第五章 接种与培养
第一节 母种转管及培养
第二节 再生母种扩繁成原种
第四节 菌种质量鉴定菌种保存
第三节 栽培种接种与培养
教学目的,熟练掌握各级培养基
接种的方法,并掌握菌种质量鉴定
与保藏的方法。
教学重点,培养基接种 。
第一节 母种转管及培养
一, 母种转管无菌操作技术要点,
1.将接种用品及原始母种放入接种箱内 。
2.用菇保 1号, 气雾消毒盒 （ 2g/m3） 或甲醛进行熏
蒸, 时间要在 30分钟以上 。
3.手, 台面, 接种工具, 母种管用酒精棉球擦试
消毒 。
4.点燃酒精灯, 火焰灼烧接种镐至烧红后冷却,
凡能伸进试管的杆部均过火灭菌 。
5．左手大拇指和其他四指并拢握住菌种管和待接试管，
斜面向上，并保持水平。
6．右手小指、无名指及手掌拔掉棉塞，用火焰灼烧
试管口并不断搅动。
7,先弃去前端 1cm处, 然后用接种镐快速移取黄
豆粒大小的菌种入待接试管斜面培养基中央 。
8．灼烧试管口，并将棉塞在火焰上迅速过一下然后
塞上。
9．用接种镐挑持住母种管，另一只手换待接管，重
复上述操作。
10．收拾台面。
11.贴标签
二、母种培养
接种后，于 22℃ 左右的环境避光培养，每天
都有要仔细观察，对污染的试管及时挑除。原始
母种的培养初期一定要天天检查，以免菌丝将污
染处盖住，难以挑出，造成巨大损失。
一般 7-10d左右可以长满管。长满管后，一部
分用于扩繁，另一部分用于保存。于 +5℃ 的水箱
冷藏层中至少可以保存 2个月。
作业
1.简述接菌前须作的准备工作。
（包括药品、接种工具、如何消毒等工作）
2.详述母种培养基的制作过程。
3.详述母种转管的动作要领。
第二节 再生母种扩繁成原种
一、原种接种技术操作要点
少量原种接种：可利用接种箱。
(1)手、母种管、接种工具酒精消毒，点燃酒精灯
(2)左手持母种管、右手持接种镐并灼烧 (竖直、横拉 )
(3)拔掉棉塞并用手夹住，灼烧管口，并以火焰封住管口
(4)将接种镐伸进母种管内，待冷凉，弃除前端 1cm处的
培养基，接种镐一经灭菌后不许接触未经灭菌的物体。
(5)将母种菌种切成 5段，迅速移进原种瓶口，菌种不能
掉外面（同时另一人将瓶口打开，并以火焰封口）。
(6)要以原种瓶口迎母种管口，不能反向。
封瓶口
示接种块位置
?大量原种制作：常利用塑料接种帐或接种室，按照
无菌操作规程，三人配合。一人挖取菌种，一人掀瓶
口，一人摆瓶。
二、培养
准确贴好标签,接种后于 22℃ 左右的培养室
暗光培养。培养的最初 10d，每天都要检查，及
时挑选污染菌种瓶，妥善处理。及时挑选了污染
菌种瓶，检查生长情况并进行详细记录。培养室
不能过于干燥，湿度要保持在 60%左右，否则菌
种瓶失水过快。
第三节 栽培种接种与培养
栽培种制作的接种方法, 与原种相似 。
一般罐头瓶栽培种制作也是三人配合, 用
接种匙挖取菌种 。 配合熟练, 可在短时间
内大量接种, 效果也很好 。
如果栽培种制作采用塑料袋做容器, 则
接种时采取四人配合的形式 。 一人负责挖
取菌种, 一人负责把持袋口, 另外两个人
负责打开袋口和封口 。 封口时可利用皮套
或钉书钉封口 。 培养方法基本同原种原始
培养方法 。
第四节 菌种质量鉴定菌种保存
一, 菌种质量鉴定
菌种质量的优劣, 不单纯是盈利问题, 而
且是能否在激烈的菌种销售竞争中求得生存
的问题, 是关系到广大栽培者的生产利益的
大问题 。 作为菌种生产者要有高度的责任心,
也要有职业道德, 严格把住菌种质量关执行
跟踪服务, 从菇农那里获得信息反馈, 使菌
种质量精益求精 。 作为菌种购买者也应懂得
菌种质量鉴定的一般方法, 确保生产成功
1.外观鉴定
很多栽培者都直接购买栽培种或购买原种用
于扩接栽培种或用生产栽培 。 具体的选购方
法归纳起看即, 提, 闻, 看, 三个字 。
提,即用手抓住棉花塞轻轻提起, 看棉花塞
松紧适度 。 过松或过紧均达不到过滤空气的
目的, 从而无法保证制作优质菌种 。 同时也
可手测重量判断失水情况和菌龄 。
