第四章 培养基的制作
第一节 母种培养基制作
第二节 原种、栽培种培养基制作
第三节 液体菌种制作技术
教学目的,熟练掌握各级培养基
的制作方法 。
教学重点,培养基的制作方法 。
第一节 母种培养基的制作
一、菌种培养基
(一 )按营养物质种类分类
l.天然培养基 常用的生物材料有马铃薯、胡萝
卜、蚕蛹粉、豆芽汁、花生饼粉、玉米粉、酵母等。
适合于各类微生物的生长
2.合成培养基 是指用已知成分和数量的化合物配
制而成的培养基。适用研究
3.半合成培养基 利用天然物质作为碳、氮源及维
生素的来源另加一些无机盐类配制而成
(二 )按培养基的物理状态分类
1.液体培养基
不加琼脂，多用于生理生化方面研究,培养
液体菌种等。
2.固体培养基
凝固剂的量,琼脂冬季为 1.5%--2.0%,夏
季 2.2%--2.3%。
3.半固体培养基
含有较少量琼脂 (0.2%--0.5%)的培养基,
使培养基未达到固态而呈粘稠状态。
二, 母种培养基配方,
1.土豆 200g、糖 20g、琼脂 18g、水 1000ml
2.去皮马铃薯 200g,葡萄糖 20g,琼脂 18-20g,水
1000ml,PH值自然, 另外添加：麸皮 20g,玉米面 5g,黄
豆粉 5g,磷酸二氢钾 2g,硫酸镁 2g,VB11片 （ 10mg） 。 此
配方适用于大多数菌种, 金针菇, 黑木耳, 灵芝生长尤其
茁壮 。 可作黑木耳复壮培养基 。
3.去皮马铃薯 200g,葡萄糖 20g,琼脂 18-20g,水
1000ml,PH值自然, 另外添加：麸皮 20g,玉米面 5g,黄
豆粉 5g,磷酸二氢钾 2g,硫酸镁 2g,VB11片 （ 10mL）, 平
菇子实体 100g。 此配方适用于大多数菌种生长 。 做平菇的
复壮培养基效果显著 。
4.去皮马铃薯 200g,葡萄糖 20g,琼脂 18-20g,水
1000ml,PH值自然, 另外添加：麸皮 20g,玉米面 5g,黄
豆粉 5g,磷酸二氢钾 2g,硫酸镁 2g,VB11片 （ 10mg） 1片
,香菇子实体 100g。 此配方适用于大多数菌种生长, 可做
香菇的复壮培养基, 效果显著 。
（一）营养液制作 1,准备工作
三、制作方法
2,称量、材料预处理
按配方准确称量各营养物质。将马铃薯去皮、
挖掉芽眼后称量 200g，切成 1cm见方的小块。琼脂
剪碎后用水浸泡。
3,熬煮
将切好的马铃薯块加适量水后放入电饭锅中,
煮至酥而不烂 。
4,过滤、加可溶药物
用双层沙布过滤，取滤汁，放在电饭锅中加
入糖
5,熬琼脂、定容
在沸腾状态下加入琼脂，直到琼脂完全
溶化为止，定容至 1000ml。
（二）营养液分装
1,用注射器分装
2,分装标准,分装量为试管长度的 1/4—
1/5。注意培养基不能沾污试管口。
3.塞棉塞
棉塞松紧适度, 1/3在管外, 2/3在管内 。
4.扎捆
7-10支试管捆在一起, 棉塞上包好防水纸, 直
立放入高压灭菌锅中 。
(四 ) 摆斜面
灭菌结束后锅盖开 1/5的小缝，用余热烘干报纸和
棉塞，然后摆斜面。斜面长是试管总长的 1/2
（三）灭菌处理
在 1.0— 1.5 kg/cm2压力下维持 20--30min。
