第三章 消毒与灭菌
教学目的,
掌握常见消毒药品；熟练掌握消毒、灭
菌技术；
教学重点,
消毒、灭菌技术
在制种过程中, 消毒与灭菌是不可缺少的环
节 。 消毒是指采用物理或化学的方法杀死物
体表面或环境中的部分有害微生物 ； 灭菌是
指用物理或化学的方法杀死物体中或环境中
的一切微生物, 也就是说灭菌的物体不再有
任何活的微生物存在 。
消 毒
一,常用消毒药剂及使用方法
1.高锰酸钾
强氧化杀菌剂, 常用 0.1－ 0.2%的溶液
（ 取高锰酸钾 1g,加水 1000ml） 对床架, 器
皿, 用具和皮肤表面消毒 。 随用随配
2,过氧化氢
氧化型消毒剂。市售品为 30%或 3%水溶液，常用
1%浓度消毒器皿、用具和皮肤。
组织分离时用 20%溶液浸种菇 1－ 3分钟。
3,漂白粉
常用 2－ 5%的漂白粉溶液（取 2－ 5g漂白粉加水
100ml）洗刷菇房的墙壁、床架、地面和用具等表面
消毒
4,甲醛
强还原性杀菌剂。市售品含量为 37－ 41%
喷雾：按 1,5的比例配成水溶液。
5,石炭酸
5%水溶液消毒，配制时先用热水溶化再加入所
需水量。
6,来苏儿（煤酚皂）
常用 1－ 3%的溶液擦洗或用于手、用具的浸泡
（ 2分钟）或空间喷雾。
7,乙醇
70－ 75%手、接种工具等表面消毒
8.新洁尔灭
原溶液为 5%，常用 0.25%浓度对手和器具作表
面消毒。
9.石灰（ Cao)，熟石灰 Ca(OH)2
压盖
10.多菌灵
产品多为 5%或 25%可湿性粉剂，常用于培养基
拌料消毒，添加量因品种而异。
11.甲基托布津
常见剂型为 50%,70%可湿性粉剂，生产上用
70%甲基托布津稀释 1000－ 1500倍喷雾菇床消毒。
二、消毒方法
（ 一 ） 空间消毒法
1.化学药剂喷雾消毒法,
2%－ 3%的来苏水, 2－ 5%漂白粉, 0.25%多菌灵或新洁尔
灭, 5%石炭酸, 1000－ 1500mg/L甲基托布津, 10%澄清
石灰水等
2.化学药剂熏蒸消毒法,
A.甲醛－高锰酸钾氧化熏蒸法
1m3空间用 10ml甲醛加 7g高锰酸钾熏蒸
,
B.气雾焚烧熏蒸消毒法,
1m3空间用 2g菇保 1号等气雾消毒剂熏蒸
3.物理消毒法
A.紫外线消毒
一般用 30－ 40W的紫外灯管, 有效作用距离为 1.5－ 2m
照射 20-30分钟以上 。
B.臭氧发生器
把空气中的 O2变成 O3,O3具有强氧化作用 。
（ 二 ） 物体表面消毒法,
1－ 3%的来苏儿溶液擦洗或用于手, 用具的
浸泡 （ 2分钟 ） 。
70－ 75%酒精手, 接种工具, 菇体表面等表
面 擦拭 消毒
0.1－ 0.2%的高锰酸钾溶液对床架, 器皿, 用
具和皮肤表面消毒 。
0.25%浓度对手和器具作表面消毒 。
（ 三 ） 培养料消毒
1.药物消毒
0.2%多菌灵, 0.1%克霉灵拌料消毒
2,生, 熟石灰
2-5%石灰拌料
3,巴氏消毒
法国微生物学家, 化学家路易士, 巴斯德首创的
低温消毒法 。 加热到 62℃, 经过 30分钟, 以杀死不耐
高温的物质中的微生物的消毒法 。
灭菌
一、灭菌方法
(一 )火焰灭菌法
利用酒精灯火焰外焰球形区域烧灼灭菌
适用于能耐高温而不被破坏的器物如接种
工具, 培养皿, 试管口或菌种玻璃瓶口, 也
可用于菇体等 。
（二）干热灭菌
利用加热的高温（ 160－ 170℃,维持 2小时）空气
