http://spxy.zjgsu.edu.cn 《生化实验技术》教学大纲 （ Experimental Technology in Biochemistry） 一、基本信息 课程代码： 1033122 学 分 ： 2 总 课 时 ： 32（其中实验 18 课时） 课程性质：专业选修课 适用专业：生物工程 先修课程：生物化学、微生物 二、本课程教学目的和任务 本课程主要目的是为了使学生了解现代生化实验技术的进展情况及实际应用，提高学生 的实验操作技能，培养学生独立分析和解决问题的能力，适应研究工作的需要，以期能够为 顺利开展科研工作打下基础。通过本课程学习，要求学生学习了解实验设计原理及生化实验 技术理论的应用。经实践，掌握生物化学研究工作中应用广泛且重要的技术方法与实验技能。 适应研究工作的需要，掌握一定的独立解决问题的能力，以期能够为顺利开展科研工作打下 基础。 三、教学方法与手段 本课程的教学采用理论和实践相结合，14 课时为理论教学，18 课时为课内实验，在理 论的基础上，完成生化实验技术的综合实验。 四、教学内容及要求 第 1 章 生命大分子物质的制备 本章主要内容要求掌握生物材料的选择与处理，组织及细胞破碎方法，生化物质抽提， 影响提取因素，浓缩方法；熟悉纯化方案的设计与评价。 重点内容： 材料的选择与处理；组织及细胞破碎；生化物质提取；浓缩；纯化方案的设 计与评价。 难点内容：材料的选择与处理 第 2 章 常用分离方法与沉淀技术 本章主要内容要求掌握盐析法，有机溶剂沉淀法，等电点沉淀，选择性变性沉淀；了解 膜分离技术。 重点内容： ； 盐析法；有机溶剂沉淀法；等电点沉淀及常用沉淀剂；选择性变性沉淀； 膜分离技术。 http://spxy.zjgsu.edu.cn 难点内容：盐析法 第 3 章 柱层析技术 本章主要内容要求掌握层析的基本概念，吸附层析，薄层层析，离子交换层析，凝胶过 滤，亲和层析；了解聚焦层析。 重点内容： 层析技术总论；吸附层析；薄层层析；离子交换层析；凝胶过滤；亲和层析； 聚焦层析。 难点内容：亲和层析、聚焦层析 第 4 章 电泳技术 本章主要内容要求掌握电泳技术基本概念和基本原理，琼脂糖凝胶电泳，聚丙烯酰胺凝 胶电泳；了解蛋白组学研究及电泳技术新进展 重点内容：基本概念；电泳的基本原理；琼脂糖电泳；聚丙烯酰胺凝胶电泳。 难点内容：聚丙烯酰胺电聚焦、印迹法、双向电泳及蛋白组学研究 第 5 章 超离心技术 本章主要内容要求，掌握超离心技术基本概念和基本原理。 重点内容：离心机的种类与用途；离心方法的选择；离心条件的确定。 难点内容：离心条件的确定 五、课内实验内容、要求及课时 实验一：凝胶层析分离蛋白质（4 课时） 本实验内容属于第 3 章，为综合性实验。 通过实验要求学生掌握生化分离技术—层析技术的基本原理，掌握及熟悉柱层析仪器装 置的连接、凝胶处理、装柱、平衡、上样、洗脱、收集、检测等技术操作，学会使用柱层析 分离生化活性成分。 实验二：SDS-PAGE 测定蛋白质分子量（6 课时） 本实验内容属于第 4 章，为综合性实验。 SDS-PAGE 电泳是对蛋白质进行量化、比较及鉴定的一种方法，是许多研究领域的一种 分析技术。通过实验要求学生掌握生化分离技术—电泳技术的基本原理，掌握 SDS-PAGE 电 泳装置连接、制胶、加样、电泳、剥胶、染色、脱色等技术操作，学会使用 SDS-PAGE 电泳 方法分离蛋白质及测定分子量。 实验三：蛋白质电印迹（Western 印迹） （8 学时） 本实验内容属于第 4 章，为综合性实验。 电印迹是生物工程技术必需的检测技术之一。通过实验要求学生掌握生化检测技术—电 印迹的基本原理，掌握电印迹装置连接、剥胶、膜处理、制作聚丙烯酰胺-膜“三明治”电 转移、染色、脱色、分析等技术操作。 六、教学时数分配表 http://spxy.zjgsu.edu.cn 章 内 容 实验个数 实验时数 总参考时数 1 生命大分子物质的制备（2） 2 2 常用分离方法与沉淀技术（2） 2 3 柱层析技术（4） 1 4 8 4 电泳技术（4） 2 14 18 5 超离心技术（2） 2 合 计 3 18 32 七、考核方式及成绩评定标准 考核方式：闭卷 成绩评定标准：课内实验成绩占 30%，期末考试成绩占 70%；成绩评定为百分制。 八、教材及主要参考书 教 材 ：赵永芳，生物化学实验技术原理及应用 ，科学学出版社，第三版，2003 参考书目：[1]、冯万祥，赵伯龙.生化技术，湖南工业出版社，1989 [2]、郭尧君.蛋白质电泳技术，科学出版社，1999 [3]、张龙翔等.生化实验方法和技术，第二版，高教出版社，1997 [4]、苏拔贤.生物化学制备技术 ，科学出版社 2001 [5]、郭勇.现代生化技术，华南理工大学出版社，1996 [6]、生物制药技术 郭勇，中国轻工业出版社(2000) [7]、赵亚华.生物化学实验技术教程，华南理工大学出版社，2000 [8]、陈来同，唐运.生物化学产品制备技术，科学技术文献出版社，2003 [9]、汪家政，范明.蛋白质技术手册 ，科学出版社，2001 执笔人: 张燕平