(四 ) 摆斜面
灭菌结束后锅盖开 1/5的小缝，用余热烘干报纸和
棉塞，然后摆斜面。斜面长是试管总长的 1/2
第二节 原种、栽培种培养基制作
一、常见原种配方
① 木屑培养基配方
细木屑 80%,麸皮 12%,玉米面 1%,黄豆粉 2%,过磷酸钙
1.5%,红糖 0.5%,尿素 0.4%,硫酸镁 0.1%,石灰 1%,石膏
2%,料：水 =1,1.0-1.2。 此配方适合香菇, 黑木耳, 平
菇原种生长, 菌丝粗壮洁白 。
② 玉米芯培养基配方
玉米芯 80%,麸皮 14%,糖 0.5%,过磷酸钙 1%,石灰 2%，
尿素 0.5%,玉米面 2%,料：水 =1,1.4-1.5。 此配方适合
于培养平菇原种, 菌丝生长速度快, 且菌丝粗状 。
③ 玉米芯, 木屑混合培养基配方
玉米芯 42%,木屑 20%,豆秸 20%,麸皮 10%,过磷酸钙
1.5%,石灰 2%,石膏 1%,糖 0.5%,玉米面 3%,料：水 1=1：
1.4-1.5。 此配方适合于培养平菇原种 。 生长健壮, 也可
培养金针菇, 滑子蘑原种 。
④ 软质木屑配方
椴木屑 75%（ 木线厂下脚料, 颗粒较大 ）, 麸皮 15%,玉
米面 5%,石膏 1.5%,石灰 1%,糖 0.5%,过磷酸钙 1.5%,尿
素 0.5%,料, 水 =1,1.2左右 。 适用于金针菇, 滑子蘑等
分解基质能力较弱的品种使用 。
⑤ 麦粒, 木屑培养基配方
新鲜, 优质小麦 80%,阔叶树木屑 20%,木屑：水 =1,1
左右, 拌木屑用煮小麦水, 或在此基础上, 加入总量 0.5%
的过磷酸钙, 0.5%的蔗糖,1%的石灰, 在麦粒煮好后连同
木屑拌入 。
⑥ 玉米粒培养基配方
优质新鲜玉米 100%,或后期加入 0.5%过磷酸钙, 0.5%的
糖,1%的石灰 。
玉米粒培养基制作的原种, 具备麦粒原种的优点, 后劲
更足, 接种扩繁量更大 。
二、原种培养基的制作方法
一、谷粒培养基制作
1.按配方称量各营养物质
配方一：优质新鲜小麦 65%,木屑 15%,棉籽
壳 15%,麸皮 5%,石膏 1%,过磷酸钙 0.5%,糖 0.5%，
尿素 0.5%
2.谷粒浸泡吸水
冬季浸泡 24-48小时，夏季加 1%石灰（以防变
酸）浸泡 24小时，隔夜换水。
3,煮沸、沥干捞出
泡好后，漂洗干净（去杂），煮至饱胀
无白心，切忌煮开花，沥干水分后捞出。
4,拌料
用煮小麦水拌木屑、棉籽壳、麸皮，最
后再一起与麦粒拌匀。
5.装瓶
(1)装料量应为 1/3或 1/2罐头瓶，便于培养
时摇动基料促进丝均匀生长。
(2)擦净并封瓶口
封口塑料袋采用规格为 13cm× 13cm× 0.004cm
高压聚丙稀袋，二层，里层在中央剪一 3cm宽
菱形口。至少二个皮套。
6.装锅灭菌
高压灭菌于 126℃ 左右维持 2小时；常
压灭菌于 100℃ 维持 10-12小时，夏季时间
可酌情延长。
7.出锅,冷却
冷却至 30℃ 以下待接种。
二,.木屑、玉米芯料培养基制作方法
1.按配方称料。
2.拌料：干混（将石膏和不溶于水的主料和
辅料混匀）；湿混（将石灰和溶于水的辅料
制成母液，加入所需水量稀释后拌料）。
② 装瓶：闷 1-2个小时（夏季时间不宜过长）