闻,在一批菌种中随机抽样检查 。 把棉花
塞拔起后, 半瓶口, 袋口或管口靠近鼻子
嗅菌种气味 。 若菌种中散发出酸, 霉, 臭
等气味, 则说明菌种有杂菌的污染, 不是
纯培养的菌丝,纯培养的菌种具有特殊香味 。
看,首先是看菌种外观, 看是否破管, 破瓶, 破
袋 。 再看菌种是否, 纯, 正, 壮, 润, 。
2.液体鉴定
在同 PDA培养基同样料的液体培养基中接种待鉴
定菌种, 如培养后出现浑浊或稀薄现象, 说明该
菌种不可用于栽培, 如结果为洁白的菌丝球, 该
菌种可以放心用于生产 。
3.出菇试验
大规模生产前, 进行出菇试验, 是保证生产成功
的重要方面 。 只有出菇试验, 才能够最终直观地
体现菌种质量情况 。 大规模生产基地, 应该有示
范场 。
二, 菌种的保藏
菌种是主要生产资料, 必须很好保藏 。 做到不死
亡, 不衰退, 不被杂菌污染, 能长期在生产上应
用 。 菌种一般都以试管种形式保藏 。 保藏的基本
原理是使菌丝的生理代谢活动尽量降低, 通常采
用的手段是低温, 干燥和减少氧气供应 。
1.斜面低温保藏
首先将要保存的菌种移接到适宜的斜面培养基上 。
一般不宜用营养贫乏的合成培养基, 而要用营养
丰富的半合成培养基, 琼脂用量加到 2.5%。 并增
加每管培养基的装量, 不少于 12ml。 每隔 3-4个
月转管一次 。 如用胶塞石蜡封口, 转管期可延迟
至 6个月 。
2.液体石蜡保藏
也叫矿油保藏 。 在斜面菌种上灌注液体石蜡后可
以防止培养基水分散失, 使菌丝体与空气隔绝,
抑制新陈代谢 。 因而能较好地保藏菌种 。
3.麦粒保藏菌种
取籽粒饱满的小麦, 经淘洗后, 用 20℃ 温水浸 5h，
稍加晾干, 将麦粒装入试管, 占管深 1/3-1/4，
高压灭菌后趁热拍热 。 冷却后, 在每支麦粒试管
内加 1滴菌丝悬浮液, 摇匀, 置适温下培养 。 当
大多数麦粒上出现稀疏的菌丝体时, 终止培养,
贮藏在干燥, 冷凉处 。
第一节 母种转管及培养
第二节 再生母种扩繁成原种
第四节 菌种质量鉴定菌种保存
第三节 栽培种接种与培养
教学目的,熟练掌握各级培养基
接种的方法,并掌握菌种质量鉴定
与保藏的方法。
教学重点,培养基接种 。
第一节 母种转管及培养
一, 母种转管无菌操作技术要点,
1.将接种用品及原始母种放入接种箱内 。
2.用菇保 1号, 气雾消毒盒 （ 2g/m3） 或甲醛进行熏
蒸, 时间要在 30分钟以上 。
3.手, 台面, 接种工具, 母种管用酒精棉球擦试
消毒 。
4.点燃酒精灯, 火焰灼烧接种镐至烧红后冷却,
凡能伸进试管的杆部均过火灭菌 。
5．左手大拇指和其他四指并拢握住菌种管和待接试管，
斜面向上，并保持水平。
6．右手小指、无名指及手掌拔掉棉塞，用火焰灼烧
试管口并不断搅动。
7,先弃去前端 1cm处, 然后用接种镐快速移取黄
豆粒大小的菌种入待接试管斜面培养基中央 。
8．灼烧试管口，并将棉塞在火焰上迅速过一下然后
塞上。
9．用接种镐挑持住母种管，另一只手换待接管，重
复上述操作。
10．收拾台面。
11.贴标签
二、母种培养
接种后，于 22℃ 左右的环境避光培养，每天
都有要仔细观察，对污染的试管及时挑除。原始
母种的培养初期一定要天天检查，以免菌丝将污
染处盖住，难以挑出，造成巨大损失。
一般 7-10d左右可以长满管。长满管后，一部
分用于扩繁，另一部分用于保存。于 +5℃ 的水箱
冷藏层中至少可以保存 2个月。
作业
1.简述接菌前须作的准备工作。
（包括药品、接种工具、如何消毒等工作）
2.详述母种培养基的制作过程。
3.详述母种转管的动作要领。
第二节 再生母种扩繁成原种
一、原种接种技术操作要点
少量原种接种：可利用接种箱。
(1)手、母种管、接种工具酒精消毒，点燃酒精灯
(2)左手持母种管、右手持接种镐并灼烧 (竖直、横拉 )
(3)拔掉棉塞并用手夹住，灼烧管口，并以火焰封住管口
(4)将接种镐伸进母种管内，待冷凉，弃除前端 1cm处的
