点
酸滴定液滴定
）（
中性乙醇
）残渣（
，蒸干
）有机层（
??????? ??????? ??
???? ??
?
Bs o l
BB
（ 1） 直接滴定法
用于碱性较强的生物碱
（ 2） 剩余滴定法
用于碱性较弱的生物碱
终点
碱滴定液滴定
）（
定量过量的酸标准溶液
）残渣（
，蒸干
）有机层（
??????? ??
?
?
?
?????????? ??
???? ??
?
HBHs o l
BB
（ 3） 酸滴定液返提后剩余滴定法
用于对热不稳定的生物碱
终点
碱滴定液滴定
水层
）水层（
有机层（弃去）
定量过量的酸滴定液
）有机层（
??????? ???
?
?
? ?
????????? ??
??
HBH
B
1,碱化试剂 最常用氨水
2,提取溶剂
（ 1） 提取溶剂选择的原则
（ 2） 常用的提取溶剂 最常用氯仿
（二）测定条件的选择
（ 3） 提取溶剂的用量及提取次数
通常应提取 4次, 第一次用量至
少应为水液体积的一半, 以后几次应
各为第一次的一半
3,提取终点的确定 用合适的沉淀反
应确定
4,指示剂的选择
5,乳化的预防和消除
仪器简单, 试剂常用, 但操作繁
琐, 费时, 精密度差, 准确度差, 主
要用于制剂分析
（三）特点
阿片粉中吗啡的含量测定 ——石灰法
ChP（ 1995）
?
? 结晶：吗啡
乙醚层：那可汀
氨水、乙醚
水层（吗啡、那可汀）氢氧化钙
阿片粉
???? ??
??? ??
?
固相萃取 —离子对 -反相高效液相色谱
法 ChP（ 2000）
（四）应用
（五）提取重量法
有机层（ B ）
水层
有机溶剂
O H -
s ol
过滤s ol ( B H
+
)
稀酸
或H
2 O
游离生物碱或
生物碱盐类
Bmmm
mB
mB
??
?
? ?? ?
12
2
1
)(
）量（容器，干燥至恒重，称）残渣（
）中器（置已知重量且恒重的容有机溶剂提取液
（ 一 ） 基本原理
在适当的 pH介质中
有机相
·( B H
+
I n
-
)
水相
·( B H
+
I n
-
)
+H I n H
+
I n
-
+B H
+
B H
+
三、酸性染料比色法 制剂
1,水相中反应
离子对 BH+·In-被有机溶剂提取,
使有机相呈色 。 剩余的酸性染料留
于水相
3,比色法测定
2,有机溶剂提取
（ 1） 定量分离出有机提取液, 脱水后,
测定 A,求出有机碱含量
（ 2） 定量分离出有机提取液, 脱水
后, 碱化, 则水相呈色, 测定水相中
In-的吸收度, 间接求出有机碱的含量
BH+In- + OH-→B + H2O + In-
（ 3） 定量分离出有机提取液, 脱水
后, 酸化, 则水相呈色, 测定水相中
HIn的吸收度, 间接求出有机碱的含
量
BH+In- + H+ →BH ++ HIn
1,水相的最适 pH值 如果水相 pH值
过小, 酸性染料几乎仍以分子状态存
在；如果水相 pH值过大, 则生物碱
几乎全部以游离碱的形式存在
2,有机溶剂的选择 CHCl3,CH2Cl2
（二）影响定量分析的因素
3,酸性染料的选择 常用溴甲酚绿,
溴麝香草酚蓝 （ BTB） 等
5,有色杂质的排除
4,水分的影响 严防水分的混入
有机层可加入无水硫酸钠等脱水
剂或经干燥滤纸滤过
6,共存物的影响
3,准确度差, 不能用于原料药的
测定, 只能用于制剂分析
（三）特点
1,选择性高（选用适当 pH缓冲液
可消除干扰）
2,灵敏度高、供试品用量少
硫酸阿托品注射液 ChP（ 2000）
%1 0 0% ?
??
?
标示
对
供
对
标示量
c
n
A
A
c
注射液 对照法
（四）应用
%100% ?
?
???
?
标示量
平均片重
标示量
对
供
对
s
m
Vn
A
A
c
片剂 对照法
五、色谱法
（一）高效液相色谱法
1．反相 HPLC 分析生物碱类和有
机含氮药物的特点
色谱峰拖尾，保留时间过长，甚
至长期地保留在色谱柱上。
四, 紫外 —可见分光光度法
（ 1） 加扫尾剂法 分离依据物质的极
性及溶解性 。 在流动相中加入扫尾剂,
最常用的扫尾剂是三乙胺
（ 2） 用硅胶作固定相法 离子交换机
理：根据 pKa大小进行分离
2．解决方法
流动相要选择适宜的 pH 值, 竞争
离子的种类和浓度, 同时要加入有机
改性剂
适合于药物与体内代谢物的分析
（ 3）用金刚烷基硅烷化硅胶作固定相
法 分离依据物质溶解性
不论是游离碱还是其盐类, 均是
以游离碱出峰
衍生物生物碱
游离生物碱生物碱盐
衍生化
碱化、有机溶剂提取
?? ??