待料充分吸足水后装瓶，装料至瓶肩，上紧下松
压平料面，擦净瓶口，打 1.5cm粗接种孔至瓶底
封口。
③灭菌：同谷料培养基制作
④出锅、冷却：同谷粒培养基制作
三、栽培种制作
制作方法基本同于原种制作。需要注意
的是栽培种培养基制作一般选用加富的培养
料，而且含水量要较原种加大，更利于菌种
快速吃料。容器可以用 500ml罐头瓶，也可
以用（ 17-18） X（ 30-35） X（ 0.04-0.05） cm
低压聚乙烯袋。
第三节 液体菌种制作技术
一、液体菌种制作的原理
食用菌液体菌种制作是在发酵罐中，采用液
体培养基通入无菌空气并加以搅拌，增加培
养基中溶氧含量，提供食用菌菌体呼吸代谢
所需要的氧气，并控制适宜的外界条件，获
得大量的菌丝体或代谢产物。
二、液体菌种制作的特点
1.原料来源广泛
2.菌丝体生长快速
3.生产周期短
食用菌深层发酵一般仅需 2-7d就可获得大量的菌丝体,
而固体培养则需 30-60d。
4.工厂化生产、无季节性
食用菌深层发酵是在发酵罐内、控制最佳条件来培养菌
体的，不受季节性限制。
三、液体菌种制作的用途
1.生产液体菌种
食用菌经深层发酵 2-7d的幼嫩菌丝体，可以用来作为食用
菌栽培用的原种和栽培种。
2.制备药物或提取生化制品
许多食用菌种类，其深层发酵培养的菌丝体可作为提取药
物成分或生化制品的材料。
3.制作食品或畜禽饲料
四、液体菌种制作的主要设备
1.摇床
往复式播床：振荡方式为来回振荡
旋转式摇床：振荡方式为旋转
四、液体菌种制作的主要设备
2.种子罐和发酵罐
许多食用菌种类，其深层发酵培养的菌丝体可作为提取药
物成分或生化制品的材料。
四、液体菌种制作的主要设备
3.空气净化设备
4.培养基连续灭菌设备
包括配料罐, 连消塔, 维持塔, 喷淋冷却器等 。
5,供气设备
主要是蒸气锅炉及附属设备
五, 液体菌种制作的主要工艺
1.种子制备
种子制备的目的是大量繁殖足够数量的、健壮的、高纯度
的种子
① 斜面菌种制备 。
② 摇瓶种子制备
③ 一级, 二级种子制备
一级种子罐通常为 50-100L,二级种子罐为 500-1000L。
六, 液体菌种制作的主要参数
1.菌龄
菌龄与种子的活力密切相关 。 通常, 摇瓶种子菌龄控制在
4-10d,一级种子和二级种子菌龄为 48-96H。
2.接种量
一般地, 食用菌深层发酵时的接种量为 10-20%。
3.温度
通常在 22-30℃ 生长最快, 得率最高 。
4.通气量
食用菌深层发酵的通气量以 0.2-1.5通气体积 /培养液体积
/min为宜 。
5.搅拌速度
食用菌深层发酵的搅拌速度一般是 180-500r/min。
6.酸碱度
不同种类的食用菌都有一个最适酸碱度, 例如, 黑木耳的
最适 pH为 6.0-6.5,金针菇为 6.3,香菇为 4.5-6.5。
7.罐压
在发酵过程中罐压通常为 0.2-0.7Kg/cm。
8.泡沫控制
在发酵过程中泡沫过多不利于发酵, 目前大多数是加入
0.006%的泡敌做消泡剂消除泡沫 。
9.发酵特点
发酵终点是否准确, 应参考产物浓度, 过滤浓度, 氨基酸
含量, 残糖量, 菌丝形态, pH,发酵液的外观和粘度等因