使菌体蛋白变性从而达到灭菌。
适用于玻璃器皿、器械、棉塞、滤纸等
（三）高压湿热蒸汽灭菌,
适用于培养基、玻璃器皿及用具等的灭菌
手提式高压蒸汽灭菌锅的构造和使用,
1.构造,
（ 1）锅体：一般以 2KW电热管作内热源，直接浸在锅
内水中，通电后产生蒸汽。另附有支架，以承受内锅体。
（ 2）内锅：由铝楹嵌接而成，用于承放待灭物品。底
附有活动的栅格板，以防回流冷凝水将物品弄湿。其边
上还有一用于插排气管的槽。
（ 3）锅盖：上有木把手、安全阀、放气阀、压力表
（ 4）其它：橡皮垫圈、旋钮等
2.使用方法,
（ 1）加水：往锅里加水与支架齐平
或稍高出支架。
（ 2）装锅：往锅中放入培养基试管。
（ 3）封锅、接通电源：盖好锅盖，对角线拧紧螺旋。
关闭放气阀和安全阀，接通电源，加热。
（ 4）排冷空气：当压力达到 0.5 Kg/cm2 （ 0.05Mpa)
时，打开放气阀放冷气。
（ 5）升温升压：压力回零后，关闭放气阀，继续加热
加压。
（ 6）保温保压：当压力达到 0.1Mpa时计时，使压力保
持在 0.1－ 0.15Mpa之间，维持 20-30min。
（ 7）断电降温、出锅：灭菌完毕后，撤掉电源，压力
自然降到, 0”时打开锅盖，取出试管。
（四）常压湿热灭菌：用土蒸锅等进行灭菌
适用于原种、栽培种的培养基和熟料栽培的培养
料的灭菌 操作方法,
a 加水至八分满
b 装锅，要留有空隙。瓶呈品字形，袋呈井字形
c 关闭锅门，关严。
d 点火升温
e 加热到大气从气孔上冒出时开始计时。 8-10时。
f 闷一夜，待物料降温后出锅。
g 夏季装锅，装料要迅速，以防培养料酸败，影响灭
菌效果
教学目的,
掌握常见消毒药品；熟练掌握消毒、灭
菌技术；
教学重点,
消毒、灭菌技术
在制种过程中, 消毒与灭菌是不可缺少的环
节 。 消毒是指采用物理或化学的方法杀死物
体表面或环境中的部分有害微生物 ； 灭菌是
指用物理或化学的方法杀死物体中或环境中
的一切微生物, 也就是说灭菌的物体不再有
任何活的微生物存在 。
消 毒
一,常用消毒药剂及使用方法
1.高锰酸钾
强氧化杀菌剂, 常用 0.1－ 0.2%的溶液
（ 取高锰酸钾 1g,加水 1000ml） 对床架, 器
皿, 用具和皮肤表面消毒 。 随用随配
2,过氧化氢
氧化型消毒剂。市售品为 30%或 3%水溶液，常用
1%浓度消毒器皿、用具和皮肤。
组织分离时用 20%溶液浸种菇 1－ 3分钟。
3,漂白粉
常用 2－ 5%的漂白粉溶液（取 2－ 5g漂白粉加水
100ml）洗刷菇房的墙壁、床架、地面和用具等表面
消毒
4,甲醛
强还原性杀菌剂。市售品含量为 37－ 41%
喷雾：按 1,5的比例配成水溶液。
5,石炭酸
5%水溶液消毒，配制时先用热水溶化再加入所
需水量。
6,来苏儿（煤酚皂）
常用 1－ 3%的溶液擦洗或用于手、用具的浸泡
（ 2分钟）或空间喷雾。
7,乙醇
70－ 75%手、接种工具等表面消毒
8.新洁尔灭
原溶液为 5%，常用 0.25%浓度对手和器具作表
面消毒。
9.石灰（ Cao)，熟石灰 Ca(OH)2
压盖
10.多菌灵
产品多为 5%或 25%可湿性粉剂，常用于培养基
拌料消毒，添加量因品种而异。
11.甲基托布津
常见剂型为 50%,70%可湿性粉剂，生产上用
70%甲基托布津稀释 1000－ 1500倍喷雾菇床消毒。
