重要概念
1.消毒
2.灭菌
3.防腐
4.无菌
5.无菌操作
6.抑菌
杀死物体上病原微生物的方法。
杀死物体上所有微生物的方法。
防止或抑制微生物生长繁殖的方法。
不含活菌的意思。
为了防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。
抑制体内或体外微生物生长繁殖。
第一节 物理因素对细菌的影响
一、温度
二、紫外线与电离辐射
三、超声波
四、过滤
高温
低温
湿热灭菌法
干热灭菌法
高压蒸汽灭菌法
巴氏消毒法
流通蒸汽消毒法
间歇灭菌法
煮沸法
焚烧法
烧灼法
干烤法
方法名 方法内容 适用物质
高压蒸汽灭菌法 121度 20-40min 耐高温、耐水物品
巴氏消毒法 61.1-62.8度 30min 71.7度 15-30s 牛奶和酒类等
流通蒸汽消毒法 100度 10-30min 耐湿不耐高温物品的消毒
间歇灭菌法
100度 10-30min,37
度过夜，每日一次，
连续三次
不耐高温的营养物
煮沸法 100度 5min 饮水和一般器械的消毒
焚烧法 无经济价值的污染物品
烧灼法 微生物实验室的接种针等不怕热的金属器械
干烤法 160度 2小时 玻璃器皿、瓷器等灭菌
蛋白质含水量
（ %） 50 25 18 6 0
凝固所需温度 56 76 80-90 145 160-170
结论一,蛋白质在湿热中较易凝固变性。
热型 温度（度） 时间（ h) 布层内温度20层 40层 100层 灭菌效果
干热 130-140 4 86 72 70.5 不完全
湿热 105.3 3 101 101 101 完全
结论二,湿热的穿透力比干热强。
二、紫外线与电离辐射
1.紫外线
杀菌波长,210-300nm
最适波长,265-266nm
杀菌机制：干扰 DNA复制
特点：穿透力弱
应用：空气和物体表面的消毒
2.电离辐射
种类,γ 射线, χ 射线和电子流
灭菌机制：产生游离基，破坏 DNA
特点：具有较高的能量和穿透力
应用：不耐热的塑料制品以及食品消毒
缺点：损伤皮肤和眼睛
三、超声波
四、过滤
第一节 物理因素对细菌的影响
第二节 化学因素对细菌的影响
一、常用消毒剂的杀菌机制
1.使菌体蛋白质变性或沉淀。
2.影响微生物酶代谢活性。
3.损伤细胞膜。
二、常用消毒剂种类
类 别 名 称 浓 度 用 途
重金属盐类 红汞 2%水溶液 皮肤、粘膜、小创伤消毒
硫柳汞 0.1% 生物制品防腐
氧化剂 高锰酸钾 1.0gL 皮肤、尿道、水果消毒
过氧化氢 3% 创伤口，皮肤粘膜
过氧乙酸 0.2-0.3% 塑料、玻璃器皿
碘酒 20/25g/L 皮肤消毒
漂白粉 100-200g/L 地面、厕所与排泄物消毒
氯 0.2-0.5ppm 饮水与游泳池消毒
表面活性剂 新洁尔灭 0.05-0.1% 外科手术洗手，皮肤粘膜消毒，浸泡
手术器械
醇类 乙醇 70-75% 皮肤、体温计消毒
醛类 戊二醛 2% 精密仪器，内窥镜消毒
烷化剂 洗必泰 0.02-0.05% 手术前洗手
染料 龙胆紫 20-40g/L 浅表创伤消毒
酸碱类 醋酸 5-10ml/ m3 空气消毒
第一节 物理因素对细菌的影响
第二节 化学因素对细菌的影响
一、常用消毒剂的杀菌机制
二、常用消毒剂种类
三、影响因素
1.消毒剂的性质、浓度及作用时间
第一节 物理因素对细菌的影响
第二节 化学因素对细菌的影响
一、常用消毒剂的杀菌机制
二、常用消毒剂种类
三、影响因素
1.消毒剂的性质、浓度及作用时间
2.微生物种类和数量
3.酸碱度和温度
第一节 物理因素对细菌的影响
第二节 化学因素对细菌的影响
一、常用消毒剂的杀菌机制
二、常用消毒剂种类
三、影响因素
四、消毒灭菌效果检测
四、消毒灭菌效果检测
1.高压蒸汽灭菌器
嗜热脂肪芽胞杆菌
载体
灭菌器 灭菌后取出菌片
溴甲酚紫
蛋白胨水 56度培养 48小时
结果,外观澄清，颜色未变 ﹣ ﹣ → 达到灭菌效果
外观液体混浊，颜色变黄 → 未达到灭菌效果
2.紫外线灭菌
指示菌,枯草杆菌芽胞黑色变种
四、消毒灭菌效果检测
1.高压蒸汽灭菌器
2.紫外线灭菌
3.消毒剂
0.5ml菌悬液（ 106-7CFU/ml）
+
4.5ml待测消毒液
20度水浴
5min
混合液 1ml
+
9ml中和液
倾注平皿
计算菌落数
10min
（ 2）计算公式
杀菌率（ Pt） =
消毒前或对照组活菌数 /ml﹣ 作用一定时间后的活菌数 /ml
消毒前或对照组活菌数 /ml
杀菌指数（ K1） =
消毒前或对照组活菌数 /ml
作用一定时间后的活菌数 /ml
（ 1）方法
第一节 物理因素对细菌的影响
第二节 化学因素对细菌的影响
第三节 生物因素对细菌的影响
一、噬菌体
二、细菌素