素才能决定 。
第一节 母种培养基制作
第二节 原种、栽培种培养基制作
第三节 液体菌种制作技术
教学目的,熟练掌握各级培养基
的制作方法 。
教学重点,培养基的制作方法 。
第一节 母种培养基的制作
一、菌种培养基
(一 )按营养物质种类分类
l.天然培养基 常用的生物材料有马铃薯、胡萝
卜、蚕蛹粉、豆芽汁、花生饼粉、玉米粉、酵母等。
适合于各类微生物的生长
2.合成培养基 是指用已知成分和数量的化合物配
制而成的培养基。适用研究
3.半合成培养基 利用天然物质作为碳、氮源及维
生素的来源另加一些无机盐类配制而成
(二 )按培养基的物理状态分类
1.液体培养基
不加琼脂，多用于生理生化方面研究,培养
液体菌种等。
2.固体培养基
凝固剂的量,琼脂冬季为 1.5%--2.0%,夏
季 2.2%--2.3%。
3.半固体培养基
含有较少量琼脂 (0.2%--0.5%)的培养基,
使培养基未达到固态而呈粘稠状态。
二, 母种培养基配方,
1.土豆 200g、糖 20g、琼脂 18g、水 1000ml
2.去皮马铃薯 200g,葡萄糖 20g,琼脂 18-20g,水
1000ml,PH值自然, 另外添加：麸皮 20g,玉米面 5g,黄
豆粉 5g,磷酸二氢钾 2g,硫酸镁 2g,VB11片 （ 10mg） 。 此
配方适用于大多数菌种, 金针菇, 黑木耳, 灵芝生长尤其
茁壮 。 可作黑木耳复壮培养基 。
3.去皮马铃薯 200g,葡萄糖 20g,琼脂 18-20g,水
1000ml,PH值自然, 另外添加：麸皮 20g,玉米面 5g,黄
豆粉 5g,磷酸二氢钾 2g,硫酸镁 2g,VB11片 （ 10mL）, 平
菇子实体 100g。 此配方适用于大多数菌种生长 。 做平菇的
复壮培养基效果显著 。
4.去皮马铃薯 200g,葡萄糖 20g,琼脂 18-20g,水
1000ml,PH值自然, 另外添加：麸皮 20g,玉米面 5g,黄
豆粉 5g,磷酸二氢钾 2g,硫酸镁 2g,VB11片 （ 10mg） 1片
,香菇子实体 100g。 此配方适用于大多数菌种生长, 可做
香菇的复壮培养基, 效果显著 。
（一）营养液制作 1,准备工作
三、制作方法
2,称量、材料预处理
按配方准确称量各营养物质。将马铃薯去皮、
挖掉芽眼后称量 200g，切成 1cm见方的小块。琼脂
剪碎后用水浸泡。
3,熬煮
将切好的马铃薯块加适量水后放入电饭锅中,
煮至酥而不烂 。
4,过滤、加可溶药物
用双层沙布过滤，取滤汁，放在电饭锅中加
入糖
5,熬琼脂、定容
在沸腾状态下加入琼脂，直到琼脂完全
溶化为止，定容至 1000ml。
（二）营养液分装
1,用注射器分装
2,分装标准,分装量为试管长度的 1/4—
1/5。注意培养基不能沾污试管口。
3.塞棉塞
棉塞松紧适度, 1/3在管外, 2/3在管内 。
4.扎捆
7-10支试管捆在一起, 棉塞上包好防水纸, 直
立放入高压灭菌锅中 。
(四 ) 摆斜面
灭菌结束后锅盖开 1/5的小缝，用余热烘干报纸和
棉塞，然后摆斜面。斜面长是试管总长的 1/2
（三）灭菌处理
在 1.0— 1.5 kg/cm2压力下维持 20--30min。
(四 ) 摆斜面