培养基，接种镐一经灭菌后不许接触未经灭菌的物体。
(5)将母种菌种切成 5段，迅速移进原种瓶口，菌种不能
掉外面（同时另一人将瓶口打开，并以火焰封口）。
(6)要以原种瓶口迎母种管口，不能反向。
封瓶口
示接种块位置
?大量原种制作：常利用塑料接种帐或接种室，按照
无菌操作规程，三人配合。一人挖取菌种，一人掀瓶
口，一人摆瓶。
二、培养
准确贴好标签,接种后于 22℃ 左右的培养室
暗光培养。培养的最初 10d，每天都要检查，及
时挑选污染菌种瓶，妥善处理。及时挑选了污染
菌种瓶，检查生长情况并进行详细记录。培养室
不能过于干燥，湿度要保持在 60%左右，否则菌
种瓶失水过快。
第三节 栽培种接种与培养
栽培种制作的接种方法, 与原种相似 。
一般罐头瓶栽培种制作也是三人配合, 用
接种匙挖取菌种 。 配合熟练, 可在短时间
内大量接种, 效果也很好 。
如果栽培种制作采用塑料袋做容器, 则
接种时采取四人配合的形式 。 一人负责挖
取菌种, 一人负责把持袋口, 另外两个人
负责打开袋口和封口 。 封口时可利用皮套
或钉书钉封口 。 培养方法基本同原种原始
培养方法 。
第四节 菌种质量鉴定菌种保存
一, 菌种质量鉴定
菌种质量的优劣, 不单纯是盈利问题, 而
且是能否在激烈的菌种销售竞争中求得生存
的问题, 是关系到广大栽培者的生产利益的
大问题 。 作为菌种生产者要有高度的责任心,
也要有职业道德, 严格把住菌种质量关执行
跟踪服务, 从菇农那里获得信息反馈, 使菌
种质量精益求精 。 作为菌种购买者也应懂得
菌种质量鉴定的一般方法, 确保生产成功
1.外观鉴定
很多栽培者都直接购买栽培种或购买原种用
于扩接栽培种或用生产栽培 。 具体的选购方
法归纳起看即, 提, 闻, 看, 三个字 。
提,即用手抓住棉花塞轻轻提起, 看棉花塞
松紧适度 。 过松或过紧均达不到过滤空气的
目的, 从而无法保证制作优质菌种 。 同时也
可手测重量判断失水情况和菌龄 。
闻,在一批菌种中随机抽样检查 。 把棉花
塞拔起后, 半瓶口, 袋口或管口靠近鼻子
嗅菌种气味 。 若菌种中散发出酸, 霉, 臭
等气味, 则说明菌种有杂菌的污染, 不是
纯培养的菌丝,纯培养的菌种具有特殊香味 。
看,首先是看菌种外观, 看是否破管, 破瓶, 破
袋 。 再看菌种是否, 纯, 正, 壮, 润, 。
2.液体鉴定
在同 PDA培养基同样料的液体培养基中接种待鉴
定菌种, 如培养后出现浑浊或稀薄现象, 说明该
菌种不可用于栽培, 如结果为洁白的菌丝球, 该
菌种可以放心用于生产 。
3.出菇试验
大规模生产前, 进行出菇试验, 是保证生产成功
的重要方面 。 只有出菇试验, 才能够最终直观地
体现菌种质量情况 。 大规模生产基地, 应该有示
范场 。
二, 菌种的保藏
菌种是主要生产资料, 必须很好保藏 。 做到不死
亡, 不衰退, 不被杂菌污染, 能长期在生产上应
用 。 菌种一般都以试管种形式保藏 。 保藏的基本
原理是使菌丝的生理代谢活动尽量降低, 通常采
用的手段是低温, 干燥和减少氧气供应 。
1.斜面低温保藏
首先将要保存的菌种移接到适宜的斜面培养基上 。
一般不宜用营养贫乏的合成培养基, 而要用营养
丰富的半合成培养基, 琼脂用量加到 2.5%。 并增
加每管培养基的装量, 不少于 12ml。 每隔 3-4个
月转管一次 。 如用胶塞石蜡封口, 转管期可延迟
至 6个月 。
2.液体石蜡保藏
也叫矿油保藏 。 在斜面菌种上灌注液体石蜡后可
以防止培养基水分散失, 使菌丝体与空气隔绝,
抑制新陈代谢 。 因而能较好地保藏菌种 。
3.麦粒保藏菌种
取籽粒饱满的小麦, 经淘洗后, 用 20℃ 温水浸 5h，
稍加晾干, 将麦粒装入试管, 占管深 1/3-1/4，
高压灭菌后趁热拍热 。 冷却后, 在每支麦粒试管
内加 1滴菌丝悬浮液, 摇匀, 置适温下培养 。 当
大多数麦粒上出现稀疏的菌丝体时, 终止培养,
贮藏在干燥, 冷凉处 。