1.消毒
2.灭菌
3.防腐
4.无菌
5.无菌操作
6.抑菌
杀死物体上病原微生物的方法。
杀死物体上所有微生物的方法。
防止或抑制微生物生长繁殖的方法。
不含活菌的意思。
为了防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。
抑制体内或体外微生物生长繁殖。
第一节 物理因素对细菌的影响
一、温度
二、紫外线与电离辐射
三、超声波
四、过滤
高温
低温
湿热灭菌法
干热灭菌法
高压蒸汽灭菌法
巴氏消毒法
流通蒸汽消毒法
间歇灭菌法
煮沸法
焚烧法
烧灼法
干烤法
方法名 方法内容 适用物质
高压蒸汽灭菌法 121度 20-40min 耐高温、耐水物品
巴氏消毒法 61.1-62.8度 30min 71.7度 15-30s 牛奶和酒类等
流通蒸汽消毒法 100度 10-30min 耐湿不耐高温物品的消毒
间歇灭菌法
100度 10-30min,37
度过夜，每日一次，
连续三次
不耐高温的营养物
煮沸法 100度 5min 饮水和一般器械的消毒
焚烧法 无经济价值的污染物品
烧灼法 微生物实验室的接种针等不怕热的金属器械
干烤法 160度 2小时 玻璃器皿、瓷器等灭菌
蛋白质含水量
（ %） 50 25 18 6 0
凝固所需温度 56 76 80-90 145 160-170
结论一,蛋白质在湿热中较易凝固变性。
热型 温度（度） 时间（ h) 布层内温度20层 40层 100层 灭菌效果
干热 130-140 4 86 72 70.5 不完全
湿热 105.3 3 101 101 101 完全
结论二,湿热的穿透力比干热强。
二、紫外线与电离辐射
1.紫外线
杀菌波长,210-300nm
最适波长,265-266nm
杀菌机制：干扰 DNA复制
特点：穿透力弱
应用：空气和物体表面的消毒
2.电离辐射
种类,γ 射线, χ 射线和电子流
灭菌机制：产生游离基，破坏 DNA
特点：具有较高的能量和穿透力
应用：不耐热的塑料制品以及食品消毒
缺点：损伤皮肤和眼睛
三、超声波
四、过滤
第一节 物理因素对细菌的影响
第二节 化学因素对细菌的影响
一、常用消毒剂的杀菌机制
1.使菌体蛋白质变性或沉淀。
2.影响微生物酶代谢活性。
3.损伤细胞膜。
二、常用消毒剂种类
类 别 名 称 浓 度 用 途
重金属盐类 红汞 2%水溶液 皮肤、粘膜、小创伤消毒
硫柳汞 0.1% 生物制品防腐
氧化剂 高锰酸钾 1.0gL 皮肤、尿道、水果消毒
过氧化氢 3% 创伤口，皮肤粘膜
过氧乙酸 0.2-0.3% 塑料、玻璃器皿
碘酒 20/25g/L 皮肤消毒
漂白粉 100-200g/L 地面、厕所与排泄物消毒
氯 0.2-0.5ppm 饮水与游泳池消毒
表面活性剂 新洁尔灭 0.05-0.1% 外科手术洗手，皮肤粘膜消毒，浸泡
手术器械
醇类 乙醇 70-75% 皮肤、体温计消毒
醛类 戊二醛 2% 精密仪器，内窥镜消毒
烷化剂 洗必泰 0.02-0.05% 手术前洗手
染料 龙胆紫 20-40g/L 浅表创伤消毒
酸碱类 醋酸 5-10ml/ m3 空气消毒
第一节 物理因素对细菌的影响
第二节 化学因素对细菌的影响
一、常用消毒剂的杀菌机制
二、常用消毒剂种类
三、影响因素
1.消毒剂的性质、浓度及作用时间
第一节 物理因素对细菌的影响
第二节 化学因素对细菌的影响
一、常用消毒剂的杀菌机制
二、常用消毒剂种类
三、影响因素
1.消毒剂的性质、浓度及作用时间
2.微生物种类和数量
3.酸碱度和温度
第一节 物理因素对细菌的影响
第二节 化学因素对细菌的影响
一、常用消毒剂的杀菌机制
二、常用消毒剂种类
三、影响因素
四、消毒灭菌效果检测
四、消毒灭菌效果检测
1.高压蒸汽灭菌器
嗜热脂肪芽胞杆菌
载体
灭菌器 灭菌后取出菌片
溴甲酚紫
蛋白胨水 56度培养 48小时
结果,外观澄清，颜色未变 ﹣ ﹣ → 达到灭菌效果
外观液体混浊，颜色变黄 → 未达到灭菌效果
2.紫外线灭菌
指示菌,枯草杆菌芽胞黑色变种
四、消毒灭菌效果检测
1.高压蒸汽灭菌器
2.紫外线灭菌
3.消毒剂
0.5ml菌悬液（ 106-7CFU/ml）
+
4.5ml待测消毒液
20度水浴
5min
混合液 1ml
+
9ml中和液
倾注平皿
计算菌落数
10min
（ 2）计算公式
杀菌率（ Pt） =
消毒前或对照组活菌数 /ml﹣ 作用一定时间后的活菌数 /ml
消毒前或对照组活菌数 /ml
杀菌指数（ K1） =
消毒前或对照组活菌数 /ml
作用一定时间后的活菌数 /ml
（ 1）方法
第一节 物理因素对细菌的影响
第二节 化学因素对细菌的影响
第三节 生物因素对细菌的影响
一、噬菌体
二、细菌素