灭菌结束后锅盖开 1/5的小缝，用余热烘干报纸和
棉塞，然后摆斜面。斜面长是试管总长的 1/2
第二节 原种、栽培种培养基制作
一、常见原种配方
① 木屑培养基配方
细木屑 80%,麸皮 12%,玉米面 1%,黄豆粉 2%,过磷酸钙
1.5%,红糖 0.5%,尿素 0.4%,硫酸镁 0.1%,石灰 1%,石膏
2%,料：水 =1,1.0-1.2。 此配方适合香菇, 黑木耳, 平
菇原种生长, 菌丝粗壮洁白 。
② 玉米芯培养基配方
玉米芯 80%,麸皮 14%,糖 0.5%,过磷酸钙 1%,石灰 2%，
尿素 0.5%,玉米面 2%,料：水 =1,1.4-1.5。 此配方适合
于培养平菇原种, 菌丝生长速度快, 且菌丝粗状 。
③ 玉米芯, 木屑混合培养基配方
玉米芯 42%,木屑 20%,豆秸 20%,麸皮 10%,过磷酸钙
1.5%,石灰 2%,石膏 1%,糖 0.5%,玉米面 3%,料：水 1=1：
1.4-1.5。 此配方适合于培养平菇原种 。 生长健壮, 也可
培养金针菇, 滑子蘑原种 。
④ 软质木屑配方
椴木屑 75%（ 木线厂下脚料, 颗粒较大 ）, 麸皮 15%,玉
米面 5%,石膏 1.5%,石灰 1%,糖 0.5%,过磷酸钙 1.5%,尿
素 0.5%,料, 水 =1,1.2左右 。 适用于金针菇, 滑子蘑等
分解基质能力较弱的品种使用 。
⑤ 麦粒, 木屑培养基配方
新鲜, 优质小麦 80%,阔叶树木屑 20%,木屑：水 =1,1
左右, 拌木屑用煮小麦水, 或在此基础上, 加入总量 0.5%
的过磷酸钙, 0.5%的蔗糖,1%的石灰, 在麦粒煮好后连同
木屑拌入 。
⑥ 玉米粒培养基配方
优质新鲜玉米 100%,或后期加入 0.5%过磷酸钙, 0.5%的
糖,1%的石灰 。
玉米粒培养基制作的原种, 具备麦粒原种的优点, 后劲
更足, 接种扩繁量更大 。
二、原种培养基的制作方法
一、谷粒培养基制作
1.按配方称量各营养物质
配方一：优质新鲜小麦 65%,木屑 15%,棉籽
壳 15%,麸皮 5%,石膏 1%,过磷酸钙 0.5%,糖 0.5%，
尿素 0.5%
2.谷粒浸泡吸水
冬季浸泡 24-48小时，夏季加 1%石灰（以防变
酸）浸泡 24小时，隔夜换水。
3,煮沸、沥干捞出
泡好后，漂洗干净（去杂），煮至饱胀
无白心，切忌煮开花，沥干水分后捞出。
4,拌料
用煮小麦水拌木屑、棉籽壳、麸皮，最
后再一起与麦粒拌匀。
5.装瓶
(1)装料量应为 1/3或 1/2罐头瓶，便于培养
时摇动基料促进丝均匀生长。
(2)擦净并封瓶口
封口塑料袋采用规格为 13cm× 13cm× 0.004cm
高压聚丙稀袋，二层，里层在中央剪一 3cm宽
菱形口。至少二个皮套。
6.装锅灭菌
高压灭菌于 126℃ 左右维持 2小时；常
压灭菌于 100℃ 维持 10-12小时，夏季时间
可酌情延长。
7.出锅,冷却
冷却至 30℃ 以下待接种。
二,.木屑、玉米芯料培养基制作方法
1.按配方称料。
2.拌料：干混（将石膏和不溶于水的主料和
辅料混匀）；湿混（将石灰和溶于水的辅料
制成母液，加入所需水量稀释后拌料）。
② 装瓶：闷 1-2个小时（夏季时间不宜过长）