?????? ??
（二）气相色谱法
97,83,咖啡因和茶碱的特征鉴别
反应是
A,双缩脲反应
B,Vitali反应
C,Marquis反应
D,紫脲酸铵反应
E,绿奎宁反应
98,139,盐酸吗啡中应检查的特殊
杂质为
A,吗啡
B,阿朴吗啡
C,罂粟碱
D,莨菪碱
E,其它生物碱
96,136,用非水溶液滴定法测定盐
酸吗啡含量时, 应使用的试剂是
A,5％ 醋酸汞冰醋酸液
B,盐酸
C,冰醋酸
D,二甲基甲酰胺
E,高氯酸
97,130,非水溶液滴定法测定硫酸奎
宁含量的反应条件为
A,冰醋酸一醋酐为溶剂
B,高氯酸滴定液 （ 0.1mol/L） 滴定
C,1mol的高氯酸与 ?mol的硫酸奎
宁反应
D,仅用电位法指示终点
E．溴酚蓝为指示剂
99,78,非水溶液滴定法测定硫酸奎宁
原料的含量时, 可以用高氯酸直接滴
定冰醋酸介质中的供试品, 1摩尔硫酸
奎宁需要消耗高氯酸的摩尔数为
A,1 B,2
C,3
D,4 E,5
99x,[116— 120]滴定反应中
A,被测物与 HClO4的摩尔比为 1∶ 1
B,被测物与 HClO4的摩尔比为 1∶ 3
C,两者均是
D,两者均不是
99x,116,硫酸奎宁片经氯仿提取后
用 HClO4滴定 （ D）
99x,117,硫酸阿托品在冰醋酸中用
HClO4滴定
99x,118,硫酸奎宁原料药用 HClO4滴
定
99x,119,磷酸可待因用 HClO4滴定
99x,120,硝酸士的宁用 HClO4滴定
（ A）
（ B）
（ A）
(A)
96,129,生物碱类药物制剂的测定方法
A,直接用有机溶剂提取后, 用
H2SO4标准液滴定
B,碱化后用有机溶剂提取, 再用
NaOH水溶液滴定
C,碱化后用有机溶剂提取, 蒸去
有机溶剂后用中性醇溶液, 再用 H2SO4
标准液滴定
D,碱化后用有机溶剂提取, 蒸去
有机溶剂, 再加入定量的 H2SO4,再用
NaOH标准液回滴
E,酸化后，用有机溶剂提取，采
用适宜方法滴定
96,77,酸件染料比色法中, 水相的
pH值过小, 则
A,能形成离子对
B,有机溶剂提取能完全
C,酸性染料以阴离子状态存在
D,生物碱几乎全部以分子状态存在
E,酸性染料以分子状态存在
95,[111— 115]可选择的药物：
A,阿托品 B,吗啡
C,两者均可 D,两者均不可
95,111,具有酯结构
95,112,为两性化合物
95,113,显较强碱性
95,114,用提取容量法测定
95,115,用碱性染料比色法
（ A）
（ B）
（ A）
（ C）
（ D）
例 [1～ 5]
A,双缩脲反应 B,Marquis反应
C,两者皆是 D,两者皆不是
1,盐酸麻黄碱
2,某些生物碱类药物
3,盐酸吗啡
4,咖啡因
5,硫酸奎尼丁
（ A）
（ C）
（ B）
（ D）
（ D）
例 6,生物碱类药物的一般鉴别试验包
括
A,熔点测定
B,显色反应
C,沉淀反应
D,光谱法 （ 紫外, 红外 ）
E,薄层色谱法
例 7,能够发生 Vitali反应的药物是
A,盐酸吗啡
B,硫酸奎宁
C,磷酸可待因
D,盐酸麻黄碱
E,硫酸阿托品
例 8,用非水溶液滴定法测定二盐酸奎
宁时, 二盐酸奎宁和 HClO4的摩尔比
是
A,1∶ 1
B,1∶ 2
C,1∶ 3
D,1∶ 4
E,1∶ 1.5
例 9,检查硫酸阿托品中莨菪碱时, 应
采用
A,色谱法
B,红外分光法
C,旋光度法
D,显色法
E,直接检查法
例 10,酸性染料比色法测定生物碱类药
物, 有机溶剂萃取测定的有色物是
A,离子对和指示剂的混合物
B,生物碱盐
C,指示剂
D,离子对
E,游离生物碱