二、消毒方法
（ 一 ） 空间消毒法
1.化学药剂喷雾消毒法,
2%－ 3%的来苏水, 2－ 5%漂白粉, 0.25%多菌灵或新洁尔
灭, 5%石炭酸, 1000－ 1500mg/L甲基托布津, 10%澄清
石灰水等
2.化学药剂熏蒸消毒法,
A.甲醛－高锰酸钾氧化熏蒸法
1m3空间用 10ml甲醛加 7g高锰酸钾熏蒸
,
B.气雾焚烧熏蒸消毒法,
1m3空间用 2g菇保 1号等气雾消毒剂熏蒸
3.物理消毒法
A.紫外线消毒
一般用 30－ 40W的紫外灯管, 有效作用距离为 1.5－ 2m
照射 20-30分钟以上 。
B.臭氧发生器
把空气中的 O2变成 O3,O3具有强氧化作用 。
（ 二 ） 物体表面消毒法,
1－ 3%的来苏儿溶液擦洗或用于手, 用具的
浸泡 （ 2分钟 ） 。
70－ 75%酒精手, 接种工具, 菇体表面等表
面 擦拭 消毒
0.1－ 0.2%的高锰酸钾溶液对床架, 器皿, 用
具和皮肤表面消毒 。
0.25%浓度对手和器具作表面消毒 。
（ 三 ） 培养料消毒
1.药物消毒
0.2%多菌灵, 0.1%克霉灵拌料消毒
2,生, 熟石灰
2-5%石灰拌料
3,巴氏消毒
法国微生物学家, 化学家路易士, 巴斯德首创的
低温消毒法 。 加热到 62℃, 经过 30分钟, 以杀死不耐
高温的物质中的微生物的消毒法 。
灭菌
一、灭菌方法
(一 )火焰灭菌法
利用酒精灯火焰外焰球形区域烧灼灭菌
适用于能耐高温而不被破坏的器物如接种
工具, 培养皿, 试管口或菌种玻璃瓶口, 也
可用于菇体等 。
（二）干热灭菌
利用加热的高温（ 160－ 170℃,维持 2小时）空气
使菌体蛋白变性从而达到灭菌。
适用于玻璃器皿、器械、棉塞、滤纸等
（三）高压湿热蒸汽灭菌,
适用于培养基、玻璃器皿及用具等的灭菌
手提式高压蒸汽灭菌锅的构造和使用,
1.构造,
（ 1）锅体：一般以 2KW电热管作内热源，直接浸在锅
内水中，通电后产生蒸汽。另附有支架，以承受内锅体。
（ 2）内锅：由铝楹嵌接而成，用于承放待灭物品。底
附有活动的栅格板，以防回流冷凝水将物品弄湿。其边
上还有一用于插排气管的槽。
（ 3）锅盖：上有木把手、安全阀、放气阀、压力表
（ 4）其它：橡皮垫圈、旋钮等
2.使用方法,
（ 1）加水：往锅里加水与支架齐平
或稍高出支架。
（ 2）装锅：往锅中放入培养基试管。
（ 3）封锅、接通电源：盖好锅盖，对角线拧紧螺旋。
关闭放气阀和安全阀，接通电源，加热。
（ 4）排冷空气：当压力达到 0.5 Kg/cm2 （ 0.05Mpa)
时，打开放气阀放冷气。
（ 5）升温升压：压力回零后，关闭放气阀，继续加热
加压。
（ 6）保温保压：当压力达到 0.1Mpa时计时，使压力保
持在 0.1－ 0.15Mpa之间，维持 20-30min。
（ 7）断电降温、出锅：灭菌完毕后，撤掉电源，压力
自然降到, 0”时打开锅盖，取出试管。
（四）常压湿热灭菌：用土蒸锅等进行灭菌
适用于原种、栽培种的培养基和熟料栽培的培养
料的灭菌 操作方法,
a 加水至八分满
b 装锅，要留有空隙。瓶呈品字形，袋呈井字形
c 关闭锅门，关严。
d 点火升温
e 加热到大气从气孔上冒出时开始计时。 8-10时。
f 闷一夜，待物料降温后出锅。
g 夏季装锅，装料要迅速，以防培养料酸败，影响灭
菌效果