待料充分吸足水后装瓶，装料至瓶肩，上紧下松
压平料面，擦净瓶口，打 1.5cm粗接种孔至瓶底
封口。
③灭菌：同谷料培养基制作
④出锅、冷却：同谷粒培养基制作
三、栽培种制作
制作方法基本同于原种制作。需要注意
的是栽培种培养基制作一般选用加富的培养
料，而且含水量要较原种加大，更利于菌种
快速吃料。容器可以用 500ml罐头瓶，也可
以用（ 17-18） X（ 30-35） X（ 0.04-0.05） cm
低压聚乙烯袋。
第三节 液体菌种制作技术
一、液体菌种制作的原理
食用菌液体菌种制作是在发酵罐中，采用液
体培养基通入无菌空气并加以搅拌，增加培
养基中溶氧含量，提供食用菌菌体呼吸代谢
所需要的氧气，并控制适宜的外界条件，获
得大量的菌丝体或代谢产物。
二、液体菌种制作的特点
1.原料来源广泛
2.菌丝体生长快速
3.生产周期短
食用菌深层发酵一般仅需 2-7d就可获得大量的菌丝体,
而固体培养则需 30-60d。
4.工厂化生产、无季节性
食用菌深层发酵是在发酵罐内、控制最佳条件来培养菌
体的，不受季节性限制。
三、液体菌种制作的用途
1.生产液体菌种
食用菌经深层发酵 2-7d的幼嫩菌丝体，可以用来作为食用
菌栽培用的原种和栽培种。
2.制备药物或提取生化制品
许多食用菌种类，其深层发酵培养的菌丝体可作为提取药
物成分或生化制品的材料。
3.制作食品或畜禽饲料
四、液体菌种制作的主要设备
1.摇床
往复式播床：振荡方式为来回振荡
旋转式摇床：振荡方式为旋转
四、液体菌种制作的主要设备
2.种子罐和发酵罐
许多食用菌种类，其深层发酵培养的菌丝体可作为提取药
物成分或生化制品的材料。
四、液体菌种制作的主要设备
3.空气净化设备
4.培养基连续灭菌设备
包括配料罐, 连消塔, 维持塔, 喷淋冷却器等 。
5,供气设备
主要是蒸气锅炉及附属设备
五, 液体菌种制作的主要工艺
1.种子制备
种子制备的目的是大量繁殖足够数量的、健壮的、高纯度
的种子
① 斜面菌种制备 。
② 摇瓶种子制备
③ 一级, 二级种子制备
一级种子罐通常为 50-100L,二级种子罐为 500-1000L。
六, 液体菌种制作的主要参数
1.菌龄
菌龄与种子的活力密切相关 。 通常, 摇瓶种子菌龄控制在
4-10d,一级种子和二级种子菌龄为 48-96H。
2.接种量
一般地, 食用菌深层发酵时的接种量为 10-20%。
3.温度
通常在 22-30℃ 生长最快, 得率最高 。
4.通气量
食用菌深层发酵的通气量以 0.2-1.5通气体积 /培养液体积
/min为宜 。
5.搅拌速度
食用菌深层发酵的搅拌速度一般是 180-500r/min。
6.酸碱度
不同种类的食用菌都有一个最适酸碱度, 例如, 黑木耳的
最适 pH为 6.0-6.5,金针菇为 6.3,香菇为 4.5-6.5。
7.罐压
在发酵过程中罐压通常为 0.2-0.7Kg/cm。
8.泡沫控制
在发酵过程中泡沫过多不利于发酵, 目前大多数是加入
0.006%的泡敌做消泡剂消除泡沫 。
9.发酵特点
发酵终点是否准确, 应参考产物浓度, 过滤浓度, 氨基酸
含量, 残糖量, 菌丝形态, pH,发酵液的外观和粘度等因
素才能决定 。